Ақпарат

Киназа, фосфатаза және АТФаза, GTPase (GTP/ATP) арасында қандай байланыс бар?


Мен олардың арасында қандай байланыс бар деп ойлаймын Киназа, Фосфатаза, АТФаза (АТФ) және GTPase (GTP).

Мысалы, желіде оқығанда осындай әсер пайда болады АТФаза түрі болып табылады Киназа (?). Бірақ мен бұл туралы нақты ақпарат таба алмаймын.


Фермент атаулары әдетте ферменттің субстратына, яғни фермент нысанаға алатын, содан кейін алып тастайтын немесе өзгертетін молекулаға немесе химиялық топқа сілтеме жасайды.

Киназалар - бұл ферменттер қосу фосфат топтары, әдетте басқа ақуыздарға. «Шығармашылық» атауы бар ескі ферменттер кластарының бірі. Фосфатазалар жою фосфат топтары.

Сигнал беру жолдарында киназалар жиі сигналдарды түрлендіреді және фосфатазалар жұмысы аяқталғаннан кейін оларды өшіреді.

ATPase және GTPases тиісінше ATP және GTP-ге бағытталған және бір фосфат тобын гидролиз арқылы жоюды катализдейді, өнім ADP немесе GDP болып табылады. Бұл оларды бір түрге айналдырады фосфатаза.

Көптеген ақуыздар ATP/GTPase болып табылады, бірақ олардың атаулары маңыздырақ болғандықтан, олардың атаулары әртүрлі. Әдетте ATP/GTPase функциясы негізгі функция үшін энергияны жеткізу үшін қызмет етеді. Сіздің әсеріңіз киназа және АТФаза болып табылатын ферменттен туындауы мүмкін, себебі ол фосфат топтарын АТФ-дан мақсатты ақуызға тасымалдайды.

ADP/GDP-ге бағытталған және басқа фосфат тобын қосатын ферменттер ATP/GTP синтазалары (киназалар емес) деп аталады.


Биохимиялық бөлім 2


*гликоген қорларынан глюкозаның тез бөлінуіне мүмкіндік береді, себебі гликогенде крахмалмен салыстырғанда (бұл амилопектин жіптері) (ол гликоген 8- болған кезде әрбір 24-30 қалдық сайын тармақталған) тармақталудың таңқаларлық мөлшеріне байланысты редукцияланбайтын ұштары өте көп. 12 қалдық)

бұл қанттар С1-де фосфорланады

бейорганикалық фосфат G1P түзетін глюкоза молекулалары арасындағы гликозидтік байланысқа, содан кейін гликогеннің бір глюкоза бірлігіне азаяды

аралық - глюкоза 1,6-бисфосфат

глюкоза 6-фосфаттан глюкоза 1-фосфатқа өту үшін қолданылуы мүмкін

гликогенфосфорилаза әсерінен ашылған альфа 1,6 тармақталу нүктелерін алады.

трисахаридті (альфа 1,6 байланысын құрайтын қалдықты қалдырып) жаңа альфа 1,4 гликозидтік байланысты (альфа 1,4 трансфераза) құрайтын тізбектің соңғы ұшына жылжытады.

екіншісі тармақталған нүктеде болған глюкоза мономерін жояды (альфа 1,6 глюкозидаза) альфа 1,6 байланысын гидролиздейді.

осыдан кейін гликоген фосфорилаза қайтадан жұмыс істей бастайды

крахмал а-амилаза изозимімен ыдырайды

декстриназа - тармақталу нүктелері бар амилопектиннің кіші тізбегінде жұмыс істейді

ұсақ дисахаридтер мен олигосахаридтерді өндіруді жалғастырады

ол қант/глюкоза молекуласын әкелген кезде Na+ жасушаға пассивті диффузиясын теңестіреді.

F1P (альдол) глицеральдегид пен дигидроксиацетонфосфатты өндіру үшін фруктоза 1-фосфат альдолазаның көмегімен екі 3С қосылыстарына бөлінеді.

сондықтан ешқандай фосфорланған глицеральдегид глицеральдегидкиназаны қолдана алмайды немесе басқа жолмен жүре алмайды (басқа флешкартада)

глицерин АТФ және глицерин 3-фосфат түзетін глицеринкиназамен фосфорланады.

гексокиназа бауырда кездеседі
бауырда фруктозаны өзгерту процесі әлдеқайда ұзағырақ

Лелуар жолы арқылы галактоза 1-фосфат UDP-галактозаға, ал UDP-глюкоза өзінің UMP-ті бергеннен кейін глюкоза 1-фосфатқа айналады.

C4 OH C=O дейін тотығады және NAD+ NADH (өтпелі) дейін тотықсызданады.

глюкокиназа оны ядроның ішінде сақтайтын глюкокиназаны реттейтін протеинмен байланысады

АТФ, ұзын тізбекті FA, ацетилко-А тежейтін PK

F2,6P конс. жоғарылағанда, бұл ПФК-1 белсенділігін арттырады

дефосфорлану = F6P көп, бұл F2,6P аз дегенді білдіреді

Бұл бауырға глюкозаны пайдалануды тоқтату керек дегенді білдіреді

бауырда глюкагон жасушалардағы белгілі бір рецепторларға (G-белокпен байланысқан рецепторларға) қосылады, содан кейін аденилил циклазасын белсендіреді.

аденилил циклаза циклдік AMP (cAMP) өндіру үшін АТФ пайдаланады.

Содан кейін cAMP киназаның белгілі бір түрін арттырады (cAMP-тәуелді киназа) немесе PKA (протеинкиназа А) белсендіріледі.

PKA белгілі нысандарды фосфорлайды, мысалы, F6P <--> F2,6P қолданылатын тандем ферменті

экзергониялық реакция, бұл реттелетінін білдіреді (транскрипциялық және потенциалды фосфорлану және ацетилдену)

- гибридтер (M1H3, M2H2, M3H1) барлығы ми мен бүйректе кездеседі (LDH A + LDH B қоспасы)

тетрамердегі LDH M санын азайтқан сайын оның салмағы жеңілірек және электрофорез геліндегі ұңғымадан алысырақ болады.

(re) H алынады және альфа көміртекке қосылады (жазық NAD жүйесінің жоғарғы фазасы)

пируват -(пируват декарбоксилат)-&гт ацетальдегид + СО2
-TPP, Mg2+ қолданады

ацетальдегид--(спиртдегидрогеназа)--&гтетанол
--сонымен қатар NADH-->NAD+

белсендірілген пішін N және S арасындағы көміртегідегі H жоғалған кезде, бұл қышқыл протон

екінші 5 мүшелі сақина құрылымы қалай аталады

H+ қосу арқылы бізде ковалентті байланыс кофактор-субстрат бар

C=O жанындағы іргелес байланыс үзіліп, СО2 бөлінеді

2 көміртегі бірлігі әлі де кофактормен байланысқан (Бұл резонанс тұрақтанды!!)

карбанионның формасы гидроксиэтил ТПП түзу үшін протонданады (бұл белсенді альдегид)

гидроксиэтил TPP, мұнда CH3CHOH тобы TPP молекуласына қосылған

гистидин мен цистеин қалдықтары мырышпен әрекеттеседі

мырыш ацетальдегидті одан да көп тартып алуға көмектеседі, бұл оны NADH тобынан позитивті және жеңілдетеді және H тасымалдануын қамтамасыз етеді.

стереоселективтілік. H қайтадан артқы жағына ауыстырылады (жоғарғы жағы)

(2 түрлі стереоселективті сипаттамалар)

оны көру үшін NAD-де дейтерийді пайдалана алады, ол хиральды cpd түзеді

Сыртқы және ішкі мембраналар құрылымы, құрамы және ақуыздары жағынан әртүрлі

Митохондриялық мембрана арқылы өту үшін бізге тасымалдаушы қажет
--пируват транслоказасы және симпорттағы протондармен жұмыс істейді

кофакторлар: CoA-SH, NAD+, TPP, липоат, FAD
фермент: пируватдегидрогеназа кешені (E1 + E2 + E3)

өнімдер = NADH, ацетил-КоА, СО2

Митохондриялық матрицада ацетил-КоА-ға айналу митохада жүреді.

тотыққан пішін липамидтің қалпына келтірілген түріне қосылған 2С бірлігіне ауысады (дитиол формасы, бірақ субстратқа бір күкірт бекітілген)

ферментпен: дигидролипоилтрацетилаза

дигидролипамид + Ацетил-КоА түзеді

-пантотен қышқылының қалдығы = В5 дәрумені (біз диетамен бірге қабылдауымыз керек)

"mercapto" құрамында күкірт бар
"этил" 2 көміртек
"amine' NH тобы
бета, себебі ол аминге бета күйінде

бұл нуклеотидті құрайтын кофактор

E3 (пируватдегидрогеназа кешені) тотығады және дитиол

E3 екі күкірт бар тотыққан күйде басталады, содан кейін реакциялардан кейін E3 және E2 тотығу күйлері ауысады.

E3 дисульфидті түрі тотығу арқылы қалпына келеді

енді FADH2 қысқартылған пішін, бірақ бізге тотыққан пішін қажет

сондықтан NAD+ пайдаланыңыз, ол төмендейді және FADH2 тотығады

ацетил-КоА-дан CH3-C=O тобы цитрат түзетін оксалоацетатқа ауысады.

Аспартат қалдығы (Н) ацетил Co-A-дан аралық карбанион түзеді, содан кейін энол түзеді.

энолдағы қос байланыс оксалоацетатқа C=O әсер етеді (жартылай + заряд)
--оксалоацетат C=O екінші гистидин қалдығының көмегімен OH-ға дейін тотықсызданады.
---Хиралды аралық өнім шығарады: S-Citryl-CoA

--суды пайдаланып C=O және SCoA арасындағы 6С қосылыс үзілісіндегі тиоэфирлік байланысты гидролиздеу
--> бұл цитрат шығарады және CoA-SH шығарады

--> көміртегімен байланысқан екі бірдей иық бар, бірақ бір pro-R иін және бір pro-S иінгі бар (молекуланың прохиральдылығын көрсетеді) --> фермент екі қалдықты ажырата алады

цис-аконитаза + аконитаза (қайтадан) ---> 2R, 3S изоцитрат (хиральды cpd 2 хиральды орталық)

сусыздандыру, содан кейін қайтадан ылғалдандыру

Серин негіз ретінде әрекет етеді, ол цитраттан Н-ді алып, қос байланыс жасайды

Ол OH тобын протонаттар үшін Н береді және оны су молекуласы ретінде жоюға көмектеседі

cis-Aconitase қос байланыспен жасалған, содан кейін ол қандай да бір жолмен
ол 180 айналдыру болатындай етіп қайта бағдарланған, содан кейін C2 және C3 позициялары ауысқанда,

олардың әрқайсысы не істейді

апофермент темір гомеостазына қатысатын мРНҚ-мен байланысады

трансфериннің (қандағы темірді тасымалдайды) және трансферин рецепторларының концентрациясы жоғарылайды және фератин (темірді сақтайды) төмендейді.

фермент: изоцитратдегидрогеназа
NAD(P)+ --> NAD(P)H + H+
CO2 шығарылады

ферменттің қай формасы қолданылатынына байланысты NAD+ немесе NADP+ пайдаланылады

Митохондриялық матрицадан табылған NAD+ бір
NADP+ матрицада және цитозольде кездеседі

3. бета позициясында карбонил тобы бар, альфа көміртегінде карбоксил тобы бар бұл бета кетоақышқыл.

Тұрақсыз бета кетоқышқылдары СО2 құрамындағы карбоксил тобын шығаруға көмектеседі

аралық Mn2+ тұрақтандырылған энолат

CO- протондап, альфа-кетоглутарат жасайды

реттелетін, қайтымсыз, экзергоникалық

кетонның тиоэфирмен ацетил-КоА-ға байланысты қышқылға тотығуы

Е2-дигидролипоилтрансукцинилаза
Е3- дигидролипоилдегидрогеназа

сукцинил-КоА -----&гт сукцинат
фермент: сукцинил-КоА синтетаза

ЖІӨ (ADP)+ Pi ---> GTP (ATP) + CoA-SH

5-қадамда ол басқа жолмен жүреді, бірақ оның атауы синтетаза, ол ацетил КоА-ны бөліп алу және ATP/GTP генерациялау үшін ADP/GDP пайдаланады.

- бұл сукцинил-фосфат Co-ASH жоғалған деп аталатын фосфорланған туынды (ацилфосфат тобы) шығарады

-фермент фосфатты гистидинге тасымалдайды, ол сукцинатты және қазір энергияға бай 3 фосфогистидинді шығарады.

дегидрлеу rxn транс қос байланысын (фумаратты) жасайды, сондықтан оның стереоселективті rxn

фумараза = фумаратгидратаза

карбанион – фумаратқа OH қосып, карбанион күйін шығарады, содан кейін H = S-малат қосыңыз

--ОН-ның кетонға дейін тотығуы
- NADH + H+ түзу үшін NAD+ (тотықсыздану-тотықсыздану потенциалы жоғары) азаюы

эндергоникалық реакция, бірақ бұл физиологиялық жағдайларда болады, өйткені оксалоацетат үнемі жұмсалады, сондықтан өнім lvl төмен деңгейде сақталады.

бұлшықеттің жиырылуы үшін АТФ қажет, сондықтан Ca2+ жоғарылағанда, бұл пируватдегидрогеназа кешенінің белсендірілуі туралы сигнал береді және бұл кребс циклін белсендіруге көмектеседі.

фосфатты E1-ден өзіне ауыстырады, E1 кешенін қайтадан белсендіреді

май қышқылдары/липидтер митохондриядан тыс цитоплазмада (ER) түзіледі

Біз CoA-ны қалаймыз, бірақ ол митохондрияны қалдыра алмайды, бірақ цитрат пориндер арқылы диффузия арқылы кете алады және кетеді.

цитрат-лиаза цитоплазмада цитраттан ацетил-КоА және оксалоацетат түзу үшін қолданылады.

ATP пайдаланады, өйткені біз ацетил КоА-да кездесетін тиоэфирлік байланысты қайтадан жасаймыз.

олар бір-біріне оңай ауыса алады (амин қышқылының алмасуында қолданылады)

глутамат--> глутамин, пролин, аргинин

Оксалоацетаттың альфа позициясында кетон бар, бірақ Asp бұл позицияда аминге ие

аспартат пиримидиндер жасау үшін қолданылады

аспартат аспарагин жасау үшін қолданылады

оксалоацетат фосфоэнолпируватқа айналады (ол глюконеогенезде глюкозаны гликолизге қарама-қарсы жүреді)

--> аралық = cis-aconitate
--> 180 градусқа айналдыру
--> Гистидиннің OH тобы C2 шабуылына ұшырайды
--> қос байланысы C3 үшін Сериннен H алу үшін ауысады
--> бұл 2R, 3S-изоцитрат шығарады
(С2-де OH тобы және C3-те H енді хираль молекуласын жасайды)

белсенді қалдықтар: гистидин және серин
тұрақтандыратын қалдықтар: аргинин (COO- және аспартатты тұрақтандырады (OH жинайтын гистидинді тұрақтандырады)

--> өт бауырда өндіріледі, өт қабында сақталады және аш ішекте бөлінеді
(липидтерді эмульсиялайды - ішек/ұйқы безі липазасы триацилглицеролдарды ыдыратады - біздің денеміздегі майлардың 90% -ы)

липидтерді эмульсиялау = кіші липидтер
Ішек липазалары (және ұйқы безінің липазалары) триацилглицериндерді ыдырату үшін колипазамен жұмыс істейді.

(май қышқылы көміртегі мен глицериннің оттегі арасындағы байланысты үзеді)

көміртегі мен оттегі арасындағы

-хиломикрондар сол липидтерді (өзегінде) алып, қан мен лимфа жүйесіне өтеді.

-арнайы тіндерге жеткеннен кейін липидтер (1) сақтау үшін (2) энергия өндіру үшін ыдырайды.

--бірқабатты фосфолипидтер мен холестериннен тұрады
--бір қабатқа енген аполипопротеидтер

Хиломикрондарға арнайы Apo CII қосылған аполипопротеиндердің бірімен белсендірілген

белсендірілген кезде триглицеридтерді ыдыратады, осылайша олардың май қышқылдары жойылып, жасуша (1) энергия немесе (2) жинақталады.

олар қайтадан триацилглицеринге айналады және капиллярлар арқылы қайтадан жіберілетін арнайы аполипопротеиндермен оралады (дене отынның жұмысын қамтамасыз ете алады)
---> бұлар VLDL деп аталады

Глюкагон мен эпинефрин (адреналин) бөлінсе, бұл жинақталған липидтердің ыдырауын бастайды.

ұйқы безінен глюкагон
адреналин бүйрек үсті безінің миы арқылы

фермент = триацилглицерин-липаза май қышқылдары мен май қышқылдарын босататын глицерин арқалығы арасындағы эфир байланыстарын бұзу арқылы триацилглицериндерді ыдыратады

бірақ ыдыраудың тек 2-3% ұлғаюы триацилглицерин-липазаның активтенуінің нәтижесі болды, сондықтан ыдырау тағы қалай өсті?

сондықтан адипоциттерде липидті тамшыларда сақталатын майды ыдырату үшін тамшылардың ішіндегі сол липидтерге қол жеткізу керек.

Гликолитикалық жолға ену тек бауыр (көбінесе) және бүйрек (кейде) арқылы жүреді.

май тінінде болмайды, өйткені киназа ферменті жоқ

глицерин --> L-глицерин 3-фосфат глицеринкиназаны қолдана отырып

глицерин 3-фосфат ---> дигидроксиацетонфосфат глицерин 3-фосфатдегидрогеназа (NAD+ --> NADH пайдаланыңыз)

дигидроксиацетонфосфат ---> D-глицеральдегид 3 фосфат триозафосфат изомеразаны қолдану арқылы

май тінінде глюкозаның ыдырауы глицерин 3-фосфатты алу үшін қолданылады, содан кейін триацилглицериндерді жасауға болады.

бауырда сіз глицерин 3-фосфатты жасау үшін липидтердің ыдырауынан глицеринді пайдаланасыз

1. май қышқылдарын белсендіру керек (ацетил-КоА-ға қосылу арқылы)

--сыртқы митохондриялық мембраналардағы изозимдерді майлы ацил-КоА синтетазалары деп атайды, олар АМФ-ты май қышқылына қосу үшін АТФ пайдаланады.

бұл енді майлы ацил-аденилат (ферментпен байланысқан) (негізінен AMP молекуласы)

AMP май қышқылына қосылу үшін қолданылады, содан кейін май қышқылына шабуыл жасау үшін CoA-SH түскен кезде жойылады -15 кдж/моль энергия

пирофосфат бейорганикалық пирофосфатазамен ыдырайды, ол -19кдж/моль бөледі.

Оларды матрицаға енгізу үшін біз карнитинді қолдануымыз керек

карнитиндегі OH тобы май қышқылына қосылып, CoA-SH-ны шығарады
- бұл [карнитин пальмитоилтрансфераза I] көмегімен орын алады.
--pdts: ацил-карнитин және CoA-SH
--тиоэфирлік байланыстан қалыпты эфирлік байланысқа өту

--ацил-карнитин/карнитин тасымалдаушылары ацил-карнитинді ішкі митохондриялық мембрана арқылы тасымалдай алады.

карбонил көміртегінің бета көміртегі тотығады

2. бета көміртегіге OH қосу үшін су қосыңыз
--эноил-КоА гидратаза + H2O
-pdt: L-Бета-гидрокси-ацил-КоА

3. L-Бета-гидрокси-ацил-КоА В-көміртегінде кетонға айналады.
--В-гидроксиацил-КоАдегидрогеназа
--NAD+ NADH + H+ дейін
-pdt: B-кетоацил-КоА

4. қолдану арқылы ацетил-КоА ыдырайды
--ацил-КоА ацетилтрансфераза (тиолаза)
--Бета көміртегіне (тиоэфир байланысы) қосу мүмкіндігі үшін CoA-SH пайдаланыңыз.
-Тынық мұхитындағы Оңтүстік Америка жазғы уақыты. ацил-КоА (минус 2 көміртек) және ацетил-КоА

альфа және бета көміртектер арасындағы байланыс В-көміртегі C=O түрленген сайын үзіледі.

-сукцинаттан фумаратқа ауысқанда, ол тотығу және қос байланыс құру үшін FAD --> FADH2 пайдаланады.

- бұл электрондар FAD-ға қосылады, содан кейін олар Fe-S кластері арқылы өтеді, содан кейін убихинон
Коэнзим Q

электрондар ацил-КоА арқылы өтеді, онда олар FAD-ға қосылады, содан кейін ол тағы екі ақуыз арқылы өтеді

ETF (электронды тасымалдайтын флавопротеин) ацил-КоА Дехиден H-ны алған кезде азаяды. = FADH2

содан кейін ол FAD-қа дейін тотығады және ETF-Q оксидоредуктазасының (қолданылатын 3-ші ақуыз) өзінің FAD бар, ол H+ қабылдайды және қазір FADH2-ге дейін төмендейді, ал ETF-де FAD бар.

ETF-Q ақырында убихинонға e- жібереді

[пируват карбоксилаза пируваттан шығу үшін биотинді пайдаланады --> оксалоацетат]

содан кейін
-D-метилмалонил L-метилмалонил-КоА-ға айналады
-метилмалонил-КоА эпимераза

белсенді емес формалар: циано тобы

-цис қос байланысынан 3 көміртекті алғанға дейін бірдей әдіс

содан кейін сіз цис дельта-3 ацил-КоА-ны транс-дельта-2 ацил-КоА-ға айналдыратын эноил-КоА изомеразасын қолданасыз

содан кейін ол L-B-гидроксиацил КоА жасау үшін энил-КоА гидратаза мен H2O көмегімен В-тотығуымен жалғаса алады.

содан кейін бета көміртегідегі OH тотықтырғышын және бета-кетоацил-КоА жасау үшін гидроксиацил-КоА дегидрогеназаны қолданыңыз

1. В-тотығу C7 дейін
2. Эноил-КоА изомераза транс С2 С=С байланысын жасайды
3. В-тотығуды аяқтау

басқа мәселеге тап болмас бұрын соңғысын жоюға болады

келесі тотығуды бастағаннан кейін, транс қос байланысын енгізгенде, енді сізде екі жақын C=C байланысы бар, бір транс және бір cis

5. NADPH --> NADP+
2,4 диенойл-КоА редуктазаны қолданыңыз
ол trans delta 2 cis delta 4-ті trans delta3-ке түрлендіреді

6. эноил-КоА изомераза транс-дельта2-ге айналады

9 ацетил-КоА молекуласы = кребс циклінің 9 айналымы

18 CO2 (9x2)
9 GTP (немесе ATP баламасы) (9x1)
9 FADH2 (9x1)
27 NADH (9x3)

9 ацетил-КоА түзу үшін В-тотығудың 8 циклі
--8 FADH2 (8x1)
--8 NADH (8x1)

жалпы ATP =
17 FADH2 (x1,5)
35 NADH (x2,5)
9 GTP (x1)

барлығы 122 АТФ молекуласы
бірақ белсендіруден 2 шегеріңіз

В-гидроксилдедрогеназа (В-кетоацил-КоА жасау үшін NAD+ пайдаланады)
NADH көп болғанда --> тежеледі

1. тиолаза ацетил-КоА молекулаларына қосылып, бір CoASH бөледі, ацетоацетил-КоА түзеді.

2. HMG-CoA синтазасы В-гидрокси-В-метилглутарил-КоА алу үшін ацетил-КоА және суды пайдаланады (басқа 2C cpd қосады, осылайша жалпы 6С болады)
--> CoASH шығарады
---> HMG-CoA жасалады

3. HMG-CoA лиазасының көмегімен ацетил-КоА ыдырап, ацетоацетат (кетон денесі) түзіледі.

екі ықтимал тағдыр
A. ацетоацетатты декарбоксилазаны қолдану арқылы ацетон өндіру (немесе өздігінен жүреді) және СО2-ны кетіру
--> ацетон метаболизденбейді, ол деммен шығарылады
---> қант диабетінде

B. энергияны өндіру жолы ацетоацетат кетон L-B-гидроксибутиратдегидрогеназа және NADH арқылы D-B-гидроксибутират алу үшін NAD+-қа дейін гидрокси тобына дейін тотықсызданады.


Тіндердің трансглютаминаза изоформаларының индукциясы және транслокациясы ретино қышқылымен өңделген эритролейкемия жасушаларында фосфорланудың жоғарылауы

Тіндердің трансглютаминазасы (TGC, TG2, 80 кДа) кросс-байланыс реакцияларында белсенді емес және in vitro және in vivo TG (55 кДа) белсенді изоформасына айналады (Fraij in J Cell Biochem 112:2469–2489, 2011). Адам TGC екі изоформасы ретиной қышқылымен (РА) индукцияланған адам эритролейкемиясының (HEL) жасушаларынан клондалған және TGH, 63 кДа (Fraij et al.J Biol Chem 267:22616–22673, 1992) және TGH2, 37 кДа. Тазартылған TGC изоформалары GTPase белсенділігін көрсетті, ал TGH және TGH2 жергілікті TGC протеиніне қарағанда жоғары белсенділік көрсетті. Барлық зерттелген қалыпты жасушаларда TGC мембраналық фракцияларда супернатанттық фракциялардан бірнеше есе жоғары болды, алайда HEL ісік жасушаларының табиғи сызығында TGC жасушалық таралуы кері болды. TGC қалыпты адам эритроциттерінің негізгі ферменті болғанымен, HEL жасушаларында оның экспрессия деңгейі айтарлықтай төмендеді. РА емдеу HEL жасушаларында TGC протеині деңгейінің жеті есе жоғарылауын тудырды және оның жасуша мембраналарына ауысуымен қатар жүрді. Қалыпты адамның ұрық терісінен (CF3), қалыпты адам эмбриондық өкпесінен (WI-38) және РА бар немесе онсыз HEL жасушаларынан оқшауланған мембрана мен үстіңгі қабат фракциялары 37 °C температурада 1 сағат бойы [32 P]-ATP инкубациялағанда, одан да көп. радиобелгіленген ақуыздар цитозолдық фракцияларға қарағанда мембраналық фракцияларда анықталды. Бақылау HEL жасушаларының сығындыларымен салыстырғанда РА өңделген HEL жасушаларында көбірек таңбаланған ақуыз жолақтары анықталды. Радиобелгіленген ақуыздар РА өңделген HEL мембраналық фракцияларында TGC изоформаларымен коиммунопреципитацияланады, осылайша радиобелгіленген материал TGC изоформаларымен байланысты эндогендік ақуыздардан тұратынын растайды. Ақуыздың фосфорлануы РА өңделген жасушалардағы изоформалардың индукциясы мен транслокациясымен байланысты. Бұл нәтижелер TGC изоформасының белоктармен in vivo кешендерін құрайтынын және бұл ақуыздардың фосфорлануы тікелей TGC киназа белсенділігімен немесе жанама түрде басқа протеин киназаларының TGC фосфорлануымен катализденетінін көрсетеді.

Бұл жазылым мазмұнының алдын ала қарауы, мекеме арқылы қол жеткізу.


Аннотация

ATP гидролизі көптеген жасушалық процестерді басқаратын тірі жасушалардағы негізгі реакция болып табылады. АТФ-дан гамма-фосфаттың бөлінуін, оны ADP-ге айналдыруды қамтитын реакция қоршаған ортаға тәуелді ассоциативті немесе диссоциативті механизм арқылы жүреді деп болжанған. Алдыңғы кванттық химиялық зерттеулерде қоршаған сулы ортаның релаксациясына байланысты бос энергия үлестерін ұстай алмаған қысқа модельдеу уақыт шкалалары зардап шекті. Біз NAMD және OpenAtom имитациялық пакеттерінде біріктірілген жазық толқын және Эйлер экспоненциалды сплайн негізіндегі QM/MM модельдеулері үшін қос торды, қос ұзындық шкаласының әдісін пайдалана отырып, жоғары параллельді QM/MM енгізуін әзірледік. Хабарламаға негізделген параллельдік кванттық және классикалық динамиканы пайдалана отырып, бұл тәсіл АТФ гидролизі сияқты кванттық химиялық оқиғалар үшін жеткілікті уақыт масштабындағы модельдеуге мүмкіндік береді және гидролизге еріткіш релаксациясының бос энергия үлестерін дәл және сенімді түрде қамтитыны анықталды. Бұл жұмыста біз еріткіш релаксациясының бос энергия үлесін есепке ала отырып, АТФ гидролизінің ассоциативті және диссоциативті механизмдерін зерттеу үшін қос торлы, қос ұзындықты жазықтық толқынға негізделген QM/MM әдісін қолдануды сипаттаймыз. реакциядағы Mg 2+ негізгі рөлі.


Актин жіпшелері қалай өседі?

42 кДа құрылымдық ақуыз барлық эукариоттық жасушаларда (нематодты сперматозоидтардан басқа) кездеседі. Бастапқы құрылымда 95%-дан астам сақталуымен актин ең жоғары сақталған белоктардың бірі болып табылады [1]. G-актин деп аталатын актиннің мономерлі, глобулярлық түрі актин жіпшелерінің негізгі бірлігін құрайды. Көптеген жағдайларда актин жіптері басқа актин жіпшелерімен біріктірілуі мүмкін немесе олармен байланысты қозғалтқыш ақуыздарымен (мысалы, миозиннің суперфамилиясымен) актин цитоскелеті деп аталатын күрделі желіні құрайды. Бұл ең алдымен плазмалық мембранада немесе оның жанында болады. Демек, актин жіптерінің тығыздығы жоғары аймақ әдетте жасуша шетінде кездеседі және жасуша қыртысы деп аталады. Жасуша қыртысындағы актин жіпшелері жасуша бетінің пішінін, қаттылығын және қозғалысын анықтайды. Актин цитоскелеті сонымен қатар механикалық сигналдардың берілуін жеңілдетеді және жасуша қозғалғыштығы, бұлшықет жиырылуы, жасушаның бөлінуі, цитокинез, везикулалар мен органеллалар қозғалысы және жасуша сигнализациясы сияқты көптеген жасушалық функциялар үшін қажет жасушаішілік күштерді жасай алады. Актин сонымен қатар жасуша қосылыстарының қалыптасуына және сақталуына ықпал етеді.

Мұнда [3] көрсетілген құрылым RSCB протеин деректер банкінен (PDB файлы: 1atn) жүктелген. ATP байланыстыру саңылауы оң жақта жұлдызшамен (*) белгіленген. Актин SD1 (көк), SD2 (қызыл), SD3 (сұр) және SD4 (жасыл) деп аталатын төрт қосалқы доменнен тұрады. Әрбір мономердің тікенді ұшы (SD1 және SD3) сол жақта және сүйір ұшы (SD2 және SD4) оң жақта көрсетілген. Осы мономерлерден тұратын актин жіпшесінің полярлығы да сол жақта тікенді (+) ұшымен және оң жақта сүйір (-) ұшымен төменде көрсетілген.

Жоғары эукариоттар әдетте туысқан гендер тобымен кодталған актиннің бірнеше изоформаларын білдіреді. Актин изоформалары изоэлектрлік нүктесіне сәйкес үш класқа (альфа [&альфа], бета [&бета] және гамма [&гамма]) бөлінеді. Жалпы, альфа-актиндер бұлшықеттерде (&альфа-қаңқа, &альфа-аорта тегіс, &альфа-жүрек және &гамма2-ішекті тегіс) кездеседі, ал бета және гамма изоформалары бұлшықет емес жасушаларда (&бета- және гамма1-цитоплазмалық) белгілі. . Актин жіптерін сипаттайтын ерте модельдер жіптің рентгендік кристалдық құрылымын актин мономерлерінің атомдық құрылымына сәйкестендіру арқылы құрастырылған [2] (қаралған [3] ). Соңғы үлгілерде бірнеше түрлі тәсілдер қолданылды [4] [5] . Алайда бұл нәтижелер бір актиндік жіптер пайда болған кезде екі симметриялы емес актин мономерлері екі жақты симметрия осін түзетінін көрсетеді [6] олардың кейіннен жұп жіптерден тұратын жіпке жиналуы сол жақ бұрандалы бұралуды тудырады. іргелес суббірліктер бір-біріне қатысты орналасады [7] .

Актин мономерлері қалай полимерленіп, актин жіпін түзеді?

Актин жіптері жоғары динамикалық және олардың полимерленуі әдетте олардың бөлшектелуімен байланысты. Әдетте актин жіптерінің полимерленуі үш фазада жүреді: нуклеация фазасы, ұзару фазасы және тұрақты күй фазасы.

Нуклеация, ұзарту және актин жіптерінің жинақталуының стационарлық фазасы.

Ядролану фазасында тұрақты &лсквоактин ядросының&rsquo түзілуі жүреді. Бұл әдетте комплекстегі үш актин мономерінен тұрады. Ұзарту фазасында мономерлер жіпке (+ve) немесе тікенді ұшында жылдам қосылады және бұл көбінесе формин сияқты қосымша ұзарту факторларымен жеңілдетіледі. Бұл процестің орын алуы үшін жіптің (+) ұшын ашу керек және бұл *жабатын ақуызды жоюды білдіреді.


Егжей-тегжейлі СИПАТТАУ

Мұнда қолданылатын «мақсатты ақуыз» термині тікелей немесе жанама түрде ADP, ЖІӨ немесе фосфат өндіретін ақуызға қатысты. Мақсатты ақуыздар эукариоттардан немесе прокариоттардан, соның ішінде сүтқоректілерден, саңырауқұлақтардан, бактериялардан, жәндіктерден және өсімдіктерден, сондай-ақ вирустардан болуы мүмкін. Кейбір нұсқаларда мақсатты белоктар сүтқоректілердің жасушаларынан алынған, кеміргіштер (тышқандар, егеуқұйрықтар, хомяктар, теңіз шошқалары және гербилдер артықшылық беріледі), приматтар мен адамдарға және әсіресе адамдарға артықшылық беріледі.

Қолайлы мақсатты белоктарға АТФазалар, ГТФазалар және цитоскелеттік ақуыздар кіреді, бірақ олармен шектелмейді, оның ішінде кинезиндер, миозиндер, тубулиндер, актиндер, тропомиозиндер және тропониндер бар, бұл ретте адам ақуыздары артықшылық береді.

«Белок» термині құрамында белоктарды, полипептидтерді, олигопептидтерді және пептидтерді қамтитын кем дегенде екі ковалентті байланысқан аминқышқылдарын қамтитын қосылысты білдіреді. Белоктар табиғи түрде кездесетін аминқышқылдары мен пептидтік байланыстардан немесе синтетикалық пептидомиметикалық құрылымдардан тұруы мүмкін. Осылайша, «амин қышқылы» немесе «пептид қалдығы» осы құжатта қолданылғандай табиғи түрде кездесетін және синтетикалық аминқышқылдарын білдіреді. Мысалы, гомо-фенилаланин, цитрулин және норелеуцин өнертабыстың мақсаттары үшін аминқышқылдары болып саналады. «Амин қышқылы» сонымен қатар пролин және гидроксипролин сияқты имин қышқылының қалдықтарын қамтиды. Бүйірлік тізбектер (R) немесе (S) конфигурациясында болуы мүмкін. Кейбір нұсқаларда аминқышқылдары (S) немесе L-конфигурациясында болады. Табиғи емес бүйірлік тізбектер пайдаланылса, мысалы, in vivo ыдырауын болдырмау немесе баяулату үшін аминқышқылдары емес алмастырғыштар қолданылуы мүмкін.

«Басқару мәні» немесе жай ғана «бақылау» әдетте эксперименттік немесе анықталған мән салыстырылатын мәнді (немесе мәндер ауқымын) білдіреді. Осылайша, скринингтік талдау жағдайында бақылау мәні бақылау реакциясы кандидат агенті болмаған жағдайда жүргізілетінін қоспағанда, сынақ талдауымен бірдей жағдайларда жүргізілетін бақылау реакциясының мәні болуы мүмкін. ал сынақ талдауы үміткер агенттің қатысуымен жүргізіледі. Бақылау мәні көптеген бақылау талдаулары үшін анықталған статистикалық мән (мысалы, орташа немесе орташа) болуы мүмкін. Базалық мән анықталатын бақылау талдау(лар)ы сынақпен немесе эксперименттік талдаумен қатар жүргізілуі мүмкін немесе сынақ талдауының алдында орындалуы мүмкін. Осылайша, бастапқы мән қазіргі немесе тарихи бақылауларға негізделуі мүмкін.

Эксперименттік және бақылау мәні арасындағы айырмашылық, мысалы, талдауға байланысты эксперименттік қатеден үлкен болса, «маңызды» немесе «статистикалық маңызды» деп санауға болады. Бақыланатын айырмашылықтың кездейсоқ пайда болу ықтималдығы (p-мәні) кейбір алдын ала анықталған деңгейден аз болса, айырмашылық статистикалық маңызды болуы мүмкін. Мұнда пайдаланылғандай, «статистикалық маңызды айырмашылық» мысалы,

Киназа, фосфатаза және АТФаза, GTPase (GTP/ATP) арасында қандай байланыс бар? - Биология

[Frontiers In Bioscience, Landmark, 22, 1114-1137, 1 наурыз, 2017 ж.]

Тіндік трансглютаминаза (TG2) және митохондриялық функция және дисфункция

Тунг-С. Лай 1 , Ченг-Джуи Лин 2 , 3 , Ю-Тинг Ву 4 , Чих-Джен Ву 2 , 5 , 6

1 Биомедициналық ғылым институты, Маккей медициналық колледжі, Жаңа Тайбэй қаласы, Тайвань, РОК, 2 Нефрология/ішкі аурулар бөлімі, Маккей мемориалдық ауруханасы, Тайбэй, Тайвань, ROC, 3 Мейірбике ісі және менеджмент, Маккей кіші медицина колледжі, Тайбэй, Тайвань , ROC, 4 Биохимия және молекулалық биология институты, Ұлттық Ян-Мин университеті, Тайбэй, Тайвань, 5 Медицина бөлімі, Маккей медициналық колледжі, Жаңа Тайбэй қаласы, Тайвань, ROC , 6 Медицина ғылымының жоғары оқу орны, Тайбэй медициналық университеті, Тайбэй , Тайвань, РОК

1. Аннотация 2. Кіріспе 3. TG2: көп функциялы фермент. 3.1. Трансамидация реакциясы (TGase функциясы) 3.1.1. Молекуляр аралық немесе молекула ішілік айқаспалы байланыс 3.1.2. Аминилдену 3.1.3. Деамидация 3.2. Изопептидаза белсенділігі 3.3. Протеин дисульфидті изомераза (PDI) белсенділігі 3.4. GTP/ATP гидролизінің белсенділігі 4. TG2 құрылымы мен қызметі 4.1. TGase белсенді учаскесі 4.2. GTP және ATP байланысу орны 5. GTP, тотықсыздандырғыш және азот оксиді (NO) арқылы in vivo TGase белсенділігін реттеу 5.1. GTP арқылы in vivo TGase белсенділігін реттеу 5.2. Тотығу-тотықсыздану арқылы in vivo TGase белсенділігін реттеу 5.3. NO 6 арқылы in vivo TGase белсенділігін реттеу. TG2 экспрессиясын реттеу 6.1. NFkB TG2 өрнекін реттейді 6.2. Гипоксия TG2 экспрессиясын реттейді 6.3. TGF β TG2 6.4 өрнектерін реттейді. Тотығу стрессі және EGF TG2 экспрессиясын жоғары реттейді. 7. TG2 митохондрияда және бірнеше басқа жерлерде локализацияланған 8. TG2 және митохондриялық функция 8.1. TGase/TG2 активтенуі стресс жағдайында жүреді 8.2. TG2 және энергия алмасуы 8.3. TG2 және кальций гомеостазы 8.4. TG2 маңызды митохондриялық гендердің модуляцияланатын транскрипциясы 8.5. TG2’s PDI белсенділігі тыныс алу тізбегі кешендерін құрастыруда маңызды 8.6. TG2 және Warburg эффектісі 9. Түрлі аурулар мен биологиялық процестердегі TG2 9.1. Эпителий-мезенхималық ауысу (ЭМТ) 9.2. Аутоиммунитет 9.3. Нейродегенеративті аурулар 9.4. Хантингтон ауруы 9.5. Паркинсон ауруы 9.6. Альцгеймер ауруы (АД) 9.7. Жараларды емдеу және фиброз 9.8. Цитоскелеттің жиналуы және ұйымдастырылуы 10. Қысқаша мазмұны/перспективасы 11. Алғыс 12. Әдебиеттер

Митохондриялар - бұл энергия қажеттіліктерін қанағаттандыру үшін жасушаның электр станциясы. Дегенмен, дисфункционалды митохондриялар реактивті оттегі түрлерінің (ROS) шамадан тыс өндірілуіне, тотығу стрессіне және митохондриялық аурулардың белгілері болып табылатын кальций гомеостазының өзгеруіне әкелуі мүмкін. Ұзақ тотығу стрессі кезінде цитозолдық кальцийдің қайталанатын жоғарылауы тек уақытша болса да кейбір ферменттердің белсендірілуіне әкелуі мүмкін. Митохондриялық ауруларда патофизиологиялық маңызы бар кальциймен белсендірілген ферменттердің бірі тіндік трансглютаминаза (TG2) болып табылады. TG2 тотығу стрессінен туындаған пост-трансляциялық модификация (PTM) ферменті ретінде белгілі. Басқа PTM түрлерімен салыстырғанда, TG2 делдалдық PTM физиологиялық маңызы енді ғана түсініле бастады. Белсендірілгеннен кейін TG2 транскрипцияны модуляциялай алады, метаболикалық ферменттерді белсендіреді және маңызды ақуыздардың агрегациясын тудыруы мүмкін. Соңғы деректер TG2 rsquos белсенділігі тыныс алу тізбегі кешендерінің жинақталуын ғана емес, сонымен қатар митохондриялардың қызметі мен биогенезі үшін маңызды болып табылатын PGC-1α және цитохром С сияқты сыни гендердің транскрипциясын модуляциялай алатынын көрсетеді. Мұнда біз нейродегенеративті бұзылулар сияқты аурулардағы дисфункционалды митохондрияларды қорытындылаймыз, TG2 белсенділігі мен қызметін модуляциялай алады. TG2 митохондриялардың қалыпты қызметі үшін де маңызды.

Митохондриялар жасушаның электр станциялары болып табылады және жасушаның энергия қажеттіліктерін қанағаттандыру үшін АТФ шығарады. Митохондриялардың электронды тыныс алу тізбегінен электрондардың ағуы және реактивті оттегі түрлерінің (ROS) генерациясы ұзақ уақыт бойы тотығу фосфорлануының жанама өнімі ретінде аталды және жасушаішілік ROS негізгі көздерінің бірі болып табылады. Супероксидті анион ( . O 2 - ), сутегі асқын тотығы (H 2 O 2 ) және гидроксил радикалы ( . OH) тірі жасушалардағы өкілдік ROS болып табылады. ROS - ақуыздар, май қышқылдары және геномдық ДНҚ сияқты биологиялық маңызды молекулаларды тотықтырып, зақымдауы мүмкін жоғары реактивті оттегі бар молекулалар. Қалыпты жағдайда ROS супероксид дисмутаза (SOD), каталаза, глутатион және тиоредоксин сияқты жасушалық антиоксиданттық жүйелер арқылы жойылады. Алайда, митохондриялық қызметі бұзылған патологиялық жағдайларда, ROS генерациясының жылдамдығы жасушалық антиоксиданттық жүйенің шегінен асқанда, тотығу стрессі пайда болады. Тотығу стрессінің жоғарылауы қатерлі ісік, жүрек-тамыр, қант диабеті, аутоиммундық және нейродегенеративті ауруларды қоса алғанда, аурулардың дамуында жиі кездеседі (1). Еркін радикалдардың зақымдануы жасқа байланысты нейродегенеративті бұзылыстары бар науқастардың миында жиі кездеседі. Сондай-ақ, дисфункционалды митохондрия жасушаішілік кальцийге тәуелді ферментті белсендіретін және жасушаның одан әрі зақымдалуын тудыруы мүмкін қалыпты жасушалық кальций деңгейлерімен байланысты (2).

Митохондриялар жасушаішілік кальций гомеостазын сақтауда және кальций сигналдарын беруде маңызды рөл атқарады. Физиологиялық жағдайда жасушаішілік кальций деңгейі митохондриялармен эндоплазмалық ретикулуммен (ER) ынтымақтастықта Са 2+ иондарын қабылдау және шығару арқылы қатаң реттеледі. Тітіркендіргіштерге жауап ретінде ER-ден бөлінген Ca 2+ иондары бірқатар сигнал каскадтарын индукциялайды және бұл Ca 2+ сигналдары уақытында митохондриялық қабылдау және Са 2+ иондарының секвестрленуі арқылы үзілуі керек (3). Митохондриялық мембрана потенциалына және кальций тасымалдаушыларына байланысты Са 2+ иондарының митохондрияға түсуі бірнеше негізгі метаболикалық ферменттерді тікелей белсендіру және метаболиттер тасымалдаушыларын жанама реттеу арқылы энергия алмасуын күшейтеді (4). Сонымен қатар, кальций буферлеу қабілеті митохондрияларға негізгі жасушалық процестерді басқаратын Ca 2+ сигналын модуляциялауға мүмкіндік береді (3, 5). Дегенмен, митохондриялық Ca 2+ шамадан тыс жинақталуы митохондриялық деполяризацияны тудырады және нәтижесінде жасуша өлімін тудырады (6). Жаппай Ca 2+ ағыны митохондриялық мембрана потенциалын әлсіретіп, нейронның өліміне әкеліп соғады, бұл глутамат нейроуыттылығының негізгі оқиғасы болып табылады (7).

Көптеген дәлелдемелер митохондриялық кальцийдің шамадан тыс жүктелуі және кейінгі дисфункция нейродегенеративті бұзылулар, митохондриялық аурулар және қант диабеті патогенезіне қатысатынын көрсетеді (5, 8). Митохондриялық дисфункцияның Ca 2+ шамадан тыс түсуі нейродегенерацияда және ми жарақатында экситоуытты нейрондық өлімге әкелді (8). Жасуша ішілік кальцийдің қалыпсыздығы митохондриялық электрондарды тасымалдау тізбегінің ақаулары бар әртүрлі модельдерде де кездеседі (9, 10). Митохондриялық Ca 2+ иондарының аберрантты өңдеуі жыртылған қызыл талшықтары бар миоклонус эпилепсиясының (MERRF) және Лей рскуос синдромының бастапқы тері фибробласттарында байқалды (11, 12). MERRF және митохондриялық миопатиямен, энцефалопатиямен, сүт ацидозымен және инсультпен (MELAS14) байланысты митохондриялық ДНҚ (mtDNA) мутациясын қамтитын адам жасушаларында митохондриялардың қалыпты кальций буферленуі және цитозолдық Ca 2+ иондарының жоғарылауы туралы хабарланған. Зерттеу көрсеткендей, ER-ден Са 2+ бөлінуінің жоғарылауы және соның салдарынан цитозолдық және митохондриялық Са 2+ шамадан тыс жүктелуі генетикалық мутация немесе ингибиторларды емдеу нәтижесінде туындаған II Кешенді респираторлық фермент тапшылығы бар фибробласттарда пайда болады (12). Осыған ұқсас құбылыс митохондриялық ATP синтаза тежегішімен, олигомицин А-мен өңделген жасушаларда байқалады. Митохондриялық респираторлық ақаулар тудырған кальций дисомеостазының Ca 2+-тәуелді протеиннің (протеиннің 2+-тәуелді) қалыпсыз активтенуі арқылы нейрондағы экситоуыттылыққа сезімталдықты күшейтуі ғана емес. ). Жоғарыда аталған аспектілер митохондрияға негізделген фармакологиялық стратегиялар үшін әлеуетті мақсат ретінде митохондриялық кальций гомеостазын көрсетеді.

&ldquomitohondrial аурулар&rdquo басқа мысалдары жасына байланысты аурулар, соның ішінде Альцгеймер ауруы (AD), Паркинсон ауруы (PD) және Хантингтон ауруы (HD) (1). Бұл бұзылыстарда айқын митохондриялық ауытқулар тотығу стрессімен, энергия дисфункциясымен және цитозолдық кальцийдің аберрантты гомеостазымен аяқталады (1). Ұзақ тотығу стрессі кезінде цитозолдық кальцийдің қайталанатын жоғарылауы тек уақытша болса да кейбір ферменттердің белсендірілуіне әкелуі мүмкін (1). HD және AD-де патофизиологиялық маңыздылығы көрсетілген кальциймен белсендірілген ферменттердің бірі тіндік трансглютаминаза (EC 2.3.2.1.3. TG2 ретінде белгіленген протеин-глутамин γ-глутамилтрансфераза) болып табылады. TG2 транскрипцияны модуляциялай алатын, метаболикалық ферменттерді белсендірмейтін және маңызды белоктардың агрегациясын тудыратын кросс-байланыстырушы фермент ретінде белгілі (17). Жақында TG2 басқа функцияларды көрсететіні анықталды (17, 18).Бұл деректер TG2 метаболикалық стрессті өтеуге қатысатын гендердің экспрессиясын өшіре алатынын көрсетеді (1). Мұнда біз нейродегенеративті бұзылулар сияқты TG2 және rsquos функциясын &ldquomitohondrial ауруларда&rdquo модуляциялаудағы митохондриялардың рөлін және митохондриялық функцияны реттеудегі TG2 рөлін қорытындылаймыз. TG2 трансамидалану және басқа белсенділіктері бар пост-трансляциялық модификация (PTM) ферменті ретінде белгілі (төменде қараңыз) (17, 18). Жасуша биологиясындағы фосфорлану, ацетилдену және гликозилденумен салыстырғанда, TG2 арқылы жүзеге асырылатын PTM енді ғана түсініле бастады. Тотығу стрессі TG2 және TG2 индукциялары көптеген жасушаішілік бөлімдерде, соның ішінде митохондрияларда локализацияланған. TG2 экспрессиясы мен белсенділігінің ауытқуы қартаюға байланысты әртүрлі аурулардың дамуына әсер етеді (1, 17).

3. TG2: КӨПҚЫЗМЕТТІ ФЕРМЕНТ

TG2 ортақ тектік геннен алынған трансглютаминазалар (TGs) деп аталатын тығыз байланысты тиол ферменттерінің отбасына жатады (17, 19, 20). Кем дегенде сегіз ферменттік белсенді ТГ қан ұю факторы XIII А-тізбектерін, TG1-7 және бір белсенді емес ақуыз жолағын 4.2 қамтиды. (17). TG2-ден басқа, басқа TGs зимоген ретінде экспрессияланады және белсенді трансглутаминазаға айналу үшін протеазаның бөлінуін қажет етеді (17, 21, 22). Басқа TG-лерден айырмашылығы, TG2 барлық жерде болуымен және Са+2-тәуелді трансамидалану белсенділігі (TGase), Mg+2-ге тәуелді GTP/ATP байланысуы және гидролизі, сондай-ақ әртүрлі ақуыз дисульфидті изомераза (PDI) белсенділігі бар көп функциялы фермент болуымен ерекше. субстратты байланыстыру және ферменттің каталитикалық домендері (17, 19, 23, 24). Сонымен қатар, TG2-нің ферментативті емес функциялары бар, соның ішінде жасуша-беттік адгезия молекуласы ретінде жұмыс істеу, NO байланыстыру және интегриндер мен G-белокпен байланысқан рецепторлар (GPCR) үшін бірлескен рецептор ретінде қызмет ету. №946 -адренергиялық рецептор (α AR) және GPR56.

TG2 сонымен қатар әртүрлі биологиялық функцияларға қатысады, соның ішінде жасуша өлімі, цитоскелеттің қайта құрылуы, гендердің реттелуі және сигнал беру функциясы (25-28). TG2 нейродегенерацияда, фиброзда, аутоиммунитетте, гипертонияда, целиак ауруы мен жүрек-қан тамырлары бұзылыстарында терапевтік мақсат ретінде қызмет ететін, бағдарламаланған жасуша өлімін ынталандыруға, қабынуды реттеуге қатысады (17).

3.1. Трансамидация реакциясы (TGase функциясы)

рН және субстраттардың қолжетімділігіне байланысты TG2 айқаспалы байланысқан ақуыз субстраттарының ерігіштігін өзгерте алатын трансамидалану реакцияларының үш түрін көрсетеді (18). Бұл реакцияларды келесі тарауларда сипаттаймыз.

3.1.1. Молекула аралық немесе ішілік айқаспалы байланыс

TG2 пептидпен байланысқан γ-глутамил (Q-субстрат) қалдығы (ацил-донор) мен бастапқы амин (ацил-акцептор, K субстраты) арасындағы Ca+2-тәуелді айқаспалы байланыс реакциясын катализдейді. Ең көп таралған бастапқы амин ацил акцепторлары пептидпен байланысқан лизиннің (пептидпен байланысқан K-субстрат) қалдықтарының ε-аминотоптары немесе табиғи биогендік аминдердің немесе полиаминдердің (бос K-субстрат) бастапқы амин топтары болып табылады (1-сурет) . Айқас байланыстыру реакциясының соңғы өнімі екі белок немесе ақуыз бен амин арасындағы γ-глутамил-ε-лизин (изопептид деп аталады, айқаспалы байланыстың биомаркері) байланыстың түзілуі болып табылады. Изопептидтік байланыстар бір белокта (ішкі) немесе екі белок арасында (интер-) болуы мүмкін (1А-сурет). Төмен субстрат концентрацияларында молекулаішілік айқаспалы байланыс реакциясы қолайлы (29). Молекула аралық кросс-байланыс реакциясы рН > 7 және одан жоғары субстрат концентрацияларында кинетикалық тұрғыдан қолайлы. Айқас байланыс реакциялары белоктардың ерігіштігін, құрылымын және қызметін өзгерте алатын трансляциядан кейінгі модификацияларына әкеледі (17, 21, 22).

Көптеген жасушаішілік және жасушадан тыс ақуыздар TG2 субстраттары ретінде анықталған (17). Бүгінгі күні TRANSDAB дерекқорында хабарланған кемінде 150 субстрат бар (http://genomics.dote.hu/wiki/index.php/Category:Tissue_transglutaminase). TG2 бойынша көбірек зерттеулерге немесе ферменттің барлық жерде таралған табиғатына байланысты дерекқорда басқа TGs қарағанда әлдеқайда көп TG2 және rsquos субстраттары анықталған. Жасуша ішілік ақуыз субстраттарына K бай ядролық гистондар, хантингтин, NF k B ингибиторы альфа (IkBα) және митохондриялардың гликолиздегі негізгі ферменттері мен TCA циклі, соның ішінде глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа (G3PD5-дегидрогеназа), KGDHC) және аконитаза (30-34). Актин, тубулин, миозин және жасуша қозғалғыштығы мен адгезиясында рөлі бар цитоскелеттік ақуыздар жақсы анықталған TG2 субстраттары болып табылады (21, 35). G3PDH молекуласы polyQ кеңею ауруларымен туындаған нейродегенерацияға қатысатын бірнеше ақуыздармен ковалентті байланысқандығы көрсетілген (30, 36). Жасушадан тыс тоғыспалы байланыс олардың механикалық және ферментативті тұрақтануы үшін жасушадан тыс матрица (ECM) молекулаларының маңызды PTM болып табылады. Кейбір ECM протеиндері бар, соның ішінде фибронектин (FN), коллагендер, остеопонтин, нидоген/энтактин, ламинин, витронектин және остеонектин матрицаның құрылымы мен қызметін модуляциялайды (17, 19, 37).

Аминилдену биогенді/полиаминдерді қоса алғанда, бастапқы аминдердің (бос K-субстрат) TGs арқылы пептидпен байланысқан глутамин қалдығы(лар)ымен ковалентті байланысқан процесін білдіреді (18, 38-41). TG2 пептидпен байланысқан Q қалдығының жанында болғанда және көптеген бастапқы амин субстраттары (яғни, биогенді аминдер/полиаминдер) болса, фермент бастапқы амин тобының глутаминге қосылуын катализдейді, нәтижесінде & #947-глутамил-аминдік байланыс (1В-сурет) (17, 18). Егер ақуыздың ішінде бірнеше глутаминдер өзгертілсе, ПТМ бұл түрі полиаминилдену деп аталады, ал тек бір глутамин қалдығының модификациясы моноаминилдену деп аталады. &ldquoserotonylation&rdquo немесе &ldquhistaminylation&rdquo термині сәйкесінше серотонин немесе гистамин TG-делдалдық реакция арқылы мақсатты ақуыздармен айқаспалы байланысқан кезде қолданылады (42-45). Q субстраттарымен салыстырғанда, TG2 K-субстраттарына қатысты азырақ ерекшелік көрсетеді (46-48). TG2 ұзындығы бойынша лизин қалдығының бүйірлік тізбегіне тең алифаттық аминдерді жақсы көреді (7.2.-7.6. Å) (48, 49). Синтетикалық біріншілік амин ингибиторлары жасушаларға салыстырмалы түрде уытты емес болғандықтан, олар табиғи жасушаішілік аминдермен бәсекелесе отырып, ТГ жасушаішілік ингибиторлары ретінде кеңінен қолданылады (48). Цистамин – TG2-мен аралас дисульфидті байланыстар түзу арқылы ферментті инактивациялауы белгілі ерекше емес және бірегей біріншілік амин ингибиторы (48).

Биогенді аминдер де, полиаминдер де жоғары зарядталған төмен молекулалық алифатты поликатиондар болып табылады. Олар барлық тірі жасушаларда кездеседі және көптеген жасушалық процестерде рөл атқарады (39, 42). Серотонин (5-гидрокситриптамин 5-НТ), гистамин, катехоламиндер, норадреналин және допамин TG2 субстраттары ретінде қызмет ете алатын биогенді аминдер (39, 42) жақсы зерттелген. Биогенді аминдер жасуша сигнализациясына, қабынуға және басқа тамырлы биологиялық процестерге қатысатын ақуыздарға ковалентті түрде қосылатыны дәлелденді (38-42). Жалпы полиаминдерге путресцин (диамин), спермидин (триамин) және спермин (тетрамин) жатады. Жасуша ішілік полиаминдер жасушаның өсуін, апоптозын және дифференциациясын қоса алғанда, әртүрлі жасушалық процестерді реттеуде маңызды рөл атқарады және олардың деңгейлері қатаң бақыланады (50). Путресцин сияқты диаминдер, басқа бос амин тобы басқа глутаминилдік бөлікке қосымша қосылып, бис-'947-глутамилполиаминдік байланыс (1В-сурет) түзеді, осылайша молекулааралық немесе интрамолекулалық коваленттік байланыстарды катализдейді. Биогенді аминдер/полиаминдер арқылы ковалентті түрлендіргенде, мақсатты белоктардың беттік заряды өзгеруі мүмкін және ақуыз-ақуыз әрекеттесуін потенциалды түрде өзгертуі мүмкін. Сонымен қатар, ақуыздардың ерігіштігі аминилдену арқылы өзгеруі мүмкін. Құрамында белоктар (мысалы, Хантингтин ауруындағы Хантингтин сияқты) және протеин-ақуыз немесе ақуыз-амин арқылы айқасатын тубулиндер (нейрондық нейрондық түзілуде) бар кеңейтілген polyQ бұл ақуыздың ерігіштігі мен қызметін күрт өзгерте алады (51, 52).

Гистамин i n vitro ең тиімді биогенді амин ингибиторы болып табылды, IC 50 мәні 160 μ956M, одан кейін путресцин (IC 50)

600 μM), ал > 50 мМ допамин мен серотонин тек TGase/TG2 (40) < 10% тежейді. Путресцин мен гистаминнің сперминге, спермидинге және серотонинге (5-гидрокситриптамин) қарағанда жақсы субстраттар екені де көрсетілді (53). Серотонин TG2-нің жақсы субстраты болмаса да, ол тромбоциттердің тығыз денелерінде жоғары шоғырланған және концентрациясы 65 мМ дейін (38, 42) болады. Сондықтан серотонин немесе басқа биогенді аминдер TG2 субстраттарына айналуы үшін жергілікті орта және кофакторлар қажет болуы мүмкін.

Гистон 3 (H3) N-терминал құйрық аминилденуі мақсатты гендердің, пероксисома пролифераторымен белсендірілген рецептор-γ коактиваторы 1a (PGC-1α) және биогенез үшін маңызды гендердің төменгі цитохромының транскрипциясын төмендететіні көрсетілген. митохондриялардың (54), HD (55) дисфункционалды митохондрияларына ықпал етеді. H3 ғана емес, сонымен қатар H2A, H2B және H4 барлығы TG2 және rsquos субстраттары ретінде көрсетілген (33).

ТГ2 деңгейлері және пациенттің ми-жұлын сұйықтығынан (CSF) бөлінген бос изопептид (γ-глутамил-ε-лизин) деңгейлері HD пациенттерінде айтарлықтай жоғарылайды, бұл TG2 кросс-байланысу HD-де белсенді процесс екенін көрсетеді (56, 57) . Адамның CSF үлгілерінің егжей-тегжейлі HPLC талдауы γ-глутамил-ε-лизин, γ-глутамилспермидин, γ-глутамилпутресцин және бис-γ-глутамилпутресциннің барлығы бар және барлығы да бар екенін көрсетті. HD миының жоғары деңгейлері (58, 59). Бұл деректер ТГ арқылы жүретін аминилдену реакциясы HD кезінде белсенді процесс екенін көрсетеді. CSF алынған үлгілердегі жоғары бос изопептид деңгейлері HD пациенттеріндегі (56) еритін кросс-байланыстырылған агрегаттардың ыдырау өнімдерін білдіреді, бұл еритін кросс-байланыстырылған агрегаттар нейроуытты деген пайда болған гипотезаға сәйкес келеді.

Қорытындылай келе, TG-делдалдық изопептидті пептидтік байланыстар протеазаға төзімді болғандықтан, жоғарыда көрсетілген екі айқаспалы байланыс реакциясы нейродегенерацияға қатысатын бірнеше патологиялық процестерге ықпал етуі мүмкін, соның ішінде нейроинфламация, ерімейтін ақуыз қосындыларының жиналуы және протеазомалық дисфункция (60). TG2 сонымен қатар тау протеинінің, α-синуклеиннің (SYN) және еритін олигомерлер мен ерімейтін агрегаттарды құрайтын хантингтиннің молекула аралық және ішілік айқаспалы байланысын катализдейтіні белгілі (29, 61, 62). Ерітетін және диффузиялық жоғары молекулалық салмақты олигомерлік кешендер (немесе микроагрегаттар) нейродегенерациядағы нейротоксикалық аралық өнімдер болып табылады, ал ерімейтін қосындылар ерімейтін ақуыздардың токсикалық емес пулын білдіреді деген жаңа гипотеза бар (63, 64). TG2 делдалдығымен полиQ құрамында белоктар бар молекулааралық айқаспалы байланыс (яғни, HD немесе басқа кеңейтілген polyQ аурулары кезіндегі мутант хантингтин) еритін ақуыз аралық өнімдерінің түзілуіне әкелуі мүмкін және ерімейтін ақуыз агрегатының түзілуін баяулатады (51).

Пептидпен байланысқан K субстрат пен 1 ​​o амин концентрациясы K M және реакция pH < 7 төмен болғанда, су ацил-акцептор ретінде әрекет ете алады. Алынған гидролиз реакциясы глутаминді (Q) глутамин қышқылының (Е) қалдығына (деамидтену) айналдырады (1С сурет) (17, 21, 22, 32). Целиак ауруымен ауыратын науқастарда глютенді пептидтердегі таңдалған глютамин қалдығының арнайы демидизациясы TG2-ге қарсы аутоантидененің дамуына әкеледі (18, 21). Клиникалық түрде анти-TG2 IgA аутоантиденесі целиак ауруы үшін диагностикалық маркер ретінде қызмет етеді және целиак ауруын бақылауға көмектеседі (17). Hsp20 белгілі бір глутамин қалдығында деамидаланатыны көрсетілді, ал нақты глютаминдер басқа түрдегі айқас байланыс реакцияларында субстраттар болды (65). G3PDH көптеген глутамин қалдықтарында TG2 арқылы деамидаланғаны және деамидаланған G3PDH трофобластикалық жасушалардың синтезіне ықпал ететіні анықталды (66). Бұл нәтижелер деамидация бұрын танылғанға қарағанда кеңірек орын алатын оқиға болуы мүмкін екенін көрсетеді.

Изопептидтік байланыстар протеолитикалық ыдыратуға төзімді болып саналғанымен, TG2 трансамиддеу реакциясын кері қайтарып, спецификалық изопепептидтік байланыстарды гидролиздей алады (53, 67, 68). TG2&rsquos изопептидаза белсенділігі кальцийге тәуелді реакция болып табылады (68). Путресцин мен гистамин глютенді пептидпен ковалентті түрде айқаспалы байланысқан кезде, TG2 гистамин-глиадинді гидролиздеуде путресцин-глиадин пептидтеріне қарағанда тиімдірек болды. Бұл деректер изопептидтік байланыстарды гидролиздеу кезінде біріншілік аминдерге артықшылық бар екенін көрсетеді (53). Гидролизденген өнімді анықтау қиындығына байланысты изопептидаза реакцияларының физиологиялық маңыздылығы нашар анықталған, бірақ TGase-катализделген айқаспалы байланыс реакцияларының динамикалық сипатын көрсетеді.

3.3. Протеин дисульфид изомеразасының (PDI) белсенділігі

PDI реактивті цистеин қалдықтарын пайдаланып дисульфидтік байланыстардың түзілуін, ыдырауын және алмасуын катализдей алады (23). PDI белсенділігі әдетте ER-де және эукариоттық жасушалардың бетінде локализацияланған. TG2&rsquos PDI белсенділігі бос тиол цистеиндерін қажет етеді, сондықтан тотықтырғыштардың/антиоксиданттардың жасушалық деңгейлеріне сезімтал. TG2 салыстырмалы түрде төмен, бірақ анықталатын PDI белсенділігі бар екені анықталды. TGase белсенділігінен айырмашылығы, PDI белсенділігі Ca +2 және GTP (23) -ге тәуелсіз. Белсенділік тотыққан глутатионмен артады, бірақ төмендеген глутатионмен тежеледі (23). Бір қызығы, филярлық паразиттегі PDI-мен байланысты протеин де TGase белсенділігіне ие (69). Бірнеше PDI және тиісті тиоредоксиндердің TGase белсенділігін көрсететіні және барлық TGs (70) табылған TGase белсенді сайт орталығы сияқты сақталған Cys-His&ndashAsp триадасының қалдықтары бар екені анықталды. Бұл деректер PDIs, thoredoxins және TGs жасушалар мен тіндерде кейбір қайталанатын функцияларды бөлісетінін көрсетеді. TG2&rsquos PDI митохондриядағы ADP/ATP тасымалдаушысын құрастыруда маңызды және келесі бөлімде талқыланады (71, 72).

3.4. GTP/ATP гидролизінің белсенділігі

Mg +2 болған кезде TG2 ұқсас жылдамдықпен Mg-GTP және Mg-ATP гидролизі мүмкін. TG2 Mg-ATP (K M = 38 +/- 10 микроМ) Mg-GTP (K M = 130 +/- 35 мкм) салыстырғанда 3 есе үлкен тепе-теңдік жақындығымен әрекеттеседі. Сондай-ақ, Mg-ATP GTP гидролизін тежейді (IC 50 = 24 микроМ), ал 1 мМ Mg-GTP АТФ гидролизін тек 20%-ға төмендетті (73). TG2-нің G протеині (Gα h ) функциясы PLC активациясына әкелетін β-адренергиялық-рецепторлар арқылы жүретін сигнал беру жолдарын басқара алады” (17, 22, 27). PLC белсендіру трансамидалану реакциясын белсендіретін жасушаішілік кальцийдің жоғарылауына әкеледі (17). GTP белсенді сайт қалтасын тарылту арқылы TGase/TG2 белсенділігін тежейтін конформациялық өзгерісті тудырады, бұл процесті Ca+2 жоғары концентрациясы кері қайтаруға болады (17, 22). TG2-нің ATP гидролизі функциясы әлі де аз зерттелген.

4. TG2 құрылымы мен қызметі

TG2 - 687 амин қышқылы қалдықтары бар ақуыз. Рентгендік кристаллография TG2 N-терминал β-сэндвичтен (қалдық №1-139 домен I), α/β каталитикалық ядродан (қалдық №140-454 домен II), а β-баррель 1 (қалдық № 479-585 домен III) және β-баррель 2 (қалдық № 586-687 домен IV)(74, 75). TGase/TG2 белсенді учаскесі C 277 -H 335 -D 358 (74) каталитикалық триадасынан тұрады және катализдегі жылдамдықты шектеу сатысы C 277 мен Q субстраты арасында өтпелі тиоэфир байланысының түзілуін қамтиды. Жақында ингибитормен байланысқан кристалдық құрылымды зерттеулерге сүйенсек, ашық каталитикалық белсенді конформация және ашық каталитикалық белсенді емес конформация (21, 75).

4.2 GTP және ATP байланыстыру орны

ЖІӨ-мен байланысқан TG2 (PDB: 1kv3) 3-D құрылымы негізінде GTP байланысуы II, III және IV домендердің аминқышқылдарының бүйірлік тізбектерін қамтиды (74). ATP-байланысқан TG2-нің 3-D құрылымы сонымен қатар ATP және GDP бір нуклеотидті байланыстыратын қалтамен байланысатынын көрсетеді (82). Дегенмен, S482 және R580 аденинмен байланысуға емес, тек гуанинге қатысатыны анықталды (80). R580-дегі аденинге мутация GTP/GDP белсенділігінің толық дерлік жоғалуына әкелді, GTP байланыстыру талдауы көрсеткендей, бірақ TGase функциясы (21) және GTP гидролизінде (жарияланбаған бақылау) белсенді болып қалды.

5. IN VIVO TG-аза БЕКЕНДІЛІГІН GTP, тотықсыздандырғыш және азот оксиді (NO) арқылы РЕТТЕУ.

5.1 GTP арқылы in vivo TGase белсенділігін регулациялау.

Жасуша ішілік бос Ca+2 (суб-микроМ) және GTP (

100-150 μM) TGase/TG2 жасырын күйде ұстау үшін жеткілікті (17, 21, 32). Жасуша ішілік TGase/TG2 белсенділігін белсендіру жасушаларға пайдалы немесе зиянды болуы мүмкін қатаң бақыланатын, бірақ нашар түсінілген процесс. Жасушаларға биотинилденген пентиламин (BP, синтетикалық 1 o амин) немесе спермин әсер еткенде, бірнеше жасушаішілік ақуыздар биотинилденген және бұл әдіс TGase/TG2 субстраттарын анықтау үшін пайдаланылған (76, 77). Биотинилденген 1o аминдерді зонд ретінде пайдалану арқылы гистаминнің немесе серотониннің физиологиялық деңгейлері де жасуша культурасының қалыпты өсу жағдайында жасушалық ақуыздарға қосылғаны анықталды (41, 53, 78). Бұл деректер жасушаішілік Ca+2 концентрациясының немесе басқа кофакторлардың өзгеруі жасушаішілік TGase/TG2 және rsquos белсенділігін белсендіру үшін жеткілікті екенін көрсетті. HD сияқты ауруларда TG2 еритін және/немесе ерімейтін айқаспалы заттардың бірте-бірте жинақталуына мүмкіндік беретін кеңейтілген polyQ протеиндерімен және Ca 2+ концентрациясының шамалы өтпелі жоғарылауымен (79) болатын қайталанатын тотығу стрессімен белсендірілуі мүмкін. ұзақ уақыт бойы байланыстырылған өнімдер, бұл қосымша нейротоксикалық айқаспалы өнімдерді қамтамасыз етеді. Бұл тұжырым бұл аурулардың өмірде неге кеш көрінетінін одан әрі түсіндіре алады.

5. 2. Тотығу-тотықсыздану арқылы in vivo TGase белсенділігін реттеу

Жасушаішілік және жасушадан тыс тотығу-тотықсыздану күйі де TGase/TG2 активтенуін реттейді. Кальций иондарының жоғары деңгейіне байланысты (

mM) жасушадан тыс кеңістікте TGase/TG2 конститутивтік белсенді деп саналады (17, 19). Бірақ TGase/TG2 тотығуға байланысты белсенді емес және тиоредоксин тізбек ішілік дисульфидті байланыстың түзілуіне қатысады (80, 81). C230, C370 және C371 сияқты үш цистеин қалдығының жоғары тотығу-тотықсыздану потенциалы бар екені анықталды (81). Мутация талдауы негізгі тотықсыздандырғыш сенсоры (81) ретінде C230-ды анықтады. Жасушадан тыс тотықтырғыш орталардың арқасында молекулаішілік дисульфидтік байланыстардың түзілуі (C370-C371 және C230-C370 арасында) TGase/TG2 (80) белсендірмейтіні анықталды. TG2-нің АТФ-байланысқан түрінде дисульфидті байланыс C230-C370 арасында түзілген және тотықтырғыш жағдайында оның конформациясына да ықпал етуі мүмкін (82). Сондықтан жасушадан тыс TG2 белсенділігінің активтенуі жергілікті ортаның тотығу-тотықсыздану потенциалымен және тиоредоксиннің болуымен де бақыланады.

5. 3. NO арқылы in vivo TGase/TG2 реттелуі

Тотықсыздандырғыш ортада TG2-де 18 бос сульфгидрил (-SH) бар, олардың бірнешеуі S-нитрозилдеу мотивтерінің құрамында болады (25, 83). TG2-нің NO арқылы S-нитрозилденуі де in vitro TGase/TG2 белсенділігін тежейтіні анықталды (25, 84). TG2 жас аортада S-нитрозилирленген, бірақ егде тартқан аортада табылған жоқ, бұл қартайған аортада TGase/TG2 белсенділігінің жоғарылауын көрсетеді, бұл NO in vivo TG2 белсенділігін модуляциялай алады (84).

Қорытындылай келе, жергілікті Ca+2, GTP және тотығу-тотықсыздану потенциалы in vivo TGase/TG2 модуляциясының маңызды факторлары болып табылады. Редукциялық ортада GTP физиологиялық деңгейлері TGase тежейді, ал жеткілікті Ca+2 GTP тежелуін кері қайтара алады (73). Тотықтырғыш орталарда тиоредоксин сияқты тиолредуктазалар TG2 (81) in vivo TGase белсенділігін бақылаудың қосымша факторы болуы мүмкін.

6. TG2 ЭКСПРЕССИЯСЫН РЕТТЕУ

TG2 генінің промоторында ретиной қышқылы (RA) (ретиной қышқылына жауап беру элементі RRE-1 және RRE-2), глюкокортикоид (GRE), NFkB (85) сияқты маңызды жауап элементтері бар. Сонымен қатар, IL-6, TGF⓵, белсендіруші ақуыз-2 (AP-2), гипоксия (HRE) және белсендіруші ақуыз-1 (AP-1) үшін жауап элементтері де бар(17, 21, 32) . Бұл молекулалардың көпшілігі тіндердің зақымдалуына жасушалық жауаптарда рөл атқарады. Осы индукторлардың ішінде жасушаларды дифференциациялау агенті RA TG2 (86) индукциялау үшін анықталған бірінші агент болды. РА қосылғаннан кейін 6 сағат ішінде TG2 кем дегенде 50 есе өсетіні анықталды (86). РА емдеуден кейін көп ұзамай цитоплазмадан плазмалық мембранаға TG2 қайта бөлінуі жүреді (87). РА емдеуден кейін TG2 қайта бөлінуінің маңыздылығы әлі де зерттелуде. Біз келесі бөлімде TG2 негізгі реттеуіштерінің кейбірін қорытындылаймыз. Осы реттегіштердің ішінде NF k B және HIF1 TG2 экспрессиясын реттейтін ROS-сезімтал транскрипция факторларының екеуі болып табылады.

6.1. NF k B TG2 өрнегін реттейді

TG2 экспрессиясының және оның TGase белсенділігінің жоғарылауы ROS жоғарылауының және бірнеше қабыну ауруларының ортақ белгісі болып табылады (17, 22). ROS және қабыну арқылы индукцияланатын маңызды транскрипция факторы NF k B болып табылады. TG2 NF k B қатысатын қабынуға арналған &ldquomaster қосқышы&rdquo бар қабыну цикліне қатысу арқылы күшейтілген қабынуға қатысады. TG2 генінің промоторында NF k B жауап элементі бар. (85). TG2 сонымен қатар NF k B ингибиторы I k Bα, NF k B кросс-байланыстыру және полимерлеу арқылы NF k B белсендіруі мүмкін. Жасуша ішілік TG2 қиылысу оқиғалары NF k B канондық емес жолын белсендіру арқылы қабынуды дамытады (88, 89). Қалыпты жағдайда NF k B IkBα-пен тығыз байланысты болғандықтан белсенді емес. Дегенмен, қабыну жағдайында IkBα IkB киназасымен (IKK) фосфорланады, IkBα протеазомаға тәуелді деградациясын тудырады және оның NFkappaB тежеуін босатады. Содан кейін бос NF k B бірнеше маңызды төменгі ағындағы қабыну гендерінің транскрипциясын белсендіру үшін ядроға ауыстырылады. IKK тәуелсіз жолында IkBα TGase/TG2 арқылы полимерленеді, нәтижесінде NF k B активациясына әкелетін протеазома арқылы ыдырауы (34). Басқа механизмде TG2 IkBα-пен тікелей әрекеттесе алады, бұл протеазомаға тәуелсіз жол арқылы оның ыдырауына әкеледі (90, 91). Бұл деректер TG2 мақсатты NF k B белсендіруі үшін IKK тәуелсіз жолын бөгейтінін көрсетеді.

6.2. Гипоксия TG2 экспрессиясын реттейді

TG2 генінің промоторлық аймағында гипоксияға жауап беретін алты болжамды элемент бар (92). TG2 – HIF1 транскрипциясының нысанасы, индукцияланатын HIF1α және конститутивтік экспрессияланған HIF1β-дан тұратын гетеродимерлі транскрипция факторы, оттегі мен глюкозаның жетіспеушілігіне ұшыраған нейрондардың тіршілігі кезінде (93). Оттегі мен глюкозаның жетіспеушілігі кезінде TG2 HIF1β әрекеттесу арқылы гипоксиядан қорғайды және HIF1 сигналын әлсіретеді (93). Ишемия және инсульт жағдайында TG2 нейрондық жасушалардың кешіктірілген өлімінен қорғауда маңызды рөл атқаруы мүмкін (93).

6.3. TGFβ TG2 экспрессиясын реттейді

TG2 генінің (92) транскрипцияның басталу орнының жоғары ағынында TGFβ жауап элементі бар. Сүйек морфогенетикалық факторы 2 (BMP2) және 4 (BMP4) сонымен қатар TGFβ жауап элементімен байланысу арқылы TG2 экспрессиясын реттейді (92). TGF⓵ арқылы TG2 жоғарылауы басқа оң кері байланыс цикліне әкеледі. TG2 сонымен қатар жасырын TGF-⓵ белсендіге түрлендіруге қатысады және TG2 өзі TGF-⓵ (94) арқылы индукцияланады. TGF экспрессиясы қабыну және аутоиммундық жауаптарды (95) төмендетеді, бұл TG2 осы күрделі биологиялық және патологиялық процестерге қатысатынын көрсетеді. TG2 -/- тышқандар TGFβ белсендірмейді, апоптотикалық жасушалардың клиренсін кешіктірді және тіндердің қабынуы мен аутоиммундылықтың белгілері болды (96). TG2 және белсенді TGF-⓵-тің жараланған аймақтардағы және қабыну ошақтарындағы бірлескен экспрессиясы жараның жазылу реакциясындағы рөлді ұсынды (97-99). Жануарлар үлгісіндегі дорсальды тері қақпақшасының терезесін пайдаланып, рекомбинантты TG2 сүт безінің аденокарциномасына тікелей қолдану ісік айналасындағы коллаген деңгейінің жоғарылауына және фиброздық жауапқа әкелді (97). Бұл деректер TG2-нің жараны емдеу реакциясындағы рөлін көрсетеді және TG2-нің қалыпты белсенділігі тіндердің фиброзына әкелуі мүмкін.

6.4. Тотығу стрессі және EGF TG2 экспрессиясын реттейді

Тотығу стрессі астроцит культурасындағы глутаматпен шақырылған TG2 жоғарылауында маңызды болып көрінеді (100). Глутамат ROS өндірісінің дозаға тәуелді ұлғаюын тудыратыны белгілі. Дегенмен, TG2 тежегішімен, цистеаминмен алдын ала инкубациялау тотығу стрессін қалпына келтіреді және глутаматтың жоғарылаған TG2 деңгейін төмендетеді (100). Осылайша, TG2 жоғарылауы тотығу стрессіне биохимиялық жауаптардың бөлігі болуы мүмкін (100). TG2 сонымен қатар эпидермистің өсу факторы (EGF), қабыну цитокиндері (IL-6, TNF', IFN') және ультракүлгін сәулелер және вирустық инфекция (17, 101-103) сияқты әртүрлі ынталандырулармен индукцияланады. TG2 белсенділігі мен функциясының өзгеруі қатерлі ісікке және басқа созылмалы ауруларға, соның ішінде атеросклерозға байланысты болды (17, 22). Осылайша, TG2 экспрессиясының индукциясы және оның белсенділігін белсендіру жасушалардың дифференциациясына, қабынуға, фиброзға және иммундық қорғанысқа әкелетін тіндердің әртүрлі ынталандыруға жауап беруімен байланысты.

7. TG2 МИТОХОНДРИЯЛАРДА ЖӘНЕ БАСҚА БІРНЕШЕ ОРЫНДАРДА ЖЕРГІЛЕНДІ.

TG2 - ядролық кодталған ақуыз. TG2 экспрессиясы барлық жерде таралған болып саналады, бірақ таралу және экспрессия деңгейлері әртүрлі жасуша түрлерінде айтарлықтай өзгереді. TG2 иммунитетке және қабынуға қатысатын жасушаларда, соның ішінде лимфоциттер, ПМН және моноциттерде көрсетіледі (104, 105). Макрофагтарға дифференциацияланғаннан кейін TG2 айтарлықтай жоғары реттеледі (106). Ең жоғары TG2 экспрессиясы тамырлы эндотелий және тегіс бұлшықет жасушаларында (VSMC) кездеседі (101, 105). TG2 жасушадан тыс кеңістікте, мембранамен байланысқан, цитоплазмада, митохондрияда және жасуша ядросында локализацияланған (17, 21). Адамның нейробластома жасушаларында жалпы TG2-нің 7% хроматинмен байланыста ядрода кездеседі (107). Жасуша ішілік ядроға транслокациямен және жасушаішілік TGase белсенділігінің өзгеруімен байланысты TG2 индукциясының маңызы аз зерттелген (107, 108). Жасуша беті TG2 жасушалардың адгезиялық қасиетін арттыру үшін лейкоциттермен (109), көптеген жасушадан тыс матрица (ECM) адгезия ақуыздарымен, соның ішінде интегриндер фибронектинмен және GPR56-мен әрекеттесетін жасуша адгезиясының молекуласы ретінде қызмет ете алады (110). Мембранамен байланысты TG2 сүт безі қатерлі ісігінің жасушаларында GPR56 және IGFBP-3 (инсулиннің өсу факторын байланыстыратын ақуыз) киназасымен өзара әрекеттеседі және G-белок пен ATP киназасының сигнал беру функциясына қатысады (111-113).

Классикалық митохондриялық мақсатты сигнал жоқ болса да, TG2 нейробластома жасушаларында әртүрлі жасуша типтерінде митохондрияларда кездеседі, ол жалпы TG2 жасушалық пулының 50% құрайды (114, 115). Локализацияны зерттеу үшін жасушалық фракциялауды және электронды микроскопты қолдана отырып, TG2 көп бөлігі митохондриялық сыртқы мембранада және ішкі мембрана кеңістігінде локализацияланған, ал ақуыздың 5-10% ішкі митохондриялық мембранада және митохондриялық матрицада локализацияланған ( 114, 116). TG2-нің белгілі бір жасушалық бөлімдерге локализациялану механизмі нашар түсініледі, өйткені оның секрецияны тану сигналы, мембраналық якорь немесе ядролық локализация тізбегі жоқ. Белгісіз механизмдер арқылы TG2 супероксидті аниондарды генерациялау арқылы тотығуды жою үшін маңызды ген өнімі болып табылатын PMNs-де NADPH оксидаза экспрессиясының gp91 фос суббірлігінің экспрессиясына делдал болады (117).

8. TG2 ЖӘНЕ МИТОХОНДРИЯЛЫҚ ФУНКЦИЯ

Митохондриялық қызметтегі TG2 рөлі пайда болады. TG2-нің энергия алмасуында рөл атқаратынын растайтын бұрынғы дәлелдер TG -/- тышқандарының жүрегі ишемияға/реперфузиялық зақымға сезімталырақ болатыны туралы бақылаулардан алынған (118). TG2 митохондриялардың тыныс алу функциясына қатысады деп болжанған, өйткені TG -/- тышқандарында ATP өндірісінде елеулі ақау болған (118). Сондай-ақ, TG-/- тышқандарының фенотипі жүрек бұлшықетінен тыс митохондриялық функциялардағы TG2 рөлін болжайтын жас балалардағы жетілген қант диабетіне (MODY) ұқсас болды (119). Қосымша зерттеулер TGase/TG2 және PDI функциялары төменде сипатталғандай митохондриялық функцияларға қатысатынын көрсетеді.

8.1. TGase/TG2 белсендіру стресс жағдайында жүреді

Митохондриялық ақуыздардың TGase/TG2 делдалымен ковалентті айқаспалы байланысы қалыпты тіндерде болмайды, дегенмен TGase/TG2 жүрек-қан тамырлары ишемиясы/реперфузиялық зақымдану және нейродегенеративті бұзылыстарды қоса алғанда, &ldquomiтохондриялық ауруларда&rdquo емделушілерде белсенділенуі мүмкін (мысалы, HD). Бұл осы ауруларда митохондриялық дисфункциямен байланысты кальций деңгейінің қалыпсыздығына байланысты. TG2-де 204 LKNAGRDC 211 консенсус тізбегі бар, ол Bcl-2 тұқымдас ақуыздарының BH3 доменіне 70% гомолог болып табылады, бұл оның жаңа апоптотикалық BH3 протеині (115) екенін көрсетеді. Апоптозды стауроспорин индукциялағанда, Bax проапоптотикалық протеин TG2-мен әрекеттесетіні анықталды және апоптоз кезінде негізгі TGase/TG2 субстраты болды (115). Бұл деректер апоптоздағы TG2 рөлін қосымша қолдауды қамтамасыз етеді.

Ставроспоринмен апоптоздың ішкі жолын индукциялау кезінде TGase/TG2 және rsquos субстраттарының бірқатары анықталды. Оларға пробитин, Hsp70, Hsp90, Hsp60 және ATP синтаза β тізбегі кіреді. Hsp70 және Hsp90 тыныс алу тізбегінің құрамдас бөліктерінің дұрыс жиналуы мембранамен байланысқан шаперон болып табылатын пробитинді қажет етеді. Профибитинмен ынтымақтаса отырып, Hsp60 протеині препротеиндік домендердің ашылуына қатысатын мембранамен байланыстырылған импорттық қозғалтқыш кешенін құрайды, ал ATP синтаза β тізбегі тыныс алу тізбегінің V кешенінің негізгі құрамдас бөлігі болып табылады. Нейрондық жасушаларда митохондрияға тәуелді апоптозды қоздырғаннан кейін, бұл ақуыздар TGase/TG2 (120, 121) арқылы өзара байланысты болды. Ұқсас қиылысу реакциясы in vitro және in situ TG2-байланыстыратын серіктес, бифункционалды аденин нуклеотидті транслокаторы (ANT1), ADP/ATP алмасуына қатысатын ақуыз және ішкі митохондриялық мембранадағы өткізгіштік өтпелі кеуек кешенінің негізгі құрамдас бөлігімен де орын алды. (72). Бұл деректер TGase/TG2 тыныс алу тізбегін құрастыруға қатысатын маңызды ақуыздарды айқастыру үшін стресс жағдайында (мысалы, апоптозда) белсендірілуі мүмкін екенін көрсетеді.

8.2. TG2 және энергия алмасуы

Стресс жағдайында TGase/TG2 белсендіру нейродегенеративті бұзылыстарда энергия алмасуының төмендеуінің ықтимал себебі болуы мүмкін (1). TG2 метаболизмдік функцияға тікелей қатыспаса да, ол маңызды метаболикалық ферменттерді трансляциядан кейін өзгерте алады (I кесте). Алдыңғы зерттеулер фруктоза-1,6-бисфосфат альдолаза, аконитаза, L-лактатдегидрогеназа (LDH), G3PDH, альфа-кетоглутаратдегидрогеназа (KGDHC), фосфо-глицератдегидрогеназа, май ацидидті, және май қышқылындазаны қоса алғанда, бірнеше маңызды метаболикалық ферменттер екенін көрсетті. дегидрогеназа, TGase/TG2 субстраттары ретінде қызмет етеді (30, 121-124) (I кесте). Олардың кейбіреулері гликолиздің және TCA циклінің негізгі ферменттері болып табылады, бірақ TG2 модификациясынан кейін бұл ферменттердің нақты метаболикалық өзгеруі егжей-тегжейлі зерттелмеген. Екі фермент, G3PDH және KGDHC, бұрын HD (30) ұялы моделінде TG2 арқылы айқаспалы байланысқан және инактивтендірілгені көрсетілген. TG2 сонымен қатар пируваткиназа M2 (PKM2)мен әрекеттеседі. PKM2 – қатерлі жасушаларда гликолитикалық фенотипті сақтауға жауап беретін гликолиз жылдамдығын шектейтін фермент (122). PKM2 және TG2 өзара әрекеттесуі аутофагияны реттеуде маңызды рөл атқарады, әсіресе рак клеткалары көрсететін стресстік жағдайларда (122). Барлық осы нәтижелер TG2 модификациясы немесе TG2-мен әрекеттесу энергия гомеостазын модуляциялауы және реттеуі мүмкін екенін көрсетеді және бұл қосымша зерттеуді қажет етеді.

8.3. TG2 және кальций гомеостазы

Кальций иондары жасушалық процестердің үлкен санын реттейтіндіктен, жасушаішілік кальций деңгейлері өте қатаң бақылауда болады. Митохондрия да, ER де Са+2 үшін жасушаішілік қоймалар және митохондрия мембранасының беттерінің 5-20% митохондриямен байланысқан мембраналар деп аталатын ER мембранасының домендерімен байланысқан (125). TG2 стресс жағдайында кальциймен белсендірілгенімен, ол жасушаішілік кальций гомеостазын реттеуде де рөл атқарады (126). Инозит 1,4,5-трифосфатты рецепторлар (IP3Rs) ER-ден Са+2 бөлінуін реттейтін лигандты иондық арналар болып табылады (127, 128). IP 3 Rs - кальций арнасына жиналған төрт суббірліктен тұратын аллостериялық ақуыздар, әдетте төрт бөлімшелер арасындағы кеңістіктік қатынасты өзгерту арқылы ашылады (127, 128). HD тышқандар үлгісінде TGase/TG2 жоғары реттеу және белсендіру IP3R Q2476-ның іргелес қосалқы бөлімшенің ақуызбен байланысқан K-қалдығына айқаспалы байланысына әкеледі, бұл арнаны қайтымсыз конфигурацияға бекітеді (126). Қайтымды және қайталанатын құрылымдық өзгерістер лигандтармен жабылған иондық арналар үшін биологиялық сигнализация, TG2 кросс-байланыстыруы созылмалы түрде бұзылған кальций сигналын және тірі жасушалардағы аутофагияны реттеу үшін қажет болғандықтан (126).

Глюкозамен егеуқұйрық инсулиномасының жасушалық желісін (INS-1E) стимуляциялағанда, Ca+2 гомеостазына қатысатын көптеген митохондриялық ақуыздар, соның ішінде кернеуге тәуелді анион-селективті арна (VDAC) протеині, профибитин және әртүрлі ATP синтаза суббірліктер TGase екені анықталды. TG2 субстраттары (129). VDACs IP3R, стресс-70 протеині, митохондриялық Са+2 сіңірілуін жеңілдететін митохондриялық шаперон және калретикулинді (129) қамтитын желінің бөлігі болып табылады.

Басқа зерттеуде Jurkat T жасушаларында TG2 шамадан тыс экспрессияланған кезде, TG2 бөлігінің митохондриялармен бірге локализациясы және митохондриялық Са+2 сіңірілуін күшейтетіні анықталды (130). Митохондриялық Са+2 қабылдауының жоғарылауы апоптоздың басталуымен байланысты болды (130). Шамадан тыс экспрессияланған TG2 RAP1, GTP-GDP диссоциациясының стимуляторы 1, әртүрлі GTPase (131) бойынша әрекет ететін әдеттен тыс гуанин алмасу факторын айқастыратыны анықталды, ол ER-де пайда болған, әлі сипатталмаған сигналдық жолды индукциялау үшін Ca+2 шығарылуына ықпал етеді. ER (130).

Жоғарыда келтірілген зерттеулер TG2-нің кальций гомеостазын реттеудегі әлеуетті рөлін көрсетеді.

8.4. TG2 маңызды митохондриялық гендердің транскрипциясын модуляциялауда

TGase/TG2 сонымен қатар HD (54, 132) сияқты патологиялық жағдайларда транскрипциялық деңгейде әрекет ету арқылы митохондриялық функцияға әсер етуі мүмкін. Мутантты хантингтинді шамадан тыс экспрессиялайтын HD тінтуір үлгісінде TGase/TG2 белсенділігінің активтенуі полиаминденуге және гистондар 3 (H3) N-терминалының құйрығына оң зарядтарды қосуға әкеледі және ДНҚ-ның гистондармен тығызырақ оралуына әкеледі (54). PTM нәтижесінде мақсатты гендердің транскрипциясы, пероксисома пролифераторымен белсендірілген рецептор-γ (PPARγ), коактиватор 1α (PGC-1α) және төменгі ағындағы цитохром С (Cyt C), гендердің транскрипциясы жүзеге асады. биогенез үшін маңызды және митохондриялардың қызметі төмендейді (54). Алынған салдарлар HD-де байқалған дисфункциялық митохондрияға ықпал етеді деп болжанған (55). Керісінше, TG2 -/- тышқандар, сондай-ақ TG2-нің фармакологиялық тежелуі С цитохромының промоторларының белсенділігін тудырады және Cyt C және PGC-1α мРНҚ деңгейлерін арттырады. TCA циклінің бірінші сатысы болып табылатын цитрат синтазасының белсенділігі де TG2 тежелуінен кейін артады (54). Бұл деректер TG2 HD және AD сияқты митохондриялық ауруларда терапевтік мақсат болуы мүмкін екенін көрсетеді. Транскрипция факторларын реттеуде TGase/TG2 активтенуі физиологиялық реттеу механизмі ме, әлде мутант хантингтин болған жағдайда ғана қосымша зерттеуді қажет етеді.

