Ақпарат

15.23С: Гонорея – Биология

15.23С: Гонорея – Биология


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Гонорея (сонымен қатар ауызекі тілде шапалақтау деп те аталады) - Neisseria gonorrhoeae бактериясы тудыратын адамға жыныстық жолмен берілетін кең таралған инфекция.

үйрену мақсаттары

  • Гонореяға сипаттама беріңіз

Негізгі нүктелер

  • Ерлердегі гонореяның әдеттегі белгілері зәр шығару және пенистанның бөлінуімен жану болып табылады.
  • Гонореямен ауыратын әйелдер, керісінше, жарты уақыт симптомсыз немесе қынаптан бөліну мен жамбас ауруы бар.
  • Егер гонорея емделмеген болса, ол эпидидимит немесе жамбас қабыну ауруын тудыратын жергілікті немесе бүкіл денеге таралып, буындар мен жүрек қақпақшаларына әсер етуі мүмкін. Емдеу әдетте цефтриаксонмен жүргізіледі, өйткені бұрын қолданылған көптеген дәрілерге антибиотиктерге төзімділік дамыған.

Негізгі шарттар

  • цефтриаксон: Гонореяны емдеу үшін қолданылатын синтетикалық цефалоспориндік антибиотик.

Гонорея (сонымен қатар ауызекі тілде шапалақтау деп те аталады) - адамның жыныстық жолмен берілетін кең таралған инфекциясы. Еркектердегі әдеттегі симптомдар - зәр шығару және пенистанның бөлінуімен жану. Әйелдер, керісінше, жарты уақыт симптомсыз немесе вагинальды разряд пен жамбас ауруы бар. Ерлерде де, әйелдерде де гонорея емделмеген болса, ол эпидидимит немесе жамбас қабыну ауруын тудыратын жергілікті немесе бүкіл денеге таралып, буындар мен жүрек қақпақшаларына әсер етуі мүмкін. Емдеу әдетте цефтриаксонмен жүргізіледі, өйткені бұрын қолданылған көптеген дәрілерге антибиотиктерге төзімділік дамыған. 2011 жылы цефтриаксонға төзімділік көрсететін гонореяның кейбір штаммдары туралы хабарламалар болды. Гонореямен ауыратын әйелдердің жартысы симптомсыз, ал басқаларында вагинальды разряд, іштің төменгі бөлігі немесе жыныстық қатынас кезінде ауырсыну бар.

Ерлердің жиі кездесетін белгілері - зәр шығарумен және пенистен ағып кетумен жанумен байланысты уретрит. Кез келген жыныс жұқтырған серіктеске, әдетте, ер серіктеске ауызша жыныстық қатынас жасау арқылы жұлдыру гонореясын алуы мүмкін. Мұндай инфекция 90% жағдайда симптомсыз өтеді, ал қалған 10% жағдайда тамақ ауруы пайда болады. Инкубациялық кезең 2-ден 14 күнге дейін, бұл белгілердің көпшілігі жұқтырғаннан кейін 4-6 күн аралығында болады. Сирек жағдайларда гонорея қан арқылы өткеннен кейін терінің зақымдануын және буын инфекциясын (буындардағы ауырсыну мен ісіну) тудыруы мүмкін. Өте сирек эндокардит тудыратын жүрекке немесе менингит тудыратын омыртқа бағанасына түсуі мүмкін (бірақ иммундық жүйесі төмендеген адамдарда жиі кездеседі).

СЕБЕП

Гонореяны Neisseria gonorrhoeae бактериясы тудырады. Инфекция бір адамнан екінші адамға вагинальды, ауызша немесе анальды жыныстық қатынас арқылы беріледі. Ер адамдарда жұқтырған әйелмен бір рет жыныстық қатынаста болған кезде инфекцияны жұқтыру қаупі 20% құрайды. Ерлермен жыныстық қатынасқа түсетін ер адамдар үшін қауіп жоғары. Әйелдерде жұқтырған ер адаммен бір рет жыныстық қатынас кезінде инфекцияны жұқтыру қаупі 60-80% құрайды. Анасы босану кезінде жаңа туған нәрестеге гонореяны беруі мүмкін; нәрестенің көзіне әсер еткенде, ол офтальмиялық неонаторум деп аталады. Оны дәретхана немесе ванна бөлмелері арқылы таратуға болмайды.


Гонорея - CDC ақпарат парағы (толық нұсқасы)

Толық ақпарат парақтары жыныстық жолмен берілетін аурулар туралы нақты сұрақтары бар адамдарға арналған. Оқырман тақырыпты тереңірек зерттей алатындай егжей-тегжейлі ақпарат парақтары арнайы сынақтар мен емдеу ұсыныстарын, сондай-ақ дәйексөздерді қамтиды.

Гонорея дегеніміз не?

Гонорея – жыныстық жолмен берілетін ауру (ЖЖБИ). Neisseria gonorrhoeae бактерия. N. gonorrhoeae ұрпақты болу жолдарының шырышты қабығын, соның ішінде әйелдерде жатыр мойнын, жатырды және жатыр түтіктерін, әйелдер мен ерлерде уретраны зақымдайды. N. gonorrhoeae ауыздың, тамақтың, көздің және тік ішектің шырышты қабығын да жұқтыруы мүмкін.

Гонорея қаншалықты жиі кездеседі?

Гонорея - өте таралған жұқпалы ауру. CDC 2018 жылы Америка Құрама Штаттарында шамамен 1,6 миллион жаңа гонококк инфекциясы орын алғанын және жартысынан көбі 15-24 жас аралығындағы жастар арасында кездеседі деп есептейді. 1 Гонорея Америка Құрама Штаттарында екінші ең жиі тіркелген бактериялық жыныстық жолмен берілетін инфекция болып табылады. 2 Дегенмен, көптеген инфекциялар симптомсыз болып табылады, сондықтан хабарланған жағдайлар нақты ауыртпалықтың бір бөлігін ғана алады.

Адамдар гонореяны қалай алады?

Гонорея инфекция жұқтырған серіктестің жыныс мүшесімен, қынапшасымен, аузымен немесе анусымен жыныстық қатынас арқылы беріледі. Гонореяның берілуі немесе пайда болуы үшін эякуляцияның болуы міндетті емес. Гонорея босану кезінде анадан балаға перинатальды жолмен де таралуы мүмкін.

Гонореямен ауырған және ем қабылдаған адамдар гонореяны жұқтырған адаммен жыныстық қатынаста болса, қайта жұқтыруы мүмкін.

Гонореяға кім қауіп төндіреді?

Кез келген жыныстық белсенді адам гонореяны жұқтыруы мүмкін. Америка Құрама Штаттарында инфекцияның ең жоғары деңгейі жыныстық белсенді жасөспірімдