Ақпарат

3.4: Материалдар мен процедуралар – Биология

3.4: Материалдар мен процедуралар – Биология


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Материалдар

Ылғал орнату материалдары:

  • Шыны слайдтар
  • Аспалы слайдтар
  • Қаптамалар
  • Вазелин
  • Ұстау/протосло

Тірі материал:

  • Аралас протистер

Дайындалған слайдтар:

  • Амеба протейі
  • Trypanosoma gambiense (Батыс Африка трипаносомиясы)
  • Plasmodium vivax (безгек)
  • Paramecium caudatum
  • Giardia lamblia (лямблиоз)
  • Cryptospiridium parvum
  • Entamoeba histolytica (амебалық дизентерия)
  • Trichomonas vaginalis
  • Балантидий таяқшасы

Процедуралар

Микроскопты қолдану және күту

  1. Микроскопты бір қолыңызбен бұрыштың иінінен, ал екінші қолыңызбен табанның астынан ұстап, әрқашан микроскопты тік ұстаңыз.
  2. Бастамас бұрын көзді және объектілерді тазалаңыз: линзалар мен линзаларды тазалау үшін ТЕК арнайы ОБЪЕЗА ҚАҒАЗЫН пайдаланыңыз; ЕШҚАШАН Кимвиптерді, қағаз сүлгілерді немесе кез келген басқа қағазды немесе матаны пайдаланбаңыз. Сіз лас слайдтарды, сахнаны және т.б. тазалау үшін Kimwipes пайдалана аласыз.
  3. Жарық көзін қосыңыз, қосқыштан қосыңыз және жарықты орташа қарқындылыққа реттеңіз. Сахналық диафрагма мен өріс диафрагмаларының ашық екеніне көз жеткізіңіз.
  4. Слайд үлгісін төмен қуат (4X немесе 10X) астындағы сахнадағы саңылаудың үстіне қойып, оны жарықтың ортасына қойыңыз.
  5. Микроскопқа қарамас бұрын, сырғымалы сахна ең жоғары күйде болатындай етіп дөрекі реттеуді бұраңыз. Мұны төмен қуаттан басқа ешнәрседе жасамаңыз, жоғары қуатта сахна объектіге соғуы мүмкін. Сондай-ақ, төмен қуат объектісімен өрескел реттеуді ғана пайдаланыңыз. Дөрекі реттеуді ЕШҚАШАН басқа мақсатпен қолданбаңыз.
  6. Қосалқы конденсатор, егер жылжымалы болса, оның ең жоғары орнына көтерілуі керек. Оны кейінірек реттеу қажет болуы мүмкін.
  7. Көру қауіпсіздігіңіз үшін микроскопқа қараған кезде екі көзді де ашық ұстаңыз. Бұл біраз тәжірибені қажет етеді, бірақ сіз көп ұзамай техниканы меңгересіз. Окулярларды максималды жайлылық пен анық көру үшін көз ішілік қашықтыққа, көздер арасындағы қашықтыққа сәйкес реттеуге болады. Окулярларды әрқайсысына бір-бірден қарап, содан кейін көзді ішке немесе сыртқа айналдыру арқылы жеке-жеке бағыттауға болады — бұл әрбір көздің көру қабілетінің арасында сәйкессіздік болса, әсіресе пайдалы.
  8. Көзге қараңыз және слайдтағы нысан көрінгенше сахнаны түсіріп, дөрекі реттеу тұтқасын біртіндеп бұраңыз. Нысан шамамен фокуста болғанда, ең айқын көріністі алу үшін дәл реттеу тұтқасын пайдаланыңыз.
  9. Қажет кезде слайдтағы нысан арқылы өтетін жарық мөлшерін өзгерту үшін ирис диафрагмасын пайдаланыңыз. Бұл жарықты басқару құралын пайдалану өте маңызды. Өсімдіктердің немесе жануарлардың тіндері боялмаған немесе нашар боялған кезде, жарық мөлшерін АЗАЙТУ арқылы олар көбірек көрінуі мүмкін. Қаралып жатқан нысанның сыртқы түріндегі айырмашылықтарды байқау үшін диафрагманы бірнеше рет ашып, жабыңыз.
  10. Таза ақ фонды қамтамасыз ету үшін ішкі сатылы конденсаторды реттеңіз. Конденсатордың кескін анықтығына әсерін көру үшін конденсаторды жоғары және төмен жылжытуға жаттығыңыз. Конденсатордың дұрыс биіктігі жарық сәулелерінің үлгі арқылы оңтайлы нүктеде өтуіне мүмкіндік береді.
  11. Микроскоптар «парфокальды»; егер сурет төмен қуатта фокуста болса, ол жоғары қуатта фокуста дерлік болады. Үлгіні жоғарырақ үлкейтуде көру үшін алдымен төмен қуатқа назар аударыңыз, содан кейін нысанды көру өрісінің ортасына қойып, жоғары құрғақ қуат нысаны орнына түскенше мұрындықты бұраңыз. ТЕК ЖАҚСЫ РЕТТЕУ ТҰТҚАСЫНА аздап назар аудару керек. Жарық реттеуін келесі ең жоғары санға бұрып, диафрагманы сәйкесінше реттеу қажет болуы мүмкін.
  12. Ешқашан жоғары құрғақ қуат мақсатымен өрескел реттеу тұтқасын қолданбаңыз. Қалың жамылғылары бар сырғытпаларды немесе қалың препараттарды пайдаланған кезде, төмен қуаттағы объективтің күйіне қараңыз және мұрын бөлігін жоғары қуатқа бұрғаныңызды бақылаңыз. ЕШҚАШАН жоғары қуатты орнына мәжбүрлемеңіз.
  13. 100x мақсаты тек МАЙЛАУҒА арналған. Сізге бұл туралы егжей-тегжейлі нұсқау беріледі. Қысқаша айтқанда, үлгіңіз жоғары құрғақ қуатқа назар аударған кезде, 100x объективті слайдқа қарай жылжытыңыз, бірақ толық орнында емес. Батыру майының бір тамшысын тікелей қарап жатқан слайдтың аймағына салыңыз, содан кейін 100x объективін орнына басыңыз. Кескінді нақтылау үшін мұқият фокусты пайдаланыңыз. Объектив майға батырылады. Бұл әдіс микроскоп мүмкіндік беретін ең жоғары үлкейтуде (1000x) жақсартылған ажыратымдылық үшін үлгі арқылы максималды жарық сәулелерін фокустауға мүмкіндік береді. ЕШҚАШАН БАСҚА ОБЪЕЗЗАДА МАЙДЫ ПАЙДАЛАНБАҢЫЗ ЖӘНЕ 100X ОБЪЕКЗІЗІН МАЙСЫЗ ПАЙДАЛАНБАҢЫЗ. 40x объективін май арқылы сүйреп алмау үшін өте сақ болыңыз. Майға батыруды қолданғаннан кейін әрқашан барлық линзаларды тазалаңыз. Атап айтқанда, 40x майдың бар-жоғын тексеріңіз, және 100x толығымен тазалаңыз.
  14. Микроскопты қояр алдында: барлық слайдтарды алып тастаңыз, сахнаны тазалаңыз, төмен қуатты объективті орнына қойыңыз, сахнаны объективтерден максималды қашықтыққа жылжытыңыз, қосқыштағы жарықты өшіріңіз және микроскопты ашасынан ажыратыңыз – ЕШҚАШАН сымды тартыңыз. Май қолданылған болса, кез келген майды линза тазалағышпен және линза қағазымен алып тастаңыз. Шнурды сым ұстағышының айналасына ақырын ораңыз немесе велкро баумен ораңыз.

НҰСҚАУШЫҢЫЗ МИКРОСКОПЫҢЫЗДЫ ТЕКСЕРУІ КЕРЕК.

Қақпақты орнына салып, микроскопты тиісті шкафқа және нөмірленген кеңістікке, окулярды ішіне қаратып қайтарыңыз.

Ескерту

Бүгінгі сабақтың мақсаты микроскопты қолдануды үйрену. Үлгілерді сәтті табуға және оларға назар аударуға шоғырлану; микроскоптың құрамдас бөліктерін пайдалану (диафрагмаларды ашу және жабу, конденсаторды жоғары және төмен реттеу, қараңғы өріс пен фазалық контраст, мақсаттар арасында жылжыту және т.б.) өзіңізді жайлы және сенімді сезіну үшін. Бүгін бәрін көріп, сурет салудың қажеті жоқ. Микроскоппен және оның мүмкіндіктерімен танысу үшін дымқыл монтажды және әртүрлі дайындалған слайдтарды дайындаңыз және бақылаңыз. Келесі зертханада ағзаларға назар аударуға қосымша уақытыңыз болады.

Тірі материал - Ылғалды орнату және ілулі слайдтар

Тікелей аралас протист сауалнамасын дымқыл аспа және ілулі слайд арқылы бақылаңыз. Микроскоппен жабдықталған болса, үлгіні Bright Field, Phase Contrast және Dark Field арқылы қараңыз. Өлшемдерді алыңыз. Не байқағаныңызды сызыңыз.

Ылғал қондырғы:

  1. Бір тамшы үлгіні тазартылған слайдқа салыңыз. Ағзалардың қозғалысын бәсеңдетуді қаласаңыз, бір тамшы Detain қосыңыз.
  2. Жарық өріс, күңгірт өріс және фазалық контрастпен микроскоппен (төмен және жоғары қуатты) бақылаңыз. Кейбір бақылауларыңызды сызыңыз.

Аспалы тамшы:

  1. 4 кішкене вазелин тамшысын қаптаманың бұрыштарына салыңыз. Бір тамшы үлгіні қабықшаның ортасына салыңыз. Ағзалардың қозғалысын бәсеңдетуді қаласаңыз, бір тамшы Detain қосыңыз.
  2. Сынаманың тамшысы слайдтағы ұңғыманың үстіндегі қабықшадан төмен салбырап тұратындай етіп жабындыны ойпат слайдының үстіне төңкеріңіз.
  3. Жарық өріс, күңгірт өріс және фазалық контрастпен микроскоппен (төмен және жоғары қуатты) бақылаңыз. Кейбір бақылауларыңызды сызыңыз.

Дайындалған слайдтар

Дайындалған слайдтардың бірнешеуін қараңыз (тек Bright Field пайдаланыңыз). Бақылаңыз және сызыңыз.

Нәтижелер

  1. Көз микрометрі

Мақсат

Көз микрометріндегі әрбір бос орынның мәні (мм)

10x

20x

40x

100x

  1. Төменде өз бақылауларыңызды сызыңыз. Әрқайсысын жалпы үлкейтумен белгілеңіз; мүмкіндігінше әрқайсысының өлшемін алыңыз.

3.4: Материалдар мен процедуралар – Биология

*v B , `s ]!j $M HK00 M @ B s endstream endobj 2432 0 obj >/Metadata 94 0 R/PageLayout/ OneColumn/Pages 2424 0 R/StructTreeRoot 119 0 R/Type/Catalog>> endobj 2433 0 obj >/ExtGState >/Font >/XObject >>>/Rotate 0/StructParents 0/Typej/Page >>4 obj >4 соңы ағын hΜUmk 0 + Q: X e( ī׎ 9m % DK ' *

â v m / uTH P F % ?q ?9 q ɋ>ƿ 0 endstream endobj 14 0 obj >ағын H ͊ 0 O1 P DXl u 6 C


Ферментативті белсенділіктің оңтайлы шарттарын анықтау

Әдебиеттерде көптеген ферменттік талдаулар сипатталғанымен, бұл процедураларды зерттелетін ферменттің бірегей талаптарына сәйкес өзгерту қажет. Ферменттің ерекше белсенділігі көптеген факторларға байланысты, соның ішінде рН, температура, иондық күш және талдаудағы барлық компоненттердің концентрациясы. РН сияқты жағдайлар үшін фермент белсенділігі жиі қоңырау қисығына ұқсайды. Белгілі бір рН кезінде ең жоғары белсенділік V ретінде хабарланадымакс, белсенділіктің төмендеуі қисық сызықтың екі жағында да байқалады. Кейбір ферменттер металл иондары, жуғыш заттар және гидрофобты молекулалар сияқты реакцияға тікелей қатыспайтын қосылыстар үшін қосымша ойларды қажет етуі мүмкін.


Өсімдік ұлпаларын өсіруде қолданылатын әдістер (сызбамен)

Төменде аталған мақалада өсімдік ұлпаларын өсіруде қолданылатын әдістердің контуры берілген.

Әдістердің кейбірі: (1) Мәдениет ортасын дайындау (2) Стерилизация процедурасы (3) Асептикалық өсімдіктерді дайындау (4) Асептикалық әдістер және (5) Дақылды инкубациялау.

Өсімдік жасушаларын, ұлпаларын және мүшелерді өсіру үшін in vitro бірнеше әдістемелер қабылданған. Олардың кейбіреулері барлық эксперименттерде негізінен орындалатын жалпы әдістер бар.

Жалпы техникаniques:

Қоректік ортаны дайындау, зарарсыздандыру, асептикалық манипуляция, культураны күту жалпы әдістемелер болып табылады.

Техника №1. Мәдениет ортасын дайындау:

Өсімдік жасушалары, тіндері мен мүшелері in vivo олардың ұйымдасқан өсуі мен дамуы үшін зақымдалмаған өсімдік денесінен тиісті қоректік заттар мен өсу қажеттіліктерін алады. Оқшауланған жасуша, ұлпалар мен мүшелер де in vitro өсуі мен дамуы үшін қоректік заттарды қажет етеді. Сонымен, қоректік заттар бірнеше жұмысшылар құрастырған ортаға сәйкес жасанды түрде беріледі. Ортаны дайындаудың негізгі мақсаты жасушаны, ұлпаны және мүшені in vitro жағдайында өсіру болып табылады.

Тасымалдаушыны мұқият дайындау керек және келесі процедураны орындау ұсынылады.

1 литр MS ортасын жасау үшін:

(i) 200 мл DDH құрамында 30 г қамыс қантын ерітіңіз2O. 1-2 г белсендірілген көмірді араластырыңыз және сүзгі қағазы арқылы сүзгіден өткізіңіз, шағын бүйір тұтқасы бар арнайы конустық колбаға орнатылған Бюхнер воронкасының ішіне орнатылған. Сүзу сорғышты қолдану арқылы жүзеге асырылады.

(ii) DDH алыңыз2О басқа колбаға құйып, ерітіндінің сәйкес мөлшерін келесідей ретпен қосыңыз:

Ауксиннің және/немесе цитокининнің қажетті концентрациялары мына формула бойынша қор ерітіндісінен қосылады:

Қажетті концентрация/Қордың концентрациясы

= бір литрлік орта үшін алынатын ерітіндінің мөлшері (мл).

Егер ортаның мөлшері бір литрден аз болса, онда гормондар басқа формула бойынша қосылады -

Қажетті концентрация X Ортаның көлемі/Қор концентрациясы X1, 000

= қосылатын ерітіндінің мөлшері (мл).

(iii) Сүзілген сахароза ерітіндісін және тұзды, витаминдерді, амин қышқылын, гормон ерітінділерінің қоспасын бір литрлік өлшеуіш цилиндрге құйыңыз. DDH көмегімен соңғы көлемді бір литрге дейін жеткізіңіз2O. Біркелкі араластыру үшін жақсылап шайқаңыз.

(iv) 0,1(N) HCl немесе 0,1(N) NaOH көмегімен сұйық ортаның рН 5,6-5,8 реттеңіз. Бұл операция рН өлшегіш көмегімен орындалады.

(v) Қатты орта жасау үшін сұйық ортаға 5%-8% агар қосыңыз. Агарды толығымен еріту үшін 60°C дейін қыздырыңыз. Әйтпесе, агар қоспай, культура үшін сұйық ортаны қолдануға болады.

(vi) Қоректік ортаны қоректік түтікке (20 мл/түтік) немесе кең ауызды конустық колбаға (25-40 мл/колба) құйыңыз. Өлшемді шүберекпен оралған сіңірмейтін мақта тығынын салыңыз. Штепсельді қоңыр қағаз және резеңке таспа көмегімен жабыңыз.

(vii) Қоршаған орта автоклавтау арқылы ақырында зарарсыздандырылады.

Техника № 2. Стерилизация процедурасы:

Қоректік орта, әсіресе оның құрамында қант болса, бактериялар, саңырауқұлақтар және т.б. сияқты микроорганизмдердің өсуін де қолдайды. Сондықтан олар ортамен жасушалық немесе спора түрінде байланыста болса, микроорганизмдер микроорганизмдерге қарағанда тезірек өседі. олардың қысқа өмірлік цикліне байланысты жоғары өсімдік ұлпасы және ұлпаны өлтіреді. Микроорганизмдер шыны құтылардан, аспаптардан, культура үшін пайдаланылатын қоректік ортадан және тіпті өсімдік материалының өзінен де болуы мүмкін. Сондықтан өсімдік тінінің беті және барлық тірі емес заттар, соның ішінде қоректік орта зарарсыздандырылуы керек.

(i) Тірі емес бұйымдарды зарарсыздандыру:

Қоректік орта, шыны бұйымдар, тазартылған су, аспаптар (қоңыр қағазбен оралған) сияқты тірі емес заттарды әдеттегі зарарсыздандыру процедурасы бумен 15 фунт/2 қысымда және 120°C температурада 15 градусқа автоклавтау арқылы жүзеге асырылады. минут.

Термолабильді қосылыстар көбінесе ортаға қосылады және мұндай орта бөлме температурасында немесе суықта бактериалды сүзгіден өту арқылы зарарсыздандырылады.

Шыны бұйымдар мен аспаптарды зарарсыздандырудың баламалы әдісі пеште 150°C температурада 3-4 сағат бойы қыздыру болып табылады.

Бұрандалы қақпағы бар шыны флакондарды автоклавтау кезінде газдар жарылу қаупінсіз кеңеюі үшін қақпақтардың тым тығыз жабылмауын қадағалау керек екенін ескеру қажет.

(ii) Өсімдік материалын зарарсыздандыру:

Өсіруге жататын өсімдік материалы беткі микроорганизмдерді жою үшін бетін зарарсыздандыру керек. Бұл процедура өсімдік материалы қоректік ортаға егілгенге дейін ламинарлы ауа ағынының алдында немесе егу камерасының ішінде жасалады (1.10-сурет).

(1) Мұқият жуылған өсімдік материалы немесе ағынды суға құйылған өсімдік ‘Teepol’ сияқты сұйық жуғыш заттың 5% к/т ерітіндісіне 10-15 минутқа батырылады. Содан кейін материалды ағынды суда және ең соңында тазартылған суда мұқият жуыңыз. Бұл қадамды жалпы зертханада жасауға болады. Келесі қадамдар ламинарлы ауа ағынының немесе алдын ала зарарсыздандырылған егу камерасының алдында орындалады.

(2) Экспланттарды 70% этил спиртіне 60 секундқа батырыңыз.

(3) Материалды дереу автоклавталған бөтелкеге ​​салып, 0,1% сынап хлориді (HgCl) құйыңыз.2) 5-10% натрий гипохлориті (көлем/көлем) ерітіндісі. Оларды 10-15 минут ұстаңыз. Бұл кезеңде өсімдік материалының барлық беттері зарарсыздандырғышпен бірдей жанасуы үшін бөтелкені шайқау үшін жиі айналдырады.

(4) 10-15 минуттан кейін зарарсыздандырғышты декантациялаңыз және стерильдеудің барлық іздерін кетіру үшін экспланттарды автоклавталған тазартылған суды бірнеше рет ауыстырып мұқият жуыңыз.

(5) Содан кейін экспланттарды өсіруге дайын болады.

Техника № 3. Асептикалық өсімдіктерді дайындау:

Өсімдік ұлпасының беткі стерилизациясы кейбір зиянды әсер етуі мүмкін, өйткені зарарсыздандырғыштардың көпшілігі улы химикаттар болып табылады. Тұқымдар оның тұқым қабығының болуына байланысты мұндай зиянды әсерге азды-көпті төтеп бере алады. Өсімдік ұлпасының беткі стерилизациясын болдырмау үшін тұқымдар бетін зарарсыздандырады және қарапайым қоректік ортада өсіріледі.

Мәдениеттегі тұқымдар өніп, асептикалық көшет береді. Асептикалық және бақыланатын жағдайларда өсірілген осындай көшеттерден алынған экспланттарды өсіру үшін ең қолайлы материал болып табылады және одан әрі бетті зарарсыздандыруды қажет етпейді.

(1) Құрғақ тұқымдарды ағынды сумен мұқият жуыңыз (Cурет 1.11).

(2) Тұқымдарды 5% Teepol ерітіндісіне (көлем/көлем) 10-15 минутқа батырыңыз. Teepol ерітіндісін құйып, тұқымдарды қайтадан ағынды сумен, ең соңында тазартылған сумен жуыңыз.

(3) Тұқымдарды 70% этил спиртімен 1 минут бойы шайыңыз.

(4) Ламинарлық ауа ағынының алдында тұқымдарды автоклавталған бөтелкеге ​​салып, 0,1% HgCl құйыңыз.2 ерітінді (салм/көлем) тұқымдар суға батырылады. 10-15 минутқа қалдырыңыз. Бөтелкені жиі араластырыңыз.

(5) Зарарсыздандырғышты төгіп, 3-4 рет автоклавталған тазартылған сумен жуыңыз.

(6) Тұқымдарды стерильді қысқыштың көмегімен бөтелкеден автоклавтағы петридиске ауыстырыңыз.

(7) Базальды қоректік ортасы бар культура құтысының жабынын ашыңыз. Культура құтысының мойнын жағып, ортаға бірнеше тұқымдарды кезекпен жіберіңіз. Жабуды ауыстырыңыз.

(8) Тұқымдарды бөлме температурасында немесе 25-28°C температурада үздіксіз қараңғы жерде инкубациялаңыз.

Техника № 4. Асептикалық әдістер:

Стерильденген құралдарды пайдалана отырып, қоректік ортаға (егу) беткі стерильденген экспланттарды тасымалдау кезінде қандай да бір микроорганизмдердің енуіне жол бермеу үшін сақтық шараларын қолдану қажет. Осы себепті манипуляция мен тасымалдау ең дұрысы асептикалық жағдайда жүргізілуі керек. Беттік зарарсыздандырудан бастап егуге дейін барлық операциялар асептикалық түрде орындалуы керек.

Асептикалық техниканың типтік процедурасы төменде келтірілген:

(1) Инокуляцияға арналған барлық зарарсыздандырылған бұйымдарды (тасымалдағыштар, аспаптар, шыны бұйымдар, т.б.) егу камерасының шыны сөрелеріне қойыңыз. Немесе, ламинарлы ауа ағыны бар болса, барлық бұйымдарды ауа ағыны шкафының үстелінде сақтаңыз. Ламинарлық ауа ағыны жұмыс бетінің үстінен бактериясыз ауаны үрлейді.

(2) Жұмыстан бір сағат бұрын екпе камерасының ультракүлгін шамдарының қосқышын қосыңыз. Ламинарлық ауа ағыны кезінде қуат қосқышы қосылады және ауа ағыны жұмыс алдында кемінде 15 минут бойы ауаны үрлеуге мүмкіндік береді.

(3) Егу камерасына кірмес бұрын ультракүлгін шамды өшіріңіз. Ламинарлық ауа ағынын тоқтатпаңыз. Егу камерасының жұмыс істейтін шыны үстел үсті немесе ламинарлы ауа ағынының үстелі жұмысқа кіріспес бұрын спиртпен сүртіледі.

(4) Таза алжапқыш киіңіз және маска қолданыңыз. Қолды спиртпен тазалап, құрғатыңыз.

(5) Алкогольді таза муфтаға құйып, оған барлық құралдарды батырыңыз. Рух шамын жағыңыз. Стерильденген немесе асептикалық өсімдік материалының бетін зарарсыздандырылған петри табақшасына алыңыз.

(6) Культуралық түтіктің немесе колбаның мойнын жалынмен жағып, шыны құтылардың тығынын кезекпен шығарып алыңыз. Тінді ортаға ауыстырып, жабуды ауыстырыңыз. Әр жолы аспаптар рух шамының жалынынан өтеді.

(1) Әрқашан спиртке малынған қолды спирт шамынан аулақ ұстаңыз. Сондықтан алдымен алкогольді құрғатыңыз.

(2) УК сәулесінің әсері жабық камераның ішінде озон газының (улы) жоғары концентрациясын тудырады. Сондықтан камераға ультракүлгін шамды өшіргеннен кейін 15-30 минуттан кейін ғана кіру пайдалы.

(3) Ыстық құралдарды спиртке батырмаңыз және өсімдік материалын кесу немесе ұстау үшін ыстық құралды пайдаланбаңыз.

(4) Мұқият жұмыс істеп, орта мен өсімдік тіндерінің өсімдік материалы үшін ашық болуын қамтамасыз етуге тырысыңыз.

(5) Шыны құтылардың мойнын шамадан тыс қыздырмаңыз.

Техника № 5. Мәдениетті инкубациялау:

Жоғары температура қоректік ортаның диссоциациясына және тіндердің зақымдалуына әкелуі мүмкін, ал өте төмен температурада тіндердің өсуі баяу. Тағы да кейбір ұлпалар қараңғыда жақсы өседі, ал басқалары жарық пен қараңғы жағдайларды қажет етеді. Төмен ылғалдылық қоректік ортаның тез құрғауын тудырады, ал жоғары ылғалдылық қоректік ортаның ластануына қолайлы. Сондықтан дақылдар жарық, температура және ылғалдылық бақыланатын мәдениет бөлмесінде инкубацияланады.

(1) Тіндік ортаға егілгеннен кейін дақылдар 25-28°C тұрақты температурада культуралық сөреде инкубацияланады.

(2) Культура түтіктері 30-45° көлбеу күйде орналастырылады. Ол үшін ұзын ағаш таяқшаны немесе флуоресцентті лампаның бос қағаз қақпағын культуралық сөренің ортасына қойып, культура түтігінің тығындалған ұшын тірекке төсейді.

(3) Жарықтандыру 16 сағат бойы 4 – 10 x 10 3 люкс жарық қарқындылығын беру үшін культурадан шамамен 18 дюйм жоғары орналастырылған салқын ақ флуоресцентті жарықпен қамтамасыз етіледі.

(4) Жарық қажет болмаса, шамды өшіріп, бүкіл сөрені қара шүберекпен жабыңыз.


Ашыту технологиясы: мәні, әдістемесі, түрлері және тәртібі

Ашыту технологиясын терең зерттеп көрейік. Осы мақаланы оқығаннан кейін сіз 1 туралы білесіз. Ашыту технологиясының мағынасы 2. Ашыту әдістемесі 3. Ашыту процестерінің түрлері 4. Ашыту процедурасы және 5. Ашыту технологиясының категориялары.

Ашыту технологиясының мағынасы:

Ашыту – организмдердің өсу, даму және өсу, көбею, тіпті қартаю және өлу кезіндегі биохимиялық белсенділігін қамтитын процесс. Ашыту технологиясы - бұл организмдерді тамақ өнімдерін, фармацевтикалық өнімдерді және алкогольдік сусындарды ірі өнеркәсіптік негізде өндіру үшін пайдалану.

Өнеркәсіптік ашыту технологиясының негізгі принципі организмдерді көміртегі, азот, тұздар, микроэлементтер және витаминдер сияқты барлық қажетті талаптарға жауап беретін шикізатпен қамтамасыз ету арқылы қолайлы жағдайларда өсіру болып табылады.

Тіршілік кезеңінде олардың метаб&шиолизмі нәтижесінде түзілген соңғы өнімдер адам пайдалануы үшін алынатын және жоғары коммерциялық құндылығы бар БАҚ-қа шығарылады. Шарап, сыра, сидр, сірке суы, этанол, ірімшік, гормондар, антибиотиктер, толық ақуыздар, ферменттер және басқа да пайдалы өнімдер кең ауқымды өнеркәсіптік негізде үнемді және ұтымды түрде өндірілетін ферменттеу технологиясының негізгі өнімдері болып табылады.

Ашыту әдісі:

Ашыту процесі ферментатор немесе биореактор деп аталатын контейнерде жүзеге асырылады. Ферментатордың дизайны мен табиғаты жүргізілетін ашыту түріне байланысты өзгереді. Барлық ферментаторларда температура, қысым, рН, өткен ашыту уақыты, сұйықтық деңгейі, масса және т.

Ферментаторлардың әртүрлі түрлері:

(1) Сыртқы қайта өңдеуге арналған аэролифт ферментаторы — субстрат ретінде метанол қосылған бактериялық биомассаны өндіруге арналған.

(2) Ішкі қайта өңдеуге арналған аэролифт ферментаторы — субстрат ретінде майы бар ашытқыларды өндіруге арналған.

(3) Түтік тәрізді мұнара ферментаторы — сыра, шарап, сірке суын және т.б. жасау үшін қолданылады.

(4) Натан ферментаторы — сыра қайнату өнеркәсібінде қолданылады.

(5) Араластыратын ферментатор — антибиотиктер жасау үшін қолданылады.

Ашыту процестерінің түрлері:

Ашытудың үш түрлі процесі бар, мысалы:

(2) ақпан-партия ашыту және

Бұл термин қоректік орта, микроорганизмдер саны және өндірілген өнім мөлшері (яғни метаболит немесе мақсатты ақуыз) өзгеретін ашыту түріне жатады. Партиялық ашытуда микробтардың өсуінің алты фазасы байқалады.

Инокуляциядан кейін бірден микроб жасушаларының саны біршама уақыт бойы өспейді және бұл кезең лаг фазасы деп аталады. Бұл организмдер егілген жаңа ортаға бейімделуі үшін.

(б) Жеделдету кезеңі:

Жасушалар санының көбейе бастаған кезеңі жеделдету фазасы деп аталады.

Бұл жасуша санының тұрақты өсетін уақыты.

(d) Баяулау кезеңі:

Тұрақты өсу төмендеген кездегі ұзақтығы.

(е) Стационарлық кезең:

Микроб жасушасының саны өзгермейтін кезең стационарлық фаза болып табылады. Бұл фазаға көміртегі көзінің таусылуы немесе соңғы өнімдердің жиналуы нәтижесінде қол жеткізіледі.

Жасушалар саны тұрақты түрде азаятын кезең өлу кезеңі болып табылады. Бұл метаболикалық белсенділіктің тоқтатылуына және энергия ресурстарының азаюына байланысты жасушалардың өлуіне байланысты. Қажетті өнімге байланысты жасуша өсуінің әртүрлі фазалары сақталады. Микробтық масса үшін журнал фазасына артықшылық беріледі. Екіншілік метаболиттерді, яғни антибиотиктерді өндіру үшін стационарлық фазаға артықшылық беріледі.

Ақпан айындағы ашыту:

Ашытудың бұл түрінде жаңадан дайындалған қоректік орталар дақылдық сұйықтықты алмай, белгілі бір уақыт аралығында қосылады. Бұл ашыту мәдениетінің көлемін арттырады. Ашытудың бұл түрі рекомбинантты микроорганизмдерден белоктар алу үшін қолданылады.

Үздіксіз ашыту:

Ашытудың бұл түрінде өнімдер жасушалармен бірге үзіліссіз жойылады және сол сияқты жасуша шеңбері және жаңа қоректік орталарды қосу арқылы толықтырылады. Бұл ферментатордың мазмұнының тұрақты немесе тұрақты көлеміне әкеледі. Ашытудың бұл түрі бір жасушалы ақуызды (S.S.P), антибиотиктерді және органикалық еріткіштерді өндіру үшін қолданылады.

Ашыту процедурасы:

(a) Қажетті өнім түріне байланысты белгілі бір биореактор таңдалады.

(b) Сұйық ортадағы қолайлы субстрат белгілі бір температурада, рН деңгейінде қосылады, содан кейін сұйылтылады.

(c) Оған ағза (микроб, жануар/өсімдік жасушасы, жасуша асты органелласы немесе фермент) қосылады.

(d) Содан кейін ол белгіленген уақыт ішінде белгілі бір температурада инкубацияланады.

(e) Инкубация аэробты немесе анаэробты болуы мүмкін.

мен. Аэробты жағдайлар орта арқылы оттегінің көпіршіктері арқылы жасалады.

ii. Анаэробты жағдайлар жабық ыдыстарды қолдану арқылы жасалады, онда оттегі ортаға тарай алмайды және жоғарыда орналасқан оттегі бөлінген көмірқышқыл газымен ауыстырылады.

(f) Көрсетілген уақыт аралығынан кейін өнімдер жойылады, өйткені өнімдердің бір бөлігі өсіп келе жатқан жасуша үшін уытты немесе кем дегенде олардың өсуін тежейді. Организмдер қайта айналымға түседі. Өнімдерді жою процесі төменгі ағынды өңдеу деп аталады.

Құбырлы мұнара ферментаторын қолданатын партиялық ашыту технологиясының мысалы:

Ең қарапайым және жиі қолданылатын ашыту технологиясы - сүттен сүзбе дайындау.

Технологияның егжей-тегжейлері келесідей:

Ферментатор немесе биореактор:

Балшықтан жасалған қазан немесе болат пісіретін ыдыс немесе ыдыс немесе кесе

Арнайы температура:

Алдын ала дайындалған сүзбе (құрамында Lactobacillus cecai микробы бар)

Алдын ала дайындалған сүзбеде сүттегі лактозаны пайдаланатын микробтар бар. Лактоза глюкоза мен галактозаға гидролизденеді. Галактоза глюкозаға айналады. Глюкоза гликолитикалық жолмен сүт қышқылына дейін ыдырайды. Өндірілетін сүт қышқылы сүттің рН-ын 6,6-дан 4,5-ке дейін төмендетеді. Сүт протеині-казеиннің изоэлектрлік рН 4,5. Осы рН кезінде казеин тұнбаға түсіп, сүтте майда мицелла түзеді, осылайша оны ұйытады.

Сүт микробтардың өсуіне қажетті температураны ұстап тұру үшін ферментаторға қоспас бұрын жылытылады. Тұнба біркелкі болуы үшін контейнер/ферментор бұзылмайды (араластыру алынбайды).

Өткен уақыт, яғни сүзбе қалыптастыру үшін қажетті уақыт өте маңызды, ол атмосфералық температураға байланысты. Жазда сүзбе 4-6 сағатта түзілсе, жаңбырлы маусымда 6-8 сағат, ал қыста 8-12 сағатқа жуық уақыт кетеді. Процесс анаэробты, сондықтан ыдысты жабық ұстаған дұрыс. Ол ауа өткізбейтін болса да, майы бар сүттің беті сұйықтыққа ауаның енуіне жол бермейді, сонымен қатар метаболизденетін микробтар оттегіні бөлінген көмірқышқыл газымен ауыстырады.