TG2 гистон белоктарының трансляциядан кейінгі модификациясы арқылы да транскрипцияны өзгерте алады. H3 субстрат қана емес, H2A, H2B және H4 барлығы TG2 субстраттары болды (33). TG2 транскрипцияны және спецификалық гендерді реттеуде рөл атқаратын ақуыздарды өзгертуге қатысады және олардың жасушаларға әсері әлі анықталмаған.

8.5. TG2&rsquos PDI белсенділігі тыныс алу тізбегі кешендерін құрастыруда маңызды

TG-/- тышқандарында физикалық сынақтан кейін ATP деңгейлерінің төмендеуі дәлелденген энергия өндірісінің бұзылуы болды (71). PDI белсенділігі тыныс алу тізбегі кешендерінің дұрыс жиналуына ықпал етеді деп болжанған. TG2-/- тышқандарда I кешенде (NADH-убихинон оксидоредуктаза), II кешенде (сукцинат және ндашубикинон оксидоредуктаза), кешен IV (цитохром С оксидозасы) және V кешенінде (АТФ синтаза) дисфункционалды дисульфидтік байланыс түзілетіні анықталды (71).

TG2&rsquos PDI белсенділігінің тағы бір мақсаты ADP/ATP тасымалдаушы аденин нуклеотидті транслокатор 1 (ANT1) болып табылады. ANT1 - ең көп таралған митохондриялық ақуыз және ADP/ATP алмасуына қатысатын екі функционалды ақуыз. ANT1 қалыпты митохондриялық функция үшін өте маңызды және сонымен қатар ішкі митохондриялық мембранадағы өткізгіштік өтпелі кеуектің (PTP) әртүрлі құрамдас бөліктерінің бірі болуы ұсынылды (133). ANT1 олигомерленуі оның белсенділігі үшін маңызды және TG2 және PDI белсенділігі ANT1 олигомерленуін бақылау арқылы ADP/ATP тасымалдаушы қызметін реттейді (72). TG2 −/− тышқандарында тиолға тәуелді ANT1 олигомерінің түзілуінің жоғарылауы және жүрек митохондрияларында ANT1 ADP/ATP алмасу белсенділігінің жоғарылауы анықталды (72). Сондықтан PDI/TG2 белсенділігі олигомерленген ANT1 деңгейін төмендетеді. PDI/G2 сонымен қатар ANT1 мономерлерін секвестрлеу арқылы тасымалдаушы белсенділігін тежейді және ANT1-ге тікелей байланысу арқылы олигомер түзілуін болдырмайды (72).Бұл деректер PDI/TG2 белсенділігінің in vivo маңызды рөлін көрсетеді және бұл белсенділікті митохондриялық физиологияның реттелуімен байланыстыратын жаңа жол бар екенін көрсетеді.

8.6. TG2 және Warburg әсері

TG2 -/- тышқандарынан алынған эмбриональды фибробласттарды (MEFs) пайдалану, TG2 делециясы аэробты гликолизге қарай метаболикалық ығысумен байланысты митофагияға (ақаулы митохондрияларды тазартуға) әкеледі (134). MEF жасушалары (TG2 -/-ден) оттегін тұтыну жылдамдығының (OCR) жоғарылауын көрсетті (134). Митофагияның функциясы тотығу стрессін жеңілдету және канцерогенездің алдын алу үшін дисфункционалды митохондрияларды жою болып табылады (135). TG2-/- тышқандарынан алынған MEF-тер митохондрия мембранасының деполяризациясы мен морфологиясы өзгерген фрагменттелген митохондрияларды көрсетеді (134). MEFs (TG2-/- тышқандарынан) сонымен қатар ROS түзілуінің төмендегенін және GP91 фоксының төмендеу реттелуін көрсетті (117). Бұл зерттеулер дисфункционалды митохондрияға үлес қосудағы TG2 рөлін көрсетті.

Сүт безі қатерлі ісігінің эпителий жасушаларында TG2 Warburg әсерінің маңызды реттеушісі болып табылады (136). Қалыпты сараланған жасушалар жасушалық процестерге қажетті энергияны өндіру үшін ең алдымен митохондриялық тотығу фосфорлануына сүйенеді, ал рак клеткаларының көпшілігі оның орнына аэробты гликолизге сүйенеді, бұл құбылыс &ldquotthe Варбург эффектісі&rdquo (137) Сүт безі қатерлі ісігінің жасушаларын білдіретін жоғары TG2 оттегінің азаюын көрсетеді. тіпті нормаксикалық жағдайларда да жасушадан тыс қышқылдану жылдамдығының (ECAR) жоғарылауымен қатар жүретін тұтыну жылдамдығы (OCR) (136). siRNA арқылы TG2-ні құлату процесті кері қайтарады. TG2/NFκB-индукцияланған HIF-1α экспрессиясының жоғарылауы глюкозаның жоғарылауымен, лактат өндірісінің жоғарылауымен және митохондриялар арқылы оттегі тұтынуының төмендеуімен байланысты болды (136). Бұл ісік жасушаларында осы гликолитикалық жол арқылы төмен энергия өндірісі глюкозаның жоғарылауымен өтеледі. Сондай-ақ, HIF-1α тотығу фосфорлануын төмендетеді (91). Деректер бүйрек карциномасының жасушаларымен (RCC) сәйкес келеді, бұл TG2 шамадан тыс экспрессиясы глюкозаны тұтынуды және лактат өндірісін арттырды, ал TG2 siRNA лактат деңгейін 20-30% төмендетті (124). Бұл зерттеулер TG2 шамадан тыс экспрессиясы ісік жасушаларын аэробты гликолиз жолына ауыстыратынын көрсетті.

9. ТҮРЛІ АУРУЛАРДА ЖӘНЕ БИОЛОГИЯЛЫҚ ПРОЦЕСТЕРДЕГІ TG2

TG2 митохондриялық функцияны модуляциялаудағы рөлінен басқа, TG2 төменде сипатталғандай қабынуға байланысты аурулар мен биологиялық процестерде рөл атқаратыны көрсетілген. Олардың ішінде нейродегенеративті аурулардағы TG2 рөлі жақсы зерттелген (17, 21). Нейродегенеративті ауруларда митохондриялық функцияның бұзылуы жиі кездеседі және TGase/TG2 белсендірілуіне әкеледі (17, 21). TGase/TG2-нің басқа митохондриялық ауруларда, соның ішінде MELAS, MERRF және CPEO синдромдарында белсендіруін зерттеу қызықты болар еді, олар белгілі бір нүктелік мутацияларға немесе митохондриялық ДНҚ-ның үлкен жойылуына байланысты (2, 138).

9.1. Эпителий-мезенхималық ауысу (EMT)

EMT - қатерлі ісік прогрессіндегі маңызды процесс (139). EMT жасуша қосылыстарының бұзылуымен және жасуша полярлығының жоғалуымен сипатталады, эпителий жасушаларын қозғалғыш және инвазивті етеді (139). TG2 кем дегенде екі механизм арқылы EMT дамуына оң әсер етеді. Біріншіден, ол TGF-ның үлкен жасырын түрін жасушадан тыс матрицамен (140) қиылысады, бұл EMT индукторы биоактивті TGF'ті шоғырландыруы немесе шығаруы мүмкін. TG2 және TGFβ бір-бірін автостимуляциялау циклінің бөлігі ретінде индукциялайды, осылайша EMT процесіндегі TG2 рөлін атап өтеді. Екіншіден, TG2 NF k B, I k Bα тежегішін кросс-байланыстыру және полимерлеу арқылы танылған EMT индукторы NF k B белсендіреді, бұл оның протеазомалық деградациясына әкеледі (90). TG2 экспрессиясын siRNA арқылы тежеу ​​EMT индукциясын блоктайды (141). EMT процесі кезінде TG2 рөлі сонымен қатар бірнеше басқа жасуша түрлерінде де зерттелген (21).

Жасуша ішінде TGase/TG2 белсенділігі жасушаішілік қабынуға қарсы заттардың бөлінуіне жол бермейтін апоптотикалық денені қалыптастыруда маңызды. Апоптотикалық денелер сонымен қатар қабынуға қарсы TGF-β (142) цитокинін индукциялау арқылы қабынуға қарсы әсерге ие. TG2 -/- тышқандарда апоптотикалық жасушаларды тазарту бұзылыстары бар және иммундық дисфункция мен қабынуды тудырады (143). TG2 -/- тышқандар TGFβ белсендірмейді, апоптотикалық жасушалардың клиренсін кешіктірді және аутоиммундылықтың дәлелі бар (96).

Жасуша ішінде TGase/TG2 белсенділігі жасушаішілік қабынуға қарсы заттардың бөлінуіне жол бермейтін апоптотикалық денені қалыптастыруда маңызды. Апоптотикалық денелер сонымен қатар қабынуға қарсы TGF-β (142) цитокинін индукциялау арқылы қабынуға қарсы әсерге ие. TG2 -/- тышқандарда апоптотикалық жасушаларды тазарту бұзылыстары бар және иммундық дисфункция мен қабынуды тудырады (143). TG2 -/- тышқандар TGFβ белсендірмейді, апоптотикалық жасушалардың клиренсін кешіктірді және аутоиммундылықтың дәлелі бар (96).

9.3. Нейродегенеративті аурулар

TGase арқылы айқаспалы байланыс нейродегенеративті аурулардағы бірнеше патологиялық белгілерге ықпал етеді, соның ішінде нейроинфламация, ерімейтін ақуыз қосындыларының жиналуы және протеазомалық дисфункция (60). Жасуша ішілік TGase белсенділігі қатаң реттелсе де, TGase/TG2 жасушаішілік жарақаттардан болатын қайталанатын жауаптармен белсендіріледі, соның ішінде кеңейтілген polyQ протеиндері сияқты қате қатпарланған ақуыздар арқылы болатын тотығу стрессі және Ca 2+ концентрациясының шамалы өтпелі жоғарылауына әкеліп соғуы мүмкін. 79).

9.4. Хантингтон ауруы (HD)

TG2 еритін олигомерлерді құрайтын тау протеинінің, α-синуклеиннің (SYN) және хантингтиннің молекулааралық немесе молекулаішілік айқаспалы байланысын катализдейтіні белгілі, ал модификацияланбаған немесе полиаминденген ауру белоктары ерімейтін қосындыларды түзеді (29, 61, 62). In vivo деректері HD-де тежелу мақсаты ретінде TG2-ні растады. ТГ2 нокаутынан (TG2 KO) (TG2 -/-) және HD (R6/1 және R6/2) екі түрлі үлгідегі (төменде қараңыз) (144, 145) және фармакологиялық (цистамин) тежелуінен алынған деректер. (146, 147) барлығы TGase/TG2 тежеудің пайдалы әсерін көрсетеді.

Төмендегі маңызды нәтижелер Паркинсон ауруындағы (ПД) TG2 рөлін көрсетеді: 1) in vitro және in vivo TG2 субстраты ретінде синуклеин (SYN) ақуызының ашылуы (148, 149) 2) TG2-катализделген изопептидтердің деңгейінің жоғарылауы Льюи денелеріндегі SYN-мен бірге локализацияланған және ПД пациенттерінің ауырлығымен корреляцияланған (149). TG2 in vitro және жасуша үлгілерінде SYN-мен тікелей әрекеттесетіні анықталды (148, 150). Андринга және т.б. SYN in vivo TGase/TG2 rsquos субстраты екенін көрсетті (149). PD миында TG2-индукцияланған интрамолекулярлық кросс-байланыстырылған SYN деңгейінің жоғарылауы табылды, бұл бұл кросс-байланыс SYN-ның Льюи денелеріне одан әрі агрегациядан бұрын болатынын көрсетеді (149). Сондай-ақ, Альцгеймердің миында ubiquitin, hsp27 және SYN кросс-байланыстырылған өнімдер де көрсетілді (151). Айқас байланысқан өнімдер протеазаға төзімді изопептидтік байланыстар болғандықтан, олар қате қатпарланған ақуыздардың убикуитин-протеазомдық ыдырауына кедергі жасайды деп болжанған (151).

АД белгілері амилоидты-бета ақуызынан тұратын жасушадан тыс нейротоксикалық агрегаттардың немесе гиперфосфорланған таудан тұратын жасушаішілік нейротоксикалық агрегаттардың түзілуі болып табылады (152). Амилоид-бета да, тау да TGase/TG2 жақсы in vitro субстраттары ретінде көрсетілді (152). Нейрофибриллярлық түйіршіктерде жинақталған фосфорланған тау, сондай-ақ фосфорланбаған тау TGase/TG2 (152) үшін субстраттар болып табылады. Сондай-ақ, TGase/TG2-ангиотензин II AT 2 рецепторының қиылысуынан туындаған дисфункционалды G-белок сигналы Альцгеймер ауруының трансгендік жануар үлгісінде нейродегенеративті симптомдардың дамуын күшейтетіні көрсетілген (153).

9.7. Жараларды емдеу және фиброз

TG2 тіндерге протеолитикалық ыдырауға қарсы тұруға және механикалық беріктікке ие болуға мүмкіндік беретін микромолекулярлық тігуге арналған фермент (биологиялық желім) ретінде қарастыруға болады (154). Жараның жазылуы кезінде TG2 экспрессиясы мен белсенділігі өте ерте жоғарылады, TG2 генінің фибрин ұйығышына ауысатын және/немесе ЭКМ-ны қайта құратын жасушаларда индукцияланғанын және белсендірілгенін көрсетті. TG2 экспрессиясы жарадағы TGF-β, TNF-α, IL-6 және VEGF өндірісімен байланысты екені анықталды. TG2 сонымен қатар цитокиндер мен протеаза тежегіштерін (ECM тұрақтандыру фазасы) матрицаға (155-157) локализациялау арқылы ECM биологиясына әсер ете алады. TG2 элафинді (эластазаның күшті ингибиторы) және альфа2-антиплазминді (қуатты плазмин ингибиторы) ECM молекулаларына (156, 158, 159) байланыстыра алады. TG2 бета-1 және бета-3 интегриндерімен (28, 160-163) байланысады және жасуша адгезиясын ынталандыратын ко-рецептор ретінде қызмет етеді (28).

Патологиялық жағдайларда TG2 фиброзға әкелетін жараның жазылуының әртүрлі фазаларында өз әсерін көрсетеді. Бастапқы фазада (триггер/қабыну) TG2 генінің экспрессиясы қабыну цитокиндерімен (IL-1, IL-6, TNF-'945 және TGF'' (164-168) индукцияланады, өйткені зақымдалған тіндер қабыну жасушаларын тартады (168). ).TG2 сонымен қатар жарақат реакциясын одан әрі күшейтетін тіндерге Т жасушаларын тарту үшін рецептор ретінде қызмет ете алады (109).Сонымен қатар тіндердің жарақаттары TG2 түзілуіне және кең ауқымды ECM қиылысуына әкелетін шамадан тыс TGF өндірісін тудыруы мүмкін. тіндердегі фиброзға ықпал ететін микроорта.

9.8. Цитоскелеттерді құрастыру және ұйымдастыру

Цитоскелеттер әрбір жасушаның ерекше жасушаішілік құрылымын тудыратын жасушалардың негізі болып табылады. Цитоскелеттер жасушаның бөлінуі, қозғалуы және дифференциациясы үшін де маңызды. Микротүтікшелер әрбір жасушаның бірегей функциясын беру үшін трансляциядан кейін өзгертілген αβ-тубулинді гетеродимер құрылыс блоктарынан тұрады. Тубулиндер күрделі посттрансляциялық модификациялардан өтеді және TG2 осы PTM-ге қатысады (169). Тубулин TGase/TG2 субстраты екені белгілі, бірақ мұндай модификацияның физиологиялық қызметі әлі анықталмаған (170). Жақында тубулиннің полиаминденуі бірегей нейрондық функция үшін маңызды микротүтікшелерді тұрақтандыруда маңызды рөл атқаратыны анықталды. (52). Нейрондық тубулиннің бір бөлігі суықта ерімейтіні, сонымен қатар кальцийге, сондай-ақ микротүтіктерді деполимеризациялайтын препараттарға төзімді екені жақсы дәлелденген (171). Song және т.б. спермин мен спермидиннің α-тубулинге қосылуы тубулиндердің ерігіштігін төмендететінін көрсетті (52, 171). TG2 арқылы полиаминдеу белоктарға оң өзгерістерді қосады және белоктарды негізгі және ерімейтін ететіні белгілі. Полиаминдер болмаған жағдайда, теңіз шошқа TG арқылы тубулиндердің айқаспалы байланысы ең алдымен еритін фракцияда қалады (52). Бұл микротүтікшелердің тұрақтылығына ықпал ететін тубулиндердің модификациясының бірінші көрінісі (52). TGase/TG2 арқылы полиаминдеу нейрондық жасушаларда бірегей неврит түзілуіне ықпал етеді деп болжанған (52).

Актиннің TGase/TG2-делдалдық PTM де инсулин секрециясына (172), тозаң түтіктерінің өсуіне (173), апоптозға (174) және нейрондық жасушалардың пішіні мен қызметіне (175) байланысты. Сперминнің тышқан тіндерінен алынған актинге қосылатыны анықталды, бірақ оның маңызы әлі де анықталуда (176).

RhoA және Rab4A GTPase TGase/TG2 делдалдық серотонилдену тромбоциттердің α-түйіршіктерінің экзоцитозына, тромбоциттердің белсендірілуіне және адгезиясына және тромбоциттердің агрегациясына әкелетін цитоскелеттік қайта құрылымдау үшін қажет (38). RhoA-ның TG2 арқылы активтенуі Rock-2 киназасының белсендірілуін және стресс талшықтары мен фокальды адгезия кешендерінің түзілуін қамтитын РА-индукцияланған жасушаларда да көрсетілді (112, 177).

Митохондриялық аурулармен байланысты аурулар әдетте кальцийдің реттелуінің бұзылуымен байланысты. TG2 митохондриялық ауруларда патофизиологиялық маңызы бар кальциймен белсендірілген ферменттердің бірі болып табылады. Синтезден кейін TG2 әртүрлі жасушалық бөлімдерде локализацияланады, соның ішінде митохондриялар және митофагия мен митохондрия қызметіне қатысады. TG2 митохондриялардың тыныс алу қызметіне қатысады, өйткені TG -/- тышқандарында ATP өндірісінде елеулі ақау болған. TG2 -/- тышқандарынан алынған эмбриондық фибробласттар (MEFs) аэробты гликолизге қарай метаболизмнің ығысуымен байланысты митофагияның бұзылуын көрсетеді. Сүт безі қатерлі ісігінің жасушаларын білдіретін жоғары TG2 оттегін тұтыну жылдамдығының (OCR) төмендеуін, тіпті қалыпты жағдайда да жасушадан тыс қышқылдану жылдамдығының (ECAR) жоғарылауын көрсетеді. Бұл деректер қалыпты және қатерлі ісік жасушаларында метаболизмді қайта бағдарламалаудағы TG2 рөлін көрсетеді. Митохондриялық ауруда, мысалы, HD-де, TGase/TG2 белсендіру мақсатты гендердің, PPAR'947 коактиваторы 1'945 (PGC-1'945) және биогенезі үшін маңызды гендердің төменгі ағынындағы Cyt C транскрипциясының төмендеуіне әкеледі. митохондрия. Бұл деректер TG2-нің митохондриялық биогенездегі, деградациядағы және метаболизмді қайта бағдарламалаудағы рөлін көрсетеді және әрі қарай зерттеуге кепілдік береді.

Бұл зерттеуді ішінара Тайвань ұлттық ғылыми қоры (Мост 103-2633-B-715-001), Маккей медициналық колледжінің институционалдық қорлары (1022D03, 1012A08 және 1041B14) (TSL) қаржыландырды. Маккей мемориалдық ауруханасы (MMH104, MMH105) (TSL және CJL). Профессор Ю.Х.Вэйге қолжазбаны мұқият қарап шыққаны үшін алғыс айтамыз.

1. G. E. Gibson, A. Starkov, J. P. Blass, R. R. Ratan және M. F. Beal: Себеп және салдары: митохондриялық дисфункция нейрондық дисфункцияны, нейрондық өлімді және жасқа байланысты нейродегенеративті аурулардағы мінез-құлық ауытқуларын тудырады және таратады. Biochim Biophys Acta, 1802(1), 122-34 (2010)
DOI:10.1016/j.bbadis.2009.08.010

2. Y. T. Wu, S. B. Wu және Y. H. Wei: тотығу стрессіне жауап ретінде адам жасушаларының метаболикалық қайта бағдарламалануы: митохондриялық аурулардың патофизиологиясы мен терапиясындағы салдары. Curr Pharm Des, 20(35), 5510-26 (2014)
DOI:10.2174/1381612820666140306103401

3. D. G. Nicholls: Митохондрия және кальций сигналы. Жасушалық кальций, 38 (3-4), 311-7 (2005)
DOI:10.1016/j.ceca.2005.06.011

4. А.И.Тарасов, Е.Дж.Гриффитс және Г.А.Руттер: Митохондриялық Са(2+) арқылы АТФ түзілуін реттеу. Жасушалық кальций, 52(1), 28-35 (2012)
DOI:10.1016/j.ceca.2012.03.003

5. M. R. Duchen, A. Verkhratsky және S. Muallem: денсаулық пен аурудағы митохондрия және кальций. Жасушалық кальций, 44(1), 1-5 (2008) 1
DOI:10.1016/j.ceca.2008.02.001

6. C. Giorgi, F. Baldassari, A. Bononi, M. Bonora, E. De Marchi, S. Marchi, S. Missiroli, S. Patergnani, A. Rimessi, JM Suski, MR Wieckowski және P. Pinton: Митохондриялық. Са(2+) және апоптоз. Жасушалық кальций, 52(1), 36-43 (2012)
DOI:10.1016/j.ceca.2012.02.008

7. A. F. Schinder, E. C. Olson, N. C. Spitzer және M. Montal: Митохондриялық дисфункция глутамат нейроуыттылығының негізгі оқиғасы болып табылады. J Neurosci, 16(19), 6125-33 (1996)

8. Н.Б. Пивоварова және С.Б. Эндрюс: Кальцийге тәуелді митохондриялық функция және нейрондардағы дисфункция. FEBS J , 277(18), 3622-36 (2010)
DOI:10.1111/j.1742-4658.2010.07754.x

9. М.Кубота, Т.Касахара, Т.Накамура, М.Исивата, Т.Мияучи және Т.Като: нейрондық спецификалық митохондриялық ДНҚ ақаулары бар трансгенді тышқандардағы анормальды Ca2+ динамикасы. J Neurosci , 26(47), 12314-24 (2006)
DOI:10.1523/JNEUROSCI.3933-06.2006

10. M. McKenzie және M. R. Duchen: зақымдалған жасушалық биоэнергетика MT-ND5 мутантты кибридтерінде митохондриялық кальцийді өңдеу ақауларын тудырады. PLoS One , 11(4), e0154371 (2016)
DOI:10.1371/journal.pone.0154371

11. М.Брини, П.Пинтон, М.П.Кинг, М.Дэвидсон, Э.А.Шон және Р.Риззуто: Митохондриялық ДНҚ патогенезіндегі кальций сигналының ақауы тұқым қуалайтын тотығу фосфорлану тапшылығы. Nat Med , 5(8), 951-4 (1999)
DOI: 10.1038/11396

12. Э.Мбайя, Б.Оулес, К.Касперсен, Р.Тасин, Х.Масинье, М.Пеннуто, Д.Кретьен, А.Мюнних, А.Ротиг, Р.Риззуто, Г.А.Руттер, П.Патерлини-Брехот және М. Чами: Кальций сигнализациясына тәуелді митохондриялық дисфункция және тыныс алу тізбегіндегі биоэнергетиканы реттеу II кешен тапшылығы. Жасуша өлімінің айырмашылығы, 17(12), 1855-66 (2010)
DOI:10.1038/cdd.2010.51

13. A. M. Moudy, S. D. Handran, M. P. Goldberg, N. Ruffin, I. Karl, P. Kranz-Eble, D. C. DeVivo және S. M. Rothman: Кальций гомеостазының қалыпсыздығы және адам энцефаломиопатиясындағы митохондриялық поляризация. Proc Natl Acad Sci USA, 92(3), 729-33 (1995)
DOI:10.1073/pnas.92.3.729

14. А.Федерико, Э.Кардайоли, П.Да Поццо, П.Формичи, Г.Н.Галлус және Э.Ради: Митохондрия, тотығу стрессі және нейродегенерация. J Neurol Sci, 322 (1-2), 254-62 (2012)
DOI:10.1016/j.jns.2012.05.030

15. М.Моран, Д.Морено-Ластрес, Л.Марин-Буера, Дж.Аренас, М.А.Мартин және К.Угалде: Митохондриялық тыныс алу тізбегінің дисфункциясы: нейродегенерациядағы салдары. Free Radic Biol Med, 53(3), 595-609 (2012)
DOI:10.1016/j.freeradbiomed.2012.05.009

16. T. W. Lai, S. Zhang және Y. T. Wang: Экситоуыттылық және инсульт: нейропротекцияның жаңа мақсаттарын анықтау. Prog Neurobiol, 115, 157-88 (2014)
DOI:10.1016/j.pneurobio.2013.11.006

17. Л.Лоранд және Р.М.Грэм: Трансглютаминазалар: плейотропты функциялары бар кросс-байланыстырушы ферменттер. Nat Rev Mol Cell Biol, 4(2), 140-56 (2003)
DOI:10.1038/nrm1014

18. T. S. Lai, C. J. Lin және C. S. Гринберг: Биологиялық процестердегі тіндік трансглютаминаза-2 (TG2) арқылы жүретін аминилденудің рөлі. Амин қышқылдары (2016)
DOI: 10.1007/s00726-016-2270-8

19. C. S. Greenberg, P. J. Birckbichler және R. H. Rice: Трансглютаминазалар: тіндерді тұрақтандыратын көп функциялы кросс-байланыстырушы ферменттер. Фасеб Дж, 5(15), 3071-7. (1991)

20. D. Aeschlimann және V. Thomazy: Жасушадан тыс матрицаларды құрастыру және қайта құрудағы ақуыздың айқаспалы байланысы: трансглютаминазалардың рөлі. Connect Tissue Res , 41(1), 1-27 (2000)
DOI:10.3109/03008200009005638

21. Р.Л.Экерт, М.Т.Каартинен, М.Нурминская, А.М.Белкин, Г.Колак, Г.В.Джонсон және К.Мехта: Жасуша қызметін трансглютаминазалық реттеу. Physiol Rev , 94(2), 383-417 (2014)
DOI:10.1152/physrev.00019.2013

22. T. S. Lai, және C. S. Гринберг: TGM2 және адам ауруларына салдары: Bioscience-Landmark ішіндегі альтернативті сплайсингтің рөлі, , 18, 504-519 (2013)

23. G. Hasegawa, M. Suwa, Y. Ichikawa, T. Ohtsuka, S. Kumagai, M. Kikuchi, Y. Sato and Y. Saito: тіндік типтегі трансглютаминазаның жаңа қызметі: протеин дисульфидті изомераза. Biochem J , 373(Pt 3), 793-803 (2003)
DOI: 10.1042/bj20021084

24. T. S. Lai, T. F. Slaughter, C. M. Koropchak, Z. A. Haroon және C. S. Greenberg: Адам тінінің трансглютаминазасының C-терминалының жойылуы магнийге тәуелді GTP/ATPase белсенділігін арттырады. J Biol Chem, 271(49), 31191-5 (1996)
DOI:10.1074/jbc.271.49.31191

25. Т.С.Лай, А.Хаусладен, Т.Ф.Slaughter, J. P. Eu, J. S. Stamler және C. S. Greenberg: Кальций S-нитрозилизацияны, денитрозилденуді және тін трансглютаминазасының белсенділігін реттейді. Биохимия , 40(16), 4904-10 (2001)
DOI:10.1021/bi002321t

26. L. Xu, S. Begum, J. D. Hearn және R. O. Hynes: GPR56, атиптік G протеинімен байланысқан рецептор, тіндік трансглютаминаза, TG2 байланыстырады және меланома ісіктерінің өсуі мен метастаздарын тежейді. Proc Natl Acad Sci USA, 103(24), 9023-8 (2006)
DOI:10.1073/pnas.0602681103

27. H. Nakaoka, D. M. Perez, K. J. Baek, T. Das, A. Husain, K. Misono, M. J. Im және R. M. Graham: Gh: трансглутаминаза белсенділігі және рецепторлық сигналдық функциясы бар GTP байланыстыратын ақуыз. Ғылым , 264(5165), 1593-6 (1994)
DOI:10.1126/science.7911253

28. С.С.Акимов, Д.Крылов, Л.Ф.Флейшман және А.М.Белкин: Тін трансглютаминазасы фибронектин үшін интегринді байланыстыратын адгезияның корецепторы болып табылады. J Cell Biol, 148(4), 825-38. (2000)
DOI:10.1083/jcb.148.4.825

29. T. Konno, T. Morii, A. Hirata, S. Sato, S. Oiki және K. Ikura: фибрилдің түзілуін ковалентті блоктау және жасушаішілік амилоидгендік ақуыздарды трансглютаминаза-катализделген молекулаішілік кросс-байланыс арқылы біріктіру. Биохимия , 44(6), 2072-9 (2005)
DOI:10.1021/bi047722d

30. A. J. Cooper, K. R. Sheu, J. R. Burke, O. Onodera, W. J. Strittmattter, A. D. Roses және J. P. Blass: глицеральдегид 3-фосфат дегидрогеназа және альфа-кетоглутаза ұзындығы патогендік патогендік комплекстің альфа-кетоглутаратпен глицеральдегидті трансглютаминаза-катализденген инактивациясы. Proc Natl Acad Sci USA, 94(23), 12604-9 (1997)
DOI:10.1073/pnas.94.23.12604

31. AJ Cooper, J. Wang, R. Pasternack, HL Fuchsbauer, RK Sheu және JP Blass: Лизинге бай гистон (H1) тіндік трансглютаминазаның лизилді субстраты болып табылады: (CAG) ядролық агрегаттардың түзілуіне трансглутаминазаның ықтимал қатысуы. )(n)/Q(n) кеңею аурулары. Dev Neurosci , 22 (5-6), 404-17 (2000)
DOI: 10.1159/000017470

32. S. Gundemir, G. Colak, J. Tucholski және G. V. Johnson: Transglutaminase 2: молекулалық швейцариялық армия пышағы. Biochim Biophys Acta, 1823(2), 406-19 (2012)
DOI:10.1016/j.bbamcr.2011.09.012

33. E. Ballestar, C. Abad және L. Franco: Негізгі гистондар тіндік трансглютаминаза үшін глутаминилді субстраттар болып табылады. Дж Биол Хем, 271(31), 18817-24 (1996)
DOI:10.1074/jbc.271.31.18817

34. Дж.Ли, Ю.С.Ким, Д.Х.Чой, М.С.Бэнг, Т.Р.Хан, Т.Х.Джох және С.Я.Ким: Трансглютаминаза 2 BV-2 микроглиясында жаңа жол арқылы ядролық фактор-каппаВ активациясын тудырады. J Biol Chem, 279(51), 53725-35 (2004)
DOI:10.1074/jbc.M407627200

35. Н.Дж. Робинсон, П.Н. Бейкер, К.Дж.Джонс және Дж.Д.Аплин: адам плацентасынан бөлінетін мембрана-цитоскелеттік бөлшектерді тұрақтандырудағы тіндік трансглютаминазаның рөлі. Biol Reprod , 77(4), 648-57 (2007)
DOI:10.1095/biolreprod.107.061747

36. AJ Cooper, TM Jeitner, V. Gentile және JP Blass: тіндік трансглютаминаза арқылы катализделген полиглутаминдік домендердің айқаспалы байланысы патологиялық ұзындықтың қайталануы кезінде өте қолайлы: трансглутаминаза белсенділігі (CAG)(n)/Q(n) рөл атқарады ма? )-кеңейту аурулары? Neurochem Int, 40(1), 53-67. (2002)
DOI:10.1016/S0197-0186(01)00058-4

37. А.М.Белкин: жасушадан тыс TG2: пайда болатын функциялар және реттеу. FEBS J , 278(24), 4704-16 (2011)
DOI:10.1111/j.1742-4658.2011.08346.x

38. DJ Walther, JU Peter, S. Winter, M. Holtje, N. Paulmann, M. Grohmann, J. Vowinckel, V. Alamo-Bethecourt, CS Wilhelm, G. Ahnert-Hilger and M. Bader: Small serotonilation GTPases - тромбоциттердің және басқалардың фа-түйіршіктердің босатылуын тудыратын сигнал беру жолы. Ұяшық , 115(7), 851-62 (2003)
DOI:10.1016/S0092-8674(03)01014-6

39. Н.А.Мума және З.Ми: Басқа моноаминдердің серотонилденуі және трансамидалануы. ACS Chem Neurosci, 6(7), 961-9 (2015)
DOI:10.1021/cn500329r

40. T. S. Lai және C. S. Greenberg: тіндік трансглютаминаза-2 (TGM-2) арқылы фибриногенді гистаминизациялау: қабынуды модуляциялаудағы потенциалды рөл. Амин қышқылдары, 45(4), 857-64 (2013)
DOI: 10.1007/s00726-013-1532-y

41. J. Vowinckel, S. Stahlberg, N. Paulmann, K. Bluemlein, M. Grohmann, M. Ralser and D. J. Walther: глютамин қалдықтарының гистаминилденуі G-белок сигнализациясына қатысты жаңа посттрансляциялық модификация болып табылады. FEBS Летт, 586(21), 3819-24 (2012)
DOI:10.1016/j.febslet.2012.09.027

42. D. J. Walther, S. Stahlberg және J. Vowinckel: Биогенді моноаминдер үшін жаңа рөлдер: трансглютаминаза делдалындағы трансляциядан кейінгі протеиннің модификациясындағы моноаминдерден моноаминилденудің реттелетін ауруларына дейін. FEBS J , 278(24), 4740-55 (2011)
DOI:10.1111/j.1742-4658.2011.08347.x

43. R. Szasz және G. L. Dale: Тромбоспондин және фибриноген COAT-тромбоциттерде серотонин-туынды ақуыздарды байланыстырады. Қан , 100(8), 2827-31 (2002)
DOI: 10.1182/blood-2002-02-0354

44. G. L. Dale, P. Friese, P. Batar, S. F. Hamilton, G. L. Reed, K. W. Jackson, K. J. Clemetson және L. Alberio: ынталандырылған тромбоциттер жасуша бетіндегі прокоагулянттық ақуыздарды ұстауды күшейту үшін серотонинді пайдаланады. Табиғат , 415(6868), 175-9 (2002)
DOI: 10.1038/415175a

45. С.И.Продан, П.М.Джозеф, А.С.Винсент және Г.Л.Дэйл: Қапталған тромбоциттердің деңгейіне темекі шегу, аспирин және серотонинді кері қармаудың селективті тежегіштері әсер етеді. J Thromb Haemost, 5(10), 2149-51 (2007)

46. ​​J. E. Folk: Трансглютаминаза-катализделген эпсилон-(гамма-глутамил) лизин байланысының түзілу механизмі және ерекшелігінің негізі. Adv Enzymol Relat Areas Mol Biol , 54, 1-56 (1983)

47. J. E. Folk және S. I. Chung: Трансглютаминазалар. Әдістері Enzymol, 113, 358-75 (1985)
DOI:10.1016/S0076-6879(85)13049-1

48. Л.Лоранд және С.М.Конрад: Трансглютаминазалар. Мол жасуша биохимиясы, 58(1-2), 9-35 (1984)
DOI: 10.1007/BF00240602

49. L. Lorand, K. N. Parameswaran, P. Stenberg, Y. S. Tong, P. T. Velasco, N. A. Jonsson, L. Mikiver және P. Moses: Гвинея шошқасының бауыр трансглютаминазасының амин субстраттары үшін ерекшелігі. Биохимия , 18(9), 1756-65 (1979)
DOI:10.1021/bi00576a019

50. С.В.Табор және Х.Табор: Полиаминдер. Анну Рев Биохим, 53, 749-90 (1984)
DOI:10.1146/annurev.bi.53.070184.003533

51. T. S. Lai, T. Tucker, J. R. Burke, W. J. Strittmattter және C. S. Greenberg: ұлпа трансглютаминазасының кеңейтілген полиглутаминді қайталаулары бар ақуыздардың ерігіштігіне әсері. J Neurochem , 88 (5), 1253-60 (2004)

52. Y. Song, L. L. Kirkpatrick, A. B. Schilling, D. L. Helseth, N. Chabot, J. W. Keillor, G. V. Johnson және S. T. Brady: Трансглютаминаза және тубулиннің полиаминденуі: аксональды микротүтіктерді тұрақтандыруға арналған посттрансляциялық модификация. Neuron , 78(1), 109-23 (2013) doi:10.1.016/j.neuron.2013.0.1.0.36
DOI:10.1016/j.neuron.2013.01.036

53. SW Qiao, J. Piper, G. Haraldsen, I. Oynebraten, B. Fleckenstein, O. Molberg, C. Khosla and LM Sollid: тіндердің трансглютаминаза арқылы түзілуі және гистамин-глиадин кешендерінің бөлінуі: биологиялық әсерлер мен салдарлар целиак ауруы. J Иммунол, 174(3), 1657-63 (2005)
DOI:10.4049/jimmunol.174.3.1657

54. SJ McConoughey, M. Basso, ZV Niatsetskaya, SF Sleiman, NA Smirnova, BC Langley, L. Mahishi, AJ Cooper, MA Antonyak, RA Cerione, B. Li, A. Starkov, RK Chaturvedi, MF Beal, G. Коппола, DH Geschwind, H. Ryu, L. Xia, SE Iisma, J. Pallos, R. Pasternack, M. Hils, J. Fan, LA Raymond, JL Marsh, LM Thompson and RR Ratan: Трансглутаминаза 2 тежелуі транскрипцияны жеңілдетеді. Хантингтон ауруының үлгілеріндегі реттелудің бұзылуы. EMBO Mol Med , 2(9), 349-70 (2010)
DOI:10.1002/emmm.201000084

55. M. T. Lin және M. F. Beal: нейродегенеративті аурулардағы митохондриялық дисфункция және тотығу стрессі. Табиғат , 443(7113), 787-95 (2006)
DOI:10.1038/nature05292

56. Т.М.Джейтнер, М.Б.Богданов, В.Р.Матсон, Ю.Дайхин, М.Юдкофф, Джей Фолк, Л.Стейнман, С.Е.Браун, МФ Биал, Дж.П.Бласс және А.Дж.Купер: N(эпсилон)-(гамма-L-глутамил) -L-лизин (GGEL) Хантингтон ауруы бар емделушілерде жұлын сұйықтығында жоғарылайды. J Neurochem, 79 (5), 1109-12. (2001)
DOI:10.1046/j.1471-4159.2001.00673.x

57. М.В.Карпюж, Х.Гаррен, Х.Слант, Д.Л.Прайс, Дж.Гуселла, М.В.Бехер және Л.Штайнман: Трансглютаминаза хантингтинді амилоидогенді емес полимерлерге біріктіреді және оның Хантингтон ауруының ми ядроларында ферментативті белсенділігі артады. Proc Natl Acad Sci U S A , 96(13), 7388-93 (1999)
DOI:10.1073/pnas.96.13.7388

58. Т.М.Джейтнер, К.Баттайл және А.Дж.Купер: гамма-глутамиламиндер және нейродегенеративті аурулар. Амин қышқылдары, 44(1), 129-42 (2013)
DOI: 10.1007/s00726-011-1209-3

59. T. M. Jeitner, W. R. Matson, J. E. Folk, J. P. Blass және A. J. Cooper: Хантингтон ауруындағы CSF гамма-глутамиламиндер деңгейінің жоғарылауы. J Neurochem, 106(1), 37-44 (2008)

60. T. M. Jeitner, N. A. Muma, K. P. Battaile және A. J. Cooper: нейродегенеративті аурулардағы трансглутаминазаны белсендіру. Future Neurol , 4(4), 449-467 (2009)
DOI:10.2217/fnl.09.17

61. Т.Лэй, Такер, Т., Берк, Дж.Р., Стриттматтер, ВДЖ. және Гринберг, CS: тін трансглютаминазасының кеңейтілген полиглютаминді қайталаулары бар ақуыздардың ерігіштігіне әсері. J. Neurochemistry , 88(5), 1253-1260 (2004)
DOI:10.1046/j.1471-4159.2003.02249.x

62. Т.Конно, Т.Мории, Х.Шимизу, С.Оики және К.Икура: Трансглютаминаза-катализделген молекулааралық кросс-байланыс арқылы ақуыз агрегациясының және преципитациясының парадоксальды тежелуі. J Biol Chem, 280(17), 17520-5 (2005)
DOI:10.1074/jbc.M413988200

63. H. T. Orr: Нейродегенеративті ауру: нейрондарды қорғау агенттігі. Табиғат , 431(7010), 747-8 (2004)
DOI: 10.1038/431747a

64. M. Arrasate, S. Mitra, E. S. Schweitzer, M. R. Segal және S. Finkbeiner: Инклюзия денесінің қалыптасуы мутант хантингтин деңгейін және нейрондық өлім қаупін азайтады. Табиғат , 431(7010), 805-10 (2004)
DOI:10.1038/nature02998

65. S. Boros, E. Ahrman, L. Wunderink, B. Kamps, W. W. de Jong, W. C. Boelens және C. S. Emanuelsson: Тіндік трансглютаминаза арқылы Hsp20 шағын жылу соққысының протеинінің сайтқа тән трансамидалануы және деамидалануы. Протеиндер, 62(4), 1044-52 (2006)
DOI:10.1002/prot.20837

66. К.Ивай, Ю.Шибукава, Н.Ямазаки және Ю.Вада: Глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназаның трансглютаминаза 2-тәуелді демидизациясы трофобластикалық жасушалардың бірігуіне ықпал етеді. J Biol Chem , 289(8), 4989-99 (2014)
DOI:10.1074/jbc.M113.525568

67. K. N. Parameswaran, X. F. Cheng, E. C. Chen, P. T. Velasco, J. H. Wilson және L. Lorand: Цитозолдық трансглютаминазалар және XIIIa коагуляция факторы арқылы гамма: эпсилон изопептидтерінің гидролизі. J Biol Chem, 272(15), 10311-7 (1997)
DOI:10.1074/jbc.272.15.10311

68. Р.Киралы, К.Тангаражу, З.Наги, Р.Коллиган, З.Немес, М.Гриффин және Л.Фесус: Адамның 2 трансглютаминазасының изопептидазалық белсенділігі: трансамидациядан ажырату және кинетикалық параметрлер бойынша сипаттау. Амин қышқылдары, 48(1), 31-40 (2016)
DOI: 10.1007/s00726-015-2063-5

69. Р.Чандрашекар, Н.Цудзи, Т.Моралес, В.Озолс және К.Мехта: Dirofilaria immitis филярлық паразитінен алынған ERp60 тәрізді протеин трансглутаминаза және протеин дисульфид изомераза белсенділігіне ие. Proc Natl Acad Sci U S A , 95(2), 531-6 (1998)
DOI:10.1073/pnas.95.2.531

70. B. Blasko, A. Madi және L. Fesus: Caenorhabditis elegans PDI-3 тиоредоксин мотиві трансглютаминаза белсенділігі үшін Cys және Оның каталитикалық қалдықтарын қамтамасыз етеді. Biochem Biophys Res Commun, 303(4), 1142-7 (2003)
DOI:10.1016/S0006-291X(03)00490-X

71. P. G. Mastroberardino, M. G. Farrace, I. Viti, F. Pavone, G. M. Fimia, G. Melino, C. Rodolfo and M. Piacentini: &ldquoTissue&rdquo трансглютаминаза респираторлық кешеннің митохондық белоктарында дисульфидті көпірлердің пайда болуына ықпал етеді. Biochim Biophys Acta, 1757(9-10), 1357-65 (2006)
DOI:10.1016/j.bbabio.2006.07.007

72. В.Малорни, М.Г.Фаррас, П.Матаррез, А.Тинари, Л.Сиарло, П.Мусави-Шафаэи, М.Д&rsquoЭлетто, Г.Ди Джакомо, Г.Мелино, Л.Пальмиери, К.Родольфо және М. Пиацентини: аденин нуклеотидінің транслокаторы 1 2 типті трансглутаминаза субстраты ретінде әрекет етеді: митохондрияға тәуелді апоптоздың салдары. Жасуша өлімінің айырмашылығы, 16(11), 1480-92 (2009)
DOI:10.1038/cdd.2009.100

73. T. S. Lai, T. F. Slaughter, K. A. Peoples, J. M. Hettasch және C. S. Greenberg: магний-нуклеотидті кешендердің көмегімен адам ұлпасының трансглутаминаза қызметін реттеу. Mg-GTP және Mg-ATP үшін айқын байланысу орындарын анықтау. Дж Биол Хим, 273(3), 1776-81. (1998)
DOI:10.1074/jbc.273.3.1776

74. S. Liu, R. A. Cerione және Дж. Кларди: тін трансглутаминазасының гуанин нуклеотидті байланыстыру белсенділігінің құрылымдық негізі және оның трансамидациялық белсенділігін реттеу. Proc Natl Acad Sci USA, 99(5), 2743-7 (2002)
DOI:10.1073/pnas.042454899

75. D. M. Pinkas, P. Strop, A. T. Brunger және C. Hosla: Трансглутаминаза 2 белсендірілген кезде үлкен конформациялық өзгеріске ұшырайды. PLoS Biol , 5(12), e327 (2007)
DOI:10.1371/journal.pbio.0050327

76. JH Jeon, CW Kim, DM Shin, K. Kim, SY Cho, JC Kwon, KH Choi, HS Kang and IG Kim: 2 трансглутаминаза арқылы биотинилденген полиаминдердің дифференциалды қосылуы. FEBS Lett, 534(1-3), 180 -4 (2003)
DOI:10.1016/S0014-5793(02)03836-X

77. Дж.Х.Джон, Г.Ю.Джан, С.В.Ким, Д.М. Шин, С.Ю.Чо, Дж.К.Квон, Х.Дж.Ли, К.Х.Чой және И.Г.Ким: трансглютаминаза белсенділігін бақылауға арналған жасуша негізіндегі талдау. Аналь биохимиясы, 333(2), 399-401 (2004)
DOI:10.1016/j.ab.2004.04.014

78. Д.М. Шин, Дж.Х.Джон, С.В.Ким, С.И.Чо, Дж.К.Квон, ХДжей Ли, КХ Чой, СК Парк және И.Г.Ким: тотығу стрессі немесе ультракүлгін сәулелену арқылы жасушаішілік трансглютаминаза 2-нің жасуша түріне тән активтенуі: трансглютаминаза 2-дегі салдары жасқа байланысты катарактогенез. J Biol Chem , 279(15), 15032-9 (2004)
DOI:10.1074/jbc.M308734200

79. A. V. Panov, C. A. Gutekunst, B. R. Leavitt, M. R. Hayden, J. R. Burke, W. J. Strittmattter және J. T. Greenamyre: Хантингтон ауруындағы ерте митохондриялық кальций ақаулары полиглютаминдердің тікелей әсері болып табылады. Nat Neurosci, 5(8), 731-6 (2002)
DOI: 10.1038/nn884

80. Дж.Стамнаес, Д.М.Пинкас, Б.Флекенштейн, К.Хосла және Л.М.Соллид: Трансглутаминаза 2 белсенділігінің тотығу-тотықсыздану реттелуі. J Biol Chem , 285(33), 25402-9 (2010)