Араластыратын ферментаторды пайдаланып үздіксіз ашыту технологиясының мысалы:

Тағы бір кең таралған fer­mentation технологиясы - тағамды қорыту процесі.

Технологияның егжей-тегжейлері келесідей:

Ферментатор немесе биореактор:

Арнайы температура:

Ферменттер, микробтар, қышқылдар және т.

Аэрация:

Біз жеген тағам асқазанда сақталады, онда HC1 және тағамды химусқа (жартылай қатты) айналдыратын кейбір ферменттер бөлінеді. Тамақ 37°С температурада 3-4 сағат сақталады.Қорытылған тағам қанға сіңіп, қорытылмаған тағам сыртқа шығарылады. Бұл үздіксіз ашыту, себебі субстрат (тағам) үздіксіз қосылады және өнімдер (сіңірілетін/қортылмаған материал) үздіксіз жойылады. Асқазан – ферментатор – бұл араластырғыш түрі, яғни асқазан-ішек жолдарының перистальтикалық қозғалысы тағамды араластырады.

Ашыту технологиясының категориялары:

Ашыту технологиясын төрт негізгі санатқа топтастыруға болады, мысалы.

1. Микробтық биомасса өндірісі:

Микробтық жасушалар (биомасса) кең ауқымда (1500/м 3) үздіксіз культура ретінде коммерциялық түрде өсіріледі. Балдырлар, бактериялар, ашытқылар, зеңдер мен саңырауқұлақтар мен шұңқырларды қамтитын микроб жасушалары кептіріліп, адам тағамы немесе жануарларға арналған жем ретінде қызмет ететін ‘бір жасушалық ақуыз (SCP)’ деп аталатын толық ақуыздың жақсы көзі ретінде пайдаланылады. ‘tandoori roti’ дайындау үшін бидай ұнын және ‘dosa’ үшін күріш ұнын инкубациялау бір жасушалы ақуызды өндірудің жақсы мысалдары болып табылады.

Бұл екі тағамда немесе қарапайым тағамда әдетте лизин мен метионин аминқышқылдары жетіспейді немесе жеткіліксіз. Әртүрлі көздерден өндірілген бір жасушалы ақуыз әртүрлі маңызды аминқышқылдарының бай көзі болып табылады, осылайша белгілі бір тағамда жетіспейтін амин қышқылын толықтырады. Азық-түліктерді инкубациялау микробтық биомассаның өсуіне әкеліп, SCP түзеді.

Кейбір микроорганизмдер шығаратын SCP лизинге бай, ал басқалары метионинге бай. Бір жасушалық ақуызды өндіретін микробтар қолданатын субстраттар көмірсулардан көмірсутектер мен мұнай-химия өнімдеріне дейін. Басқа организмдер ашыту үшін субстрат ретінде газдарды - метан, этан, пропан, n-бутан және т.б. пайдаланады.

Лизинге бай SCP (7 г лизин/16 г N) өндіретін организмдер Chlorella sorokiniana, Cellulomonas alkaligens, Saccharomyces cerevisiae т.

2. Микробтық метаболиттер:

Микроб жасушаларының метаболизмі кезінде көптеген қосылыстар түзіліп, олардың көпшілігі жасушадан шығарылады, олар оңай алынуы мүмкін және адам мен жануарларға өте пайдалы. Сондықтан әртүрлі метаболиттер алу үшін микроб жасушаларымен ашыту өнеркәсіптік ауқымда жүзеге асырылады.

Микробтар түзетін метаболиттерді екі категорияға топтастыруға болады:

(а) Бастапқы метабо-шилиттер және

(а) Бастапқы метаболиттер:

Микробтың минималды өмірлік процесінің негізгі және сақталуына қажетті зат алмасу нәтижесінде түзілетін метаболиттер бастапқы метаболиттер деп аталады. Бастапқы метаболиттер өсудің ерте сатысында көп мөлшерде өндіріледі. Бастапқы метаболиттердің мысалдары этанол, лимон, қышқыл, глутамин қышқылы, сүт қышқылы, сірке қышқылы, ацетон, құмырсқа қышқылы, бутанол, пропион қышқылы, дигидрокси-ацетон, глицерин және т.б. Бұл метаболиттер әртүрлі жағдайларда әртүрлі микробтарды қолдану арқылы ашыту технологиясы арқылы өндіріледі. ашыту.

(б) Екіншілік метаболиттер:

Екіншілік метаболиттер - бұл микробтардың өмірлік маңызды процесі үшін қажетті метаболизммен тікелей түзілмейтін, оның орнына кейбір арнайы метаболизм процесі арқылы түзілетін метаболиттер. Алайда қайталама метаболиттердің көпшілігі бастапқы метаболиттерден алынады. Екіншілік метаболиттерге антибиотиктер, алкалоидтар, улы пигменттер, витаминдер және т.б.

Антибиотик - бұл микроорганизмнің өсуін тежейтін немесе басқа микроорганизмдерді толығымен жоя алатын зат. Антибиотиктерді микроорганизм бір ген арқылы синтездемейді, оның орнына антибиотик синтезіне 10-20 геннің жиынтығы қатысады. Антибиотик гендері негізінен плазмидада орналасады, бірақ кейбір микробтарда олар хромосомалық ДНҚ-да кездеседі.

Осы уақытқа дейін 45000-ға жуық әртүрлі антибиотиктер табылды, бірақ тек 100-ге жуығы ғана адамды емдеу үшін қолданылады, өйткені тек микробқа улы, бірақ адам үшін улы емес антибиотиктерді ғана қолдануға болады.

Кейбір антибиотиктер мен оларды тудыратын микробтар:

Амфотерицин-В — Streptomyces nodosus Chloramphenicol — Streptomyces venezuelae, Эритромицин — С. eythirus, Gentamycin — Micromonospora purpurea, Gramicidin — Bacillus brevis, пенициллин — пенициллин хриозоген Стрептомицин — С. гриз, тетрациклин — С. ауреофациндер.

Бұл микробтар қажетті антибиотикті алу үшін қолайлы ашыту жағдайында өсіріледі. Антибиотиктерді өнеркәсіптік өндіру үшін мутант микробтар қолданылады.

When microbes are cultured, they secrete some enzymes into the media and these enzymes are extracted and widely used in several industries like detergent, food processing, brewing and pharmaceutical. They are also used for diagnostic, scientific and analytical purposes. Biotechnological methods are used to engineer microbial cells so as to induce them to produce enzymes like renin by E. coli and amylases by Bacillus stearothermophillis.

These enzymes are generally bound to matrix or in some manner retained in the reactor to be reused and hence these are called immobilized enzymes. In some cases the microorganism producing enzyme is immobilized. Some of the enzymes produced by fermenting mi­crobes are—Glucose oxidase, protease glucoamylase, amylase, glucose isomerase, rennin, pectinase, superox­ide dismutase, cellulase, invertase, lactase and lipase.

Some thermophile bacteria produce enzymes that are thermo-stable and which can be used in indus­trial processes at high temperatures, ex. glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, phosphofructo-kinase, alcohol dehydrogenase, superoxide dismutase and restriction endonucleases, which are produced by Bacillus stearothermophillis thermoysia. Further, genes for thermophilic enzymes are introduced into E. coli, which is cultured for producing the thermophilic enzymes.

4. Bioconversion, biotransformation or modification of the substrate:

The fermenting microbes have got the capacity to convert an added substrate into some more valuable product, ex. conversion of ethanol to acetic acid (vinegar), isopropanol to acetone, glucose to gluconic acid, sorbitol to sorbose (this is used in the manufacture of vitamin C), sterols to steroids.

Among all these bioconversions, the production of steroids is the most widely applied fermentation biotechnology for the conversion of sterols into steroids, like cortisone, hydroxycortisone, prednisone, dexamethasone, testosterone, estradiol etc. Hitherto, steroids were produced by chemical methods, which were laborious and costly.

For instance the chemical synthesis of cortisone required 37 steps under extreme conditions. One of the steps is introduction of oxygen at position 11 in the steroid nucleus. The microbe Rhizopus arrhizus being capable of hydroxylating progesterone (a steroid) at position 11 is used in the fermentation to produce progesterone an intermediate in the synthesis of cortisone. Thus, this reduced the chemical synthesis steps from 37 to 11 and all under normal conditions, thereby making it economical and easy. Steroids are used as anti-inflammatory agents, contraceptives, treating hormonal insufficiency, allergy, skin diseases etc.

Downstream processing (DSP):

The method by which the products of fermentation are recovered and separated is known as downstream processing. This forms the major (about 85%) portion of the complete fermentation technology. There are various methods by which DSP is carried out.


How to Study for Biology

This article was co-authored by Meredith Juncker, PhD. Meredith Juncker is a PhD candidate in Biochemistry and Molecular Biology at Louisiana State University Health Sciences Center. Her studies are focused on proteins and neurodegenerative diseases.

There are 7 references cited in this article, which can be found at the bottom of the page.

wikiHow мақала жеткілікті оң пікір алғаннан кейін оны оқырман мақұлдаған деп белгілейді. This article received 37 testimonials and 88% of readers who voted found it helpful, earning it our reader-approved status.

This article has been viewed 359,824 times.

Although biology is a mandatory class, it doesn't have to be a painful one to study for and get through. It is a subject that builds upon itself, so it's essential to understand the basic concepts before you can understand the more complex ones. Learning the vocabulary associated with biology and staying on top of the material are the best ways to improve your comprehension of biology and be ready for every exam.


Кіріспе

Viewed from space, Earth (Figure 1.1) offers few clues about the diversity of life forms that reside there. The first forms of life on Earth are thought to have been microorganisms that existed for billions of years before plants and animals appeared. The mammals, birds, and flowers so familiar to us are all relatively recent, originating 130 to 200 million years ago. Humans have inhabited this planet for only the last 2.5 million years, and only in the last 300,000 years have humans started looking like we do today.

As an Amazon Associate we earn from qualifying purchases.

Want to cite, share, or modify this book? This book is Creative Commons Attribution License 4.0 and you must attribute OpenStax.

    If you are redistributing all or part of this book in a print format, then you must include on every physical page the following attribution:

  • Use the information below to generate a citation. We recommend using a citation tool such as this one.
    • Authors: Samantha Fowler, Rebecca Roush, James Wise
    • Publisher/website: OpenStax
    • Book title: Concepts of Biology
    • Publication date: Apr 25, 2013
    • Location: Houston, Texas
    • Book URL: https://openstax.org/books/concepts-biology/pages/1-introduction
    • Section URL: https://openstax.org/books/concepts-biology/pages/1-introduction

    © Jan 12, 2021 OpenStax. Textbook content produced by OpenStax is licensed under a Creative Commons Attribution License 4.0 license. The OpenStax name, OpenStax logo, OpenStax book covers, OpenStax CNX name, and OpenStax CNX logo are not subject to the Creative Commons license and may not be reproduced without the prior and express written consent of Rice University.


    Бейнені қараңыз: . Проверка правописания (Шілде 2022).


Пікірлер:

  1. Abdi

    An aspiring radio operator got the SOS signal wrong ... If you find four balls and two dicks in your house - don't flatter yourself, you just get fucked in the ass. ... Programmers don't die ... they lose their memory ... Acceleration: what our fathers can do, we don't give a damn. the forest was smoked ...

  2. Mervin

    Кешіріңіз, мен бұл туралы ойладым және бұл фразаны жойдым

  3. Faular

    Great, this is a very valuable opinion.

  4. Warley

    сіздің сөйлеміңіз, жай ғана сүйкімділік



Хабарлама жазыңыз