81. X. Jin, J. Stamnaes, C. Klock, T. R. DiRaimondo, L. M. Sollid және C. Khosla: жасушадан тыс трансглутаминаза 2-нің тиоредоксинмен белсендірілуі. J Biol Chem , 286(43), 37866-73 (2011)
DOI:10.1074/jbc.M111.287490

82. B. G. Han, J. W. Cho, Y. D. Cho, K. C. Joong, S. Y. Kim және B. I. Lee: аденозинтрифосфатпен комплекстегі адам трансглютаминаза 2-нің кристалдық құрылымы. Int J Biol Macromol , 47(2), 190-5 (2010)
DOI:10.1016/j.ijbiomac.2010.04.023

83. Дж.С.Стамлер, Э.Дж.Туне, С.А.Липтон және Н.Дж.Сушер: (S)NO сигналдары: транслокация, реттеу және консенсус мотиві. Нейрон , 18(5), 691-6 (1997)

84. L. Santhanam, EC Tuday, AK Webb, P. Dowzicky, JH Kim, YJ Oh, G. Sikka, M. Kuo, MK Halushka, AM Macgregor, J. Dunn, S. Gutbrod, D. Yin, A. Shoukas, D. Nyhan, NA Flavahan, AM Белкин және DE Berkowitz: Тіндердің трансглютаминазасының S-нитрозилизациясының төмендеуі қан тамырларының қаттылығының жасқа байланысты ұлғаюына ықпал етеді. Circ Res , 107(1), 117-25 (2010)

85. А.Мирза, SL Лю, Э.Фризелл, Дж.Чжу, С.Маддукури, Дж.Мартинес, П.Дэвис, Р.Швартинг, П.Нортон және МА Зерн: Бауыр жарақаты мен фиброгенездегі тін трансглутаминазасының рөлі , және оны NF-kappaB арқылы реттеу. Am J Physiol , 272 (2 Pt 1), G281-8 (1997)

86. P. J. Davies, M. P. Murtaugh, W. T. Moore, Jr., G. S. Johnson және D. Lucas: Адамның промиелоцитарлы лейкозы (HL-60) жасушаларында тіндік трансглютаминазаның ретино қышқылынан туындаған экспрессиясы. J Biol Chem, 260(8), 5166-74 (1985)

87. U. S. Singh және R. A. Cerione: ретиной қышқылының HeLa жасушаларындағы GTP байланыстыратын ақуыз/трансглютаминазаларға биохимиялық әсері. GTP-байланыстырушы және трансглютаминаза белсенділігін, мембраналық ассоциацияны және фосфатидилинозит липидтерінің айналымын ынталандыру. J Biol Chem, 271(44), 27292-8 (1996)
DOI:10.1074/jbc.271.44.27292

88. A. P. Mann, A. Verma, G. Sethi, B. Manavathi, H. Wang, J. Y. Fok, A. B. Kunnumakkara, R. Kumar, B. B. Aggarwal and K. Mehta: Transglutaminase тінінің шамадан тыс экспрессиясы ядролық фактордың конститутивтік активтенуіне әкеледі.Рак жасушаларындағы B: жаңа жолды анықтау. Cancer Res , 66 (17), 8788-95 (2006)
DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-06-1457

89. S. Y. Kim: Қабынудағы трансглютаминаза 2. Front Biosci , 11, 3026-35 (2006)
DOI: 10.2741/2030

90. А.Верма және К.Мехта: қатерлі ісік жасушаларындағы ядролық транскрипция факторы-каппаВ трансглютаминаза арқылы белсендірілуі: жаңа терапиялық мүмкіндік. Curr қатерлі ісігінің дәрілік мақсаттары, 7 (6), 559-65 (2007)
DOI:10.2174/156800907781662275

91. С.Кумар және К. Мехта: Тін трансглютаминазасы канондық емес жол арқылы HIF-1альфа промоторы мен ядролық фактор-каппаВ-ны конститутивтік белсендіреді. PLoS One , 7(11), e49321 (2012)
DOI:10.1371/journal.pone.0049321

92. С.Дж.Риттер және П.Дж.Дэвис: Тышқан ұлпасының трансглутаминаза генінің промоторындағы трансформацияланатын өсу факторы-бета1/сүйек морфогенетикалық ақуыз 4 (TGF-beta1/BMP4) жауап элементін анықтау. J Biol Chem, 273(21), 12798-806 (1998)
DOI:10.1074/jbc.273.21.12798

93. A. J. Filiano, C. D. Bailey, J. Tucholski, S. Gundemir және G. V. Johnson: Transglutaminase 2 ишемиялық инсульттан қорғайды, HIF1beta-мен әрекеттеседі және HIF1 сигналын әлсіретеді. FASEB J , 22(8), 2662-75 (2008)
DOI: 10.1096/fj.07-097709

94. M. D. George, T. M. Vollberg, E. E. Floyd, J. P. Stein және A. M. Jetten: қалыпты және трансформацияланған адам эпидермиялық кератиноциттерде өсу факторы-бета 1 түрлендіру арқылы II типті трансглутаминазаны реттеу. J Biol Chem, 265(19), 11098-104 (1990)

95. MM Shull, I. Ormsby, AB Kier, S. Pawlowski, RJ Diebold, M. Yin, R. Allen, C. Sidman, G. Proetzel, D. Calvin and т. фактор-бета 1 гені мультифокальды қабыну ауруына әкеледі. Табиғат , 359(6397), 693-9 (1992)
DOI: 10.1038/359693a0

96. З.Сзонди, З.Саранг, П.Молнар, Т.Немет, М.Пиасентини, П.Г.Мастроберардино, Л.Фаласка, Д.Эшлиман, Дж.Ковач, И.Кис, Э.Сегезди, Г.Лакос, Э. Rajnavolgyi, PJ Birckbichler, G. Melino and L. Fesus: Transglutaminase 2-/- тышқандары макрофагтар мен апоптозды жасушалар арасындағы фагоцитозбен байланысты айқастылықты көрсетеді. Proc Natl Acad Sci USA, 100(13), 7812-7 (2003)
DOI:10.1073/pnas.0832466100

97. З.А.Харун, Дж.М.Хетташ, Т.С.Лай, М.W. Dewhirst және C. S. Greenberg: Тіндік трансглютаминаза экспрессивті, белсенді және егеуқұйрық тері жарасының жазылуына және ангиогенезге тікелей қатысады. Фасеб Дж., 13(13), 1787-95 (1999)

98. Z. A. Haroon, T. S. Lai, J. M. Hettasch, R. A. Lindberg, M. W. Dewhirst және C. S. Greenberg: Тін трансглютаминазасы ісік инвазиясына негізгі жауап ретінде көрінеді және ісік өсуін тежейді. Lab Invest, 79(12), 1679-86. (1999)

99. Z. A. Haroon, T. Wannenburg, M. Gupta, C. S. Greenberg, R. Wallin және D. C. Sane: Адамның каротидті және коронарлық артерия атеросклерозындағы тін трансглутаминазасының локализациясы: бляшканың тұрақтылығы мен прогрессиясының салдары. Lab Invest , 81(1), 83-93 (2001)
DOI:10.1038/labinvest.3780214

100. A. Campisi, D. Caccamo, G. Li Volti, M. Curro, G. Parisi, R. Avola, A. Vanella and R. Ientile: Глутаматтың әсерінен туындаған тотығу-тотықсыздану күйінің өзгеруі бастапқы астроциттегі тіндік трансглютаминазаның жоғарылауына қатысады. мәдениеттер. FEBS Летт, 578 (1-2), 80-4 (2004)
DOI:10.1016/j.febslet.2004.10.074

101. C. M. Bergamini, M. Griffin және F. S. Pansini: Трансглютаминаза және тамырлы биология: физиопатологиялық салдарлар және терапевтік араласулардың перспективалары. Curr Med Chem, 12(20), 2357-72 (2005)
DOI:10.2174/0929867054864804

102. С.Катох, Н.Накагава, Ю.Яно, К.Сатох, Х.Кохно және Ю.Охкубо: Эпидермиялық өсу факторымен индукцияланған трансглютаминаза бастапқы өсірілген гепатоциттердің өсу сигналын теріс реттейді. Biochem J , 313 (Pt 1), 305-9 (1996)
DOI: 10.1042/bj3130305

103. R. Ientile, D. Caccamo және M. Griffin: тіндік трансглютаминаза және стресстік реакция. Амин қышқылдары, 33(2), 385-94 (2007)
DOI: 10.1007/s00726-007-0517-0

104. В.Томази және Л.Фесус: Адам жасушаларындағы тіндік трансглютаминазаның дифференциалды экспрессиясы. Иммуногистохимиялық зерттеу. Cell Tissue Res , 255(1), 215-24 (1989)
DOI: 10.1007/BF00229084

105. С.Лу және П.Дж.Дэвис: ДНҚ метилденуі арқылы тін трансглютаминаза генінің экспрессиясын реттеу. Proc Natl Acad Sci USA, 94(9), 4692-7 (1997)
DOI:10.1073/pnas.94.9.4692

106. B. Seiving, K. Ohlsson, C. Linder and P. Stenberg: Адам қанының моноциттерінің макрофагтарға жетілуі кезіндегі трансглютаминазалық дифференциация. Eur J Haematol, 46(5), 263-71 (1991)
DOI:10.1111/j.1600-0609.1991.tb01537.x

107. М.Лесорт, К.Аттанаванич, Дж.Чжан және Г.В.Джонсон: тін трансглютаминазасының ерекше ядролық локализациясы және белсенділігі. J Biol Chem , 273(20), 11991-4 (1998)
DOI:10.1074/jbc.273.20.11991

108. У.Ландмессер, Б.Хорниг және Х.Дрекслер: Эндотелий функциясы: атеросклероздағы маңызды детерминант? Таралымы , 109(21 Suppl 1), II27-33 (2004)
DOI:10.1161/01.cir.0000129501.88485.1f

109. К.Мохан, Д.Пинто және Т.Б.Исекутц: Тіндік трансглютаминазаны адамның CD8+ Т жасушаларының трансэндотелиальды миграциясына қатысатын жаңа молекула ретінде анықтау. J Immunol, 171(6), 3179-86 (2003)
DOI:10.4049/jimmunol.171.6.3179

110. S. E. Iisma, G. E. Begg және R. M. Graham: G протеинімен байланысқан рецепторлық сигнализациясы бар кросс-байланыстырушы трансглютаминазалар. Sci STKE , 2006(353), pe34 (2006)
DOI:10.1126/stke.3532006pe34

111. С.Мишра және Л.Дж.Мерфи: Тіндік трансглютаминазаның өзіндік киназалық белсенділігі бар: трансглютаминаза 2 инсулин тәрізді өсу факторын байланыстыратын протеин-3киназа ретінде сәйкестендіріледі. J Biol Chem, 279(23), 23863-8 (2004)
DOI:10.1074/jbc.M311919200

112. U. S. Singh, J. Pan, Y. L. Kao, S. Joshi, K. L. Young және K. M. Baker: ұлпа трансглютаминазасы SH-SY5Y жасушаларының ретиноин қышқылымен индукцияланған нейрондық дифференциациясы кезінде RhoA және MAP киназа жолдарының белсендірілуіне делдалдық етеді. J Biol Chem, 278(1), 391-9 (2003)
DOI:10.1074/jbc.M206361200

113. С.Мишра, А.Салех, П.С.Эспино, Дж.Р.Дэви және Л.Дж.Мерфи: Гистондардың ұлпа трансглютаминазасымен фосфорлануы. J Biol Chem, 281(9), 5532-8 (2006)
DOI:10.1074/jbc.M506864200

114. M. Piacentini, M.G Farrace, L. Piredda, P. Matarrese, F. Ciccosanti, L. Falasca, C. Rodolfo, AM Giammarioli, E. Verderio, M. Griffin and W. Malorni: Transglutaminase overexpression нейрондық жасуша желілерін сенсибилизациялайды. митохондриялық мембрана потенциалын және жасушалық тотығу стрессін арттыру арқылы апоптозға дейін. J Neurochem , 81 (5), 1061-72 (2002)
DOI:10.1046/j.1471-4159.2002.00898.x

115. C. Rodolfo, E. Mormone, P. Matarrese, F. Ciccosanti, M. G. Farrace, E. Garofano, L. Piredda, G. M. Fimia, W. Malorni және M. Piacentini: Tissue transglutaminase - көп функционалды BH3-тек ақуыз. J Biol Chem, 279(52), 54783-92 (2004)
DOI:10.1074/jbc.M410938200

116. Д.Парк, С.С.Чой және К.С.Ха: Трансглютаминаза 2: көптеген субклеткалық бөлімдердегі көп функциялы ақуыз. Амин қышқылдары, 39(3), 619-31 (2010)
DOI:10.1007/s00726-010-0500-z

117. З.Балажти, К.Комос, Г.Вамоси, А.Сзанто, М.Ланотте және Л.Фесус: Тін-трансглютаминаза нейтрофилді гранулоциттердің дифференциациясына және функцияларына ықпал етеді. Қан , 108(6), 2045-54 (2006)
DOI: 10.1182/blood-2004-02-007948

118. З.Сзонди, П.Г.Мастроберардино, Дж.Варади, М.Г.Фаррас, Н.Наги, И.Бак, И.Вити, М.Р.Виковски, Г.Мелино, Р.Рицзуто, А.Тосаки, Л.Фесус және М.Пиацентини. : Тін трансглютаминазасы (TG2) АТФ синтезін реттеу арқылы кардиомиоциттерді ишемия/реперфузиялық зақымданудан қорғайды. Жасуша өлімінің айырмашылығы, 13(10), 1827-9 (2006)
DOI:10.1038/sj.cdd.4401889

119. Ф.Бернассола, М.Федеричи, М.Корацари, А.Терринони, М.Л.Хрибаль, В.Де Лауренци, М.Раналли, О.Масса, Г.Сести, В.Х.Маклин, Дж.Ситро, Ф.Барбетти және Г. Мелино: Глюкозаға төзімділіктегі трансглутаминаза 2 рөлі: тышқандарды нокаутпен зерттеу және MODY пациентіндегі болжамды мутация. FASEB J , 16(11), 1371-8 (2002)
DOI:10.1096/fj.01-0689com

120. Г.Баттаглия, М.Г. Фаррас, П.Г. Мастроберардино, И.Вити, Г.М.Фимиа, Дж.Ван Биумен, Б.Девризе, Г.Мелино, Г.Молинаро, К.Л.Бусети, Ф.Биажони, Ф.Николетти және М.Пиасентини : Трансглутаминаза 2 абляциясы экстрапирамидалық бұзылулардың эксперименттік үлгілерінде нейрондық осалдыққа әсер ететін I митохондриялық респираторлық кешеннің ақаулы функциясына әкеледі. J Neurochem, 100(1), 36-49 (2007)
DOI:10.1111/j.1471-4159.2006.04140.x

121. S. Orru, I. Caputo, A. D&rsquoAmato, M. Ruoppolo және C. Esposito: Адамның ішек эпителий жасушаларының желісіндегі трансглютаминаза үшін ацил-акцепторлық және ацил-донорлық субстраттарды протеомикамен анықтау. Целиак ауруының салдары. J Biol Chem, 278(34), 31766-73 (2003)
DOI:10.1074/jbc.M305080200

122. S. Altuntas, F. Rossin, C. Marsella, M. D&rsquoEletto, L. Diaz-Hidalgo, MG Farrace, M. Campanella, M. Antonioli, GM Fimia and M. Piacentini: трансглутаминаза 2 типті және пируват киназасы болып табылады. Аутофагияны реттеудегі M2 өзара әрекеттесуі. Oncotarget , 6(42), 44941-54 (2015)
DOI:10.18632/oncotarget.6759

123. K. N. Lee, M. D. Maxwell, M. K. Patterson, Jr., P. J. Birckbichler және E. Conway: HT29 тоқ ішек қатерлі ісігінің жасушаларында трансглютаминаза субстраттарын анықтау: 5-(биотинамидо)пентиламинді трансглютаминазаға тән про.. ретінде пайдалану. Biochim Biophys Acta, 1136(1), 12-6 (1992)
DOI:10.1016/0167-4889(92)90078-P

124. B. M. Ku, C. H. Lee, S. H. Lee және S. Y. Kim: Трансглютаминаза 2 экспрессиясының жоғарылауы бүйрек карциномасының жасушаларында гликолитикалық метаболизмді қоздырады. Амин қышқылдары, 46(6), 1527-36 (2014)
DOI: 10.1007/s00726-014-1714-2

125. R. Rizzuto, P. Pinton, W. Carrington, F. S. Fay, K. E. Fogarty, L. M. Lifshitz, R. A. Tuft және T. Pozzan: Митохондриялық Са2+ жауаптарының детерминанты ретінде эндоплазмалық ретикулуммен тығыз байланыс. Ғылым , 280(5370), 1763-6 (1998)
DOI:10.1126/science.280.5370.1763

126. К.Хамада, А.Тераучи, К.Накамура, Т.Хиго, Н.Нукина, Н.Мацумото, К.Хисацуне, Т.Накамура және К.Микошиба: Инозитол 1-нің трансглютаминаза арқылы трансляциядан кейінгі модификациясы арқылы аберрантты кальций сигналы. ,4,5-трисфосфатты рецепторлар. Proc Natl Acad Sci U S A , 111(38), E3966-75 (2014)
DOI:10.1073/pnas.1409730111

127. M. J. Berridge, P. Lipp және M. D. Bootman: Кальций сигнализациясының әмбебаптығы және әмбебаптығы. Nat Rev Mol Cell Biol, 1(1), 11-21 (2000)
DOI: 10.1038/35036035

128. Дж.К.Фоскетт, К.Уайт, К.Х.Чун және Д.О.Мак: Инозит трисфосфат рецепторының Са2+ босату арналары. Physiol Rev, 87(2), 593-658 (2007)
DOI:10.1152/physrev.00035.2006

129. С.Силено, В.Д&rsquoOria, Р.Стукки, М.Алессио, С.Петрини, В.Бонетто, П.Мехлер, Ф.Бертуцци, В.Грассо, К.Паолелла, Ф.Барбетти және О.Масса: Трансглютаминаза 2-нің INS-1E ядросында және адамның ұйқы безі аралдарының жасушаларында мүмкін рөлі. J Proteomics , 96, 314-27 (2014)
DOI:10.1016/j.jprot.2013.11.011

130. YF Hsieh, GY Liu, YJ Lee, JJ Yang, K. Sandor, Z. Sarang, A. Bononi, P. Pinton, L. Tretter, Z. Szondy and GJ Tsay: Transglutaminase 2 Jurkat T-де апоптозды индукциялауға ықпал етеді. RAP1GDS1 кросс-байланыстыру арқылы Ca2+ гомеостазын модуляциялау арқылы жасушалар. PLoS One , 8(12), e81516 (2013)
DOI:10.1371/journal.pone.0081516

131. Дж.П.Хатчинсон, К.Риттингер және Дж.Ф.Экклстон: гуанин нуклеотидтерінің диссоциациясының стимуляторы ақуызының тазартылуы және сипаттамасы. Әдістері Enzymol, 325, 71-82 (2000)
DOI:10.1016/S0076-6879(00)25432-3

132. П.Каземи-Эсфарджани және А.Р.Ла Спада: бұралған Дежаву: биоэнергетикадағы трансглютаминазалар және Хантингтон ауруындағы транскрипциялық дисфункция. EMBO Mol Med , 2(9), 335-7 (2010)
DOI:10.1002/emmm.201000092

133. A. W. Leung және A. P. Halestrap: Митохондрия өткізгіштігінің ауысу тесігінің молекулалық механизмін түсіндірудегі соңғы прогресс. Biochim Biophys Acta, 1777(7-8), 946-52 (2008)
DOI:10.1016/j.bbabio.2008.03.009

134. F. Rossin, M. D&rsquoEletto, L. Falasca, S. Sepe, S. Cocco, GM Fimia, M. Campanella, PG Mastroberardino, MG Farrace және M. Piacentini: Transglutaminase 2 абляциясы метаболизммен байланысты митофагияның бұзылуына әкеледі. аэробты гликолизге ауысады. Жасуша өлімінің айырмашылығы , 22(3), 408-18 (2015)
DOI:10.1038/cdd.2014.106

135. H. Lu, G. Li, L. Liu, L. Feng, X. Wang және H. Jin: даму мен қатерлі ісіктегі митофагияның реттелуі мен қызметі. Аутофагия, 9(11), 1720-36 (2013)
DOI:10.4161/auto.26550

136. S. Kumar, T. R. Donti, N. Agnihotri және K. Mehta: Қабыну сигналдық жолдарын белсендіру арқылы сүт бездерінің эпителий жасушаларында глюкоза метаболизмін трансглютаминаза 2 қайта бағдарламалау. Int J Cancer , 134 (12), 2798-807 (2014)
DOI:10.1002/ijc.28623

137. О.Варбург: Қатерлі ісік жасушаларындағы тыныс алудың бұзылуы туралы. Ғылым , 124(3215), 269-70 (1956)

138. C. Y. Liu, C. F. Lee, C. H. Hong және Y. H. Wei: Митохондриялық ДНҚ мутациясы мен азаюы адам жасушаларының апоптозға бейімділігін арттырады. Энн NY Acad Sci, 1011, 133-45 (2004)
DOI:10.1196/жылнамалар.1293.014

139. Дж.П.Тьери: Ісік прогрессіндегі эпителий-мезенхималық ауысулар. Nat Rev Рагы, 2 (6), 442-54 (2002)

140. I. Nunes, P. E. Gleizes, C. N. Metz және D. B. Rifkin: Жасырын түрлендіретін өсу факторы-бетаның белсенділенуіне және трансглютаминазаға тәуелді кросс-байланысына қатысатын жасырын түрлендіретін өсу факторы-бета байланыстырушы протеин домендері. J Cell Biol, 136(5), 1151-63 (1997)
DOI:10.1083/jcb.136.5.1151

141. А.Кумар, Дж.Сю, С.Брейди, Х.Гао, Д.Ю, Дж.Рубен және К.Мехта: Тін трансглютаминазасы сүт бездерінің эпителий жасушаларында мезенхималық ауысуды индукциялау арқылы дәріге төзімділік пен инвазияға ықпал етеді. PLoS One , 5(10), e13390 (2010)
DOI:10.1371/journal.pone.0013390

142. M. L. Huynh, V. A. Fadok және P. M. Henson: апоптотикалық жасушалардың фосфатидилсеринге тәуелді жұтылуы TGF-бета1 секрециясына және қабынудың жойылуына ықпал етеді. J Clin Invest, 109(1), 41-50 (2002)
DOI: 10.1172/JCI0211638

143. L. Falasca, V. Iadevaia, F. Ciccosanti, G. Melino, A. Serapino және M. Piacentini: II типті трансглютаминаза апоптозды жасушаларды жұту арқылы туындаған қабынуға қарсы жауапты реттеудің негізгі элементі болып табылады. J Иммунол, 174(11), 7330-40 (2005)
DOI:10.4049/jimmunol.174.11.7330

144. PG Mastroberardino, C. Iannicola, R. Nardacci, F. Bernasola, V. De Laurenzi, G. Melino, S. Moreno, F. Pavone, S. Oliverio, L. Fesus and M. Piacentini: &lsquoTissue&rsquo трансглютаминазаның жойылуын азайтады. нейрондық өлім және Хантингтон ауруының тышқан үлгісінде өмір сүруді ұзартады. Жасуша өлімінің айырмашылығы , 9(9), 873-80. (2002)
DOI:10.1038/sj.cdd.4401093

145. C. D. Bailey және G. V. Johnson: тіндік трансглютаминаза R6/2 Хантингтон ауруының тінтуірінің үлгісінде агрегаттық тәуелсіз механизмдер арқылы аурудың өршуіне ықпал етеді. J Neurochem, 92(1), 83-92 (2005)
DOI:10.1111/j.1471-4159.2004.02839.x

146. М.В.Карпуй, М.В.Бехер, Дж.Спрингер, Д.Чабас, С.Юсеф, Р.Педотти, Д.Митчелл және Л.Штайнман: Трансглютаминаза тежегішін енгізу арқылы Хантингтон ауруының трансгендік үлгісінде ұзақ өмір сүру және қалыптан тыс қозғалыстардың төмендеуі цистамин. Нат Мед, 8(2), 143-9. (2002)
DOI:10.1038/nm0202-143

147. A. Dedeoglu, JK Kubilus, TM Jeitner, SA Matson, M. Bogdanov, NW Kowall, WR Matson, AJ Cooper, RR Ratan, MF Beal, SM Hersch және RJ Ferrante: Huntington және rsquos тышқан үлгісіндегі цистаминнің емдік әсері ауру. J Neurosci, 22 (20), 8942-50. (2002)

148. E. Junn, R. D. Ronchetti, M. M. Quezado, S. Y. Kim және M. M. Mouradian: альфа-синуклеиннің тіндік трансглютаминазамен индукцияланған агрегациясы: Паркинсон ауруындағы Льюи денесінің қалыптасуына және Льюи денелерімен деменцияға салдары. Proc Natl Acad Sci U S A, 100(4), 2047-52. (2003)
DOI:10.1073/pnas.0438021100

149. G. Andringa, K. Y. Lam, M. Chegary, X. Wang, T. N. Chase және M. C. Bennett: Тіндік трансглютаминаза Паркинсон ауруында альфа-синуклеинді айқаспалы байланыстардың түзілуін катализдейді. FASEB J , 18(7), 932-4 (2004)

150. P. H. Jensen, E. S. Sorensen, T. E. Petersen, J. Gliemann және L. K. Rasmussen: альфа-синуклеин фрагментінің синуклеин консенсус мотивіндегі қалдықтар, NAC, Alzhei. am4. petaseyl petasei. petaseide-мен кросс-байланыстыруға трансглутаминаза катализденеді. Biochem J , 310 (Pt 1), 91-4 (1995)
DOI: 10.1042/bj3100091

151. З.Немес, Б.Девризе, П.М.Штайнерт, Дж.Ван Беумен және Л.Фесус: Альцгеймер және нейрондық нейрондардағы гамма-глутамил-эпсилон-лизин байланыстары арқылы ubiquitin, HSP27, паркин және альфа-синуклеинді айқаспалы байланыстыру. FASEB J , 18(10), 1135-7 (2004)

152. М.М. Вильгельмус, А.М. ван Дам және Б. Друкарх: Тіндік трансглютаминаза: нейродегенеративті ауруларда уытты ақуыз агрегациясының алдын алудағы жаңа фармакологиялық мақсат. Eur J Pharmacol, 585(2-3), 464-72 (2008)
DOI:10.1016/j.ejphar.2008.01.059

153. С.АбдАлла, Х.Лотер, А.эль Мисири, А.Лангер, П.Сергеев, Ю.эль Фарамави және У.Квитерер: Ангиотензин II AT2 рецепторларының олигомерлері Альцгеймер ауруының жануарлар үлгісіндегі G-белок дисфункциясына делдал болады. J Biol Chem, 284(10), 6554-65 (2009)

154. M. Griffin, R. Casadio and C. M. Bergamini: Трансглютаминазалар: табиғаттың биологиялық желімдері. Biochem J , 368(Pt 2), 377-96 (2002)
DOI: 10.1042/bj20021234

155. В.Ларрета-Гард және Х.Берри: Протеиназа/трансглютаминаза циклімен жасушадан тыс матрицаның деградациясының тепе-теңдігін модельдеу. Дж Теор Биол, 217(1), 105-24 (2002)
DOI:10.1006/jtbi.2002.3010

156. Х.Накане, А.Исида-Ямамото, Х.Такахаши және Х.Иизука: Элафин, секреторлық ақуыз, псориазды кератиноциттердің ішінен мүйізденген жасуша қабықшаларымен өзара байланысқан. J Invest Dermatol, 119(1), 50-5 (2002)
DOI:10.1046/j.1523-1747.2002.01803.x

157. Е.А.Вердерио, Т.Джонсон және М.Гриффин: Қалыпты және қалыптан тыс жараларды емдеудегі тіндік трансглютаминаза: шолу мақаласы. Амин қышқылдары, 26(4), 387-404 (2004)
DOI: 10.1007/s00726-004-0094-4

158. H. Ritchie, L. C. Lawrie, M. W. Mosesson және N. A. Booth: плазминоген активаторының ингибиторы 2 (PAI-2) үшін фибриногендегі айқаспалы байланыс орындарының сипаттамасы. Энн NY Acad Sci, 936, 215-8 (2001)
DOI:10.1111/j.1749-6632.2001.tb03508.x

159. K. N. Lee, C. S. Lee, W. C. Tae, K. W. Jackson, V. J. Christiansen және P. A. McKee: белсендірілген XIII фактор және тіндік трансглютаминаза арқылы жабайы типті және мутантты альфа 2-антиплазминдердің фибринмен айқаспалы байланысы. J Biol Chem, 275(48), 37382-9. (2000)
DOI:10.1074/jbc.M003375200

160. А.Агах, Т.Р.Кириакидес және П.Борнштейн: Металопротеиназа-2 матрицасы арқылы жасуша-беттік ұлпа трансглютаминазасының протеолизі тромбоспондин-2-нөлдік фибробласттар мен тышқандардағы адгезиялық ақауға және матрицалық ауытқуларға ықпал етеді. Am J Pathol, 167(1), 81-8 (2005)
DOI:10.1016/S0002-9440(10)62955-0

161. E. A. Verderio, D. Telci, A. Okoye, G. Melino және M. Griffin: Фибронектинмен байланысқан тін трансглютаминазасы арқылы жүзеге асырылатын жаңа RGD-тәуелсіз жасуша адгезиясы жолы жасушаларды анокистерден құтқарады. J Biol Chem, 278(43), 42604-14 (2003)
DOI:10.1074/jbc.M303303200

162. С.С.Акимов және А.М.Белкин: Жасуша бетіндегі ұлпа трансглютаминазасы фибронектинге моноцитті жасушалардың адгезиясы мен миграциясына қатысады. Қан , 98(5), 1567-76 (2001)
DOI:10.1182/blood.V98.5.1567

163. С.С.Акимов және А.М.Белкин: Жасуша бетіндегі трансглютаминаза фибронектиннің желатинді байланыстыратын доменімен өзара әрекеттесу арқылы фибронектиннің жиналуына ықпал етеді: TGFbeta-тәуелді матрицаны тұндырудағы рөл. J Cell Sci , 114(Pt 16), 2989-3000 (2001)

164. C. Nider, F. B. Zimmermann, M. Adam және M. Molls: пентоксифиллиннің сәулелік терапияның модификаторы ретіндегі рөлі. Қатерлі ісікпен емдеу рев. (2005)
DOI:10.1016/j.ctrv.2005.07.007

165. Н.Суто, К.Икура және Р.Сасаки: Адамның гепатобластомасы HepG2 жасушаларында тіндік типті трансглютаминазаның интерлейкин-6 индукциялық экспрессиясы. J Biol Chem, 268(10), 7469-73 (1993)

166. T. S. Johnson, A. F. El-Koraie, N. J. Skill, N. M. Baddour, A. M. El Nahas, M. Njloma, A. G. Adam және M. Griffin: тіндік трансглютаминаза және адамның бүйрек тыртықтарының дамуы. J Am Soc Nephrol , 14(8), 2052-62 (2003)
DOI:10.1097/01.ASN.0000079614.63463.DD

167. NJ Skill, TS Johnson, IG Coutts, RE Saint, M. Fisher, L. Huang, AM El Nahas, RJ Collighan және M. Griffin: Трансглютаминаза белсенділігінің тежелуі проксимальды түтікшелі эпителийдегі глюкозаның жоғары деңгейімен туындаған жасушадан тыс матрицаның жинақталуын азайтады. жасушалар. J Biol Chem, 279(46), 47754-62 (2004)
DOI:10.1074/jbc.M402698200

168. M. Le, C. M. Gohr және A. K. Rosenthal: Трансглютаминаза жасырын TGFbeta-ның қартаюы артикулярлы хондроциттердің жасушадан тыс матрицасына қосылуына қатысады. Connect Tissue Res , 42(4), 245-53 (2001)
DOI:10.3109/03008200109016839

169. I. Yu, C. P. Garnham және A. Roll-Mecak: Тубулин кодексін жазу және оқу.J Biol Chem , 290(28), 17163-72 (2015)
DOI: 10.1074/jbc.R115.637447

170. Л.Пиредда, М.Г.Фаррас, М.Ло Белло, В.Малорни, Г.Мелино, Р.Петруцелли және М.Пиацентини: апоптозға ұшыраған нейрондық жасушалардағы «lsquotissue» трансглутаминазаны байланыстыратын ақуыздарды анықтау. Фасеб Дж., 13(2), 355-64 (1999)

171. П.В.Баас: Аксондағы микротүтіктердің тұрақтылығы: ескі құпияға жаңа жауаптар. Нейрон , 78(1), 3-5 (2013)
DOI:10.1016/j.neuron.2013.03.012

172. Л.Руссо, К.Марселла, Г.Нардо, Т.Массистенан, М.Алессио, Э.Пьермарини, С.Ла Роза, Г.Финци, В.Бонетто, Ф.Бертуцци, П.Мехлер және О.Масса. : Бірінші фазадағы инсулин секрециясы кезінде трансглутаминаза 2 трансамидациялық белсенділігі: INS-1E табиғи субстраттары. Acta Diabetol, 50(1), 61-72 (2013)
DOI: 10.1007/s00592-012-0381-6

173. С.Дель Дука, Д.Серафини-Фракассини, П.Боннер, М.Крести және Г.Кай: Тозаң трансглютаминазасымен катализденген трансляциядан кейінгі модификациялардың микротүтікшелер мен актин жіптерінің функционалдық қасиеттеріне әсері. Biochem J , 418(3), 651-64 (2009)
DOI: 10.1042/BJ20081781

174. Z. Nemes, Jr., R. Adany, M. Balazs, P. Boross and L. Fesus: цитоплазмалық актинді апоптоздан өтетін HL-60 және U937 жасушаларында тіндік трансглутаминаза үшін мол глютаминилді субстрат ретінде анықтау. J Biol Chem, 272(33), 20577-83 (1997)
DOI:10.1074/jbc.272.33.20577

175. Л.Долго, К.Ауфенвенн, Х.Траупе және В.Баумгартнер: Бета-актин тауық теленцефалиялық жасуша дақылдарындағы синаптикалық ұштардағы трансглютаминаза белсенділігінің нысанасы болып табылады. J Mol Neurosci , 46(2), 410-9 (2012)
DOI: 10.1007/s12031-011-9601-8

176. C. H. Yu, C. C. Chou, Y. J. Lee, K. H. Hoo және G. D. Chang: Сперминге спецификалық антисарысу және масс-спектрометриялық талдау арқылы ақуыздың полиаминденуін анықтау. Амин қышқылдары, 47(3), 469-81 (2015)
DOI: 10.1007/s00726-014-1879-8

177. У.С.Сингх, М.Т.Кунар, Ю.Л.Као және К.М. Бейкер: RhoA-ассоциирленген киназа-2-нің ретиной қышқылымен индукцияланған активациясындағы трансглютаминаза II рөлі. EMBO J , 20(10), 2413-23 (2001)
DOI:10.1093/emboj/20.10.2413

Түйінді сөздер: тін трансглютаминазасы, TG2 митохондрияларының трансляциядан кейінгі модификациясы. Кальций гомеостазы, реактивті оттегі түрлері, трансамидация, биоэнергетика, шолу


МАТЕРИАЛДАР МЕН ТӘСІЛДЕР

Материалдар

[α- 32 P]dCTP ICN Biomedicals (Costa Mesa, CA) компаниясынан сатып алынды. [125 I]-rProtein A New England Nuclear (Бостон, MA) компаниясынан жеткізілді. ZnCl2 және микофенол қышқылы (MPA) Sigma Chemical компаниясынан (Сент-Луис, МО) сатып алынды.

Жасуша мәдениеті

Мырышқа тәуелді, p53-индукцияланатын Ind-4 және Ind-8 жасушалары және бақылау Con-2 және Con-3 жасушалары 10% диализденген ұрықтың сиыр сарысуымен (JRH Biosciences, Lenexa, KS) және толықтырылған DMEM-де субконфлюент моноқабаттары ретінде сақталды. 5 мкг/мл пуромицин (Сигма), 37°С 5% СО бар ылғалдандырылған инкубаторда2. Бұл мамандандырылған сызықтардың туындысы туралы мәліметтер басқа жерде сипатталған (Лют.б., жарияланбаған бақылаулар). Ағымдағы күтім үшін барлық жасушалар 75 см 2 культура колбасының ауданына 20 мл қоректік ортада өсірілді. Қоректік ортада 0,5 мг/мл G418-сульфат (Life Technologies, Gaithersburg, MD) болғаннан басқа, векторлық трансфекциялық туындылар бірдей тәртіпте сақталды. Impd культура ортасына 45 мкм ZnCl толықтырылғанын қоспағанда, трансфекциялық туындылар векторлық трансфектанттар сияқты сақталды.2. Мырышсыз жағдайларды мырыштың жоғары деңгейлерімен салыстыратын тәжірибелерді бастамас бұрын, имд трансфектанттар мырышсыз ортада 3 күн бойы өсірілді.

MPA қарсылық эксперименттерінде ингибитор үшін тасымалдаушы ретінде пайдаланылған DMSO (Sigma) қоректік ортада 0,017% (көлем/көлем) соңғы концентрацияда болды. DMSO бірдей концентрациясымен өсірілген бақылау MPA жоқ дақылдардың (4-суретте сипатталғандай) өсуінде ешқандай өзгерістер байқалмады.

Мырыш-тәуелді, p53-индукцияланатын имп Трансфекциялық жасушалардың туындысы

Трансфекцияға арналған күшейтілген плазмидалар жеткізуші көрсеткендей Qiagen баған фракциясы арқылы оқшауланды және одан әрі CsCl тепе-теңдік тығыздығы градиенті центрифугалау арқылы тазартылды. pcD-X векторындағы simian вирус-40 промоторының бақылауындағы қытай хомякасын кодтайтын pCH2–5 (Collart and Huberman, 1988) плазмидасының бес микрограммы (Окаяма және Берг, 1983) немесе pCH2 туындысы Бүкіл IMPD cDNA тізбегі үшін жойылған –5 CaPO арқылы котрансфекцияланды4 процедура бұрын сипатталғандай (Sherley, 1991) G418-сульфат антибиотикіне төзімділік беретін 2 мкг плазмиді бар 1 × 10 6 Ind-8 жасушаларына (pSLneo Sherley, 1991). pCH2-5 жою туындысы ас қорыту арқылы дайындалды БамHI кейін гельді тазарту және векторлық фрагментті айналдыру.

0,5 мг/мл G418-сульфатта да, 5 мкг/мл пуромицинде де іріктеу кезінде трансфекцияланған жасушалар 40 мкм ZnCl бар селективті ортада немесе селективті ортада 1/10 тығыздықта параллельді ауыстырылды.2 p53-экспрессиясын индукциялау үшін (мысалы, 1-суретті қараңыз). Impd трансфекциялық жасуша желілері p53-индукциялау жағдайында (40 мкМ ZnCl) pCH2-5 котрансфекцияларынан пайда болған сақиналы клондалған төзімді колониялардан алынған.2). Бұл колониялар 40 мкм ZnCl бар селективті ортада кеңейтілді2, бірақ одан кейін құрамында 45 мкм ZnCl бар селективті ортада сақталады2. Векторлық трансфектанттар IMPD тізбектерінің жойылуын қамтитын pCH2-5 туындысы бар мырышсыз ортадағы котрансфекциялардан колониялармен алынған. Әрбір түрдің бірнеше колониялары кеңейтілді, бірінші өту кезінде сұйық азотта криоконсервенцияға ұшырады және Микоплазма. Барлық жасуша клондары теріс сыналған. Содан кейін барлық эксперименттер культурада 50-ден аз екі еселенген популяция үшін сақталған жасушалармен орындалды.

1-сурет. IMPD генді тасымалдау p53-тәуелді өсудің басылуын болдырмайды. Пуромицинге төзімді, мырышқа тәуелді, p53-индукцияланатын жасушалар (A–C, Ind-4 сызығы) және p53-нөлдік бақылау жасушалары (DF, Con-2 сызығы) неомицинге төзімділік беретін 2 мкг плазмидпен котрансфекцияланды. Simian вирусы 40 ерте промоторы (C және F) басқаратын хомяк IMPD cDNA бар 5 мкг плазмида немесе IMPD тізбегі (A, B, D және E) үшін жойылған 5 мкг туынды плазмида. Трансфекциядан кейін екі күннен кейін жасушалар трипсинизацияланды және олардың бастапқы тығыздығы 1:10-да құрамында селективті орта (яғни, пуромицин де, неомицин де А және D бар өсу ортасы) немесе 40 мкм ZnCl бар селективті орта бар 6 шұңқырлы дақылдық пластиналарға ауыстырылды.2 p53 өрнегін индукциялау үшін (B, C, E және F). Он күннен кейін жасуша колониялары кристалды күлгін түске боялып, суретке түсірілді. Мұнда көрсетілмегенімен, ZnCl болмаған жағдайда2,IMPD геннің трансфекциясы төзімді колония түзілу жиілігін айтарлықтай өзгертпеді (2-суретті қараңыз). (A) p53-индукцияланатын сызықтық вектор трансфекциясы, 0 Zn (төмен p53). (B) p53-индукцияланатын сызықтық вектор трансфекциясы + Zn (p53 индукцияланған). (C) p53-индукцияланатын сызық IMPD трансфекциясы + Zn (p53 индукцияланған). (D) p53-нөлдік сызықтық вектор трансфекциясы, 0 Zn (p53 жоқ). (E) p53-нөлдік сызықты вектор трансфекциясы + Zn (p53 жоқ). (F) p53-нөлдік сызық IMPD трансфекциясы + Zn (p53 жоқ).

Жасуша өсу талдаулары

Өсу қисық сызығын талдауды бастау үшін жасушалар 3 күндік кезең ішінде шамамен бір жарым түйісуге дейін өсірілді, трипсиндендірілді және жасуша: қаптау аймағында мырышсыз ортада (яғни, DMEM 10% диализденген ұрықтың сиыр сарысуымен толықтырылған) қайта жабылды. :1 × 10 5 :25 см 2 :5 мл орташа көлемдік қатынас. Бұл қатынас басқаша көрсетілмесе, барлық эксперименттер үшін тұрақты болды. 16-24 сағаттан кейін қоректік орта бірдей көлемде мырышсыз ортамен немесе құрамында ZnCl көрсетілген концентрациясы бар ортамен ауыстырылды.2. Бұл уақыт талдауларда 0 сағ деп белгіленді. Кейінгі уақытта жасушалар қайталанатын колбалардан трипсинация арқылы жиналды және ZM Coulter санауыш үлгісімен есептелді. Екі еселеу уақыты бұрын сипатталғандай анықталды (Шерлит.б., 1995a,b).

Солтүстік дақтарды талдау

анықтау үшін нуклеин қышқылы зондтарын дайындауiMPD, mdm2, бақ, waf1, жәнеL32 Northern Blot талдауларындағы мРНҚ басқа жерде сипатталған (Лю т.б., жарияланбаған бақылаулар). Northern blot талдаулары сипатталғандай 5 мкг жалпы цитоплазмалық РНҚ көмегімен орындалды (Сэмбрук т.б., 1989). Дақтар DuPont Cronex Lightning Plus жақсарту экраны бар алдын ала жыпылықтаған радиографиялық пленкаға -80°C температурада әсер етті. Қайта тексеру үшін дақтар Трис-буферленген (50 мМ, рН 8,0) 50% көлем/көлемдік формамид ерітіндісімен 72°C температурада 45 минут бойы өңдеу арқылы тазартылды.

Western Blot талдаулары

Еритін Nonidet P-40 жасуша сығындылары бұрын сипатталғандай дайындалған (Stadler т.б., 1994). Сығынды ақуыз концентрациясы Bio-Rad ақуыз талдауы (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA) көмегімен анықталды. Талдау үшін әрбір зерттелген үлгі үшін 40 мкг сығынды ақуызы 10% полиакриламидті гельдерде SDS-PAGE арқылы бөлінген. Иммуноблоттау және IMPD ақуызын анықтау бұрын сипатталғандай (Шерли мен Келли, 1988) доктор Ф. Колларт (Argonne National Laboratory, Argonne, IL Collart және Губерман, 1988).

Денситометрия

Авторадиограф диапазонының тығыздығы UltroScan XL сканерлеуші ​​лазерлік денситометрмен (Pharmacia LKB, Уппсала, Швеция) сандық анықталды. Барлық өлшемдердің сызықтық диапазонда болуын қамтамасыз ету үшін әр гель үшін әртүрлі уақыттың бірнеше экспозициялары салыстырылды және талдауларға берілген экспозиция уақыты үшін пленка реакциясының сызықтық диапазонында екендігі анықталған авторрадиографиялық жолақтар ғана қосылды.


Актинді байланыстыратын препараттар

Фаллоидиндер, цитохалазиндер, латрункулин А және жасплакинолид сияқты токсиндер актинмен байланысатын және оның полимерленуін өзгертетін табиғи түрде кездесетін шағын молекулалар. Фаллодиндер іргелес актин бөлімшелерін біріктіру арқылы актин жіпшесінің бөлшектелуін тежейді, ал цитохалазиндер актин жіпшелерінің тікенді ұшымен байланысып, актин жіпшелерінің жиналуын және сол жағында бөлшектелуін болдырмайды. Латрункулин А актин мономерлерімен байланысып, олардың полимерленуін тежейді және осылайша жіптердің бөлшектелуіне ықпал етеді латрункулин А сонымен қатар актин суббірліктеріндегі нуклеотидтердің алмасуын тежей алады [3] [4]. Жасплакинолидтер актин мономерлерін тұрақтандырады, осылайша жіптердің нуклеациясын және жиналуын жақсартады.

Бірқатар шағын молекулалы препараттар актинмен полимерлену (A) немесе деполимеризация (B) кезінде қосыла алады, актин жіптерінің динамикасына әртүрлі әсер етеді.


Биологиядағы және адам ауруларындағы трансглютаминазалар және олардың субстраттары: 50 жыл өсу

Трансглутаминаза – әртүрлі субстраттарға әсер ететін бірнеше ферментативті әрекетті атқара алатын фермент. Соңғы 50 жылдан бері трансглютаминаза ферментінің отбасы мүшелері мен оның субстраттары туралы білімнің өсуі бұл ақуызға деген үлкен қызығушылық пен қызығушылықты көрсетеді, оның қызметі мен құрылымы әлі де маңызды зерттеу нысаны болып табылады. Екінші жағынан, адамның бірқатар ауруларына қатысуы және осы отбасының кейбір ең зерттелген мүшелерінің биологиялық функциялары туралы білімінің болмауы бұл ферментті қызықты зерттеу саласына айналдырады. Бұл фермент пен оның субстраттарының тарихы, олардың өзара байланысы туралы 50 жыл бұрын алғаш рет хабарланған, зерттеушілер арасында білім мен қарым-қатынасты арттыруға күш салу қажет екенін көрсетеді. Осы маңызды нәтижеге қол жеткізу үшін 10 жыл бұрын бүкіл әлемде трансглутаминаза (WHAT) айналасында болып жатқан деп аталатын интернет-парақ құрылды. Осы тәжірибелерге сүйене отырып, трансглютаминаза мен оның субстраттарын қарауға арналған жаңа көзқарастар анықталуы мүмкін.

Бұл жазылым мазмұнының алдын ала қарауы, мекеме арқылы қол жеткізу.


Бейнені қараңыз: משהו עומד להשתנות כל שבוע יהיה יותר קשה ויותר קשה - הרב ניר בן ארצי לפני כעשר שנים על שינוי האקלים (Қаңтар 2022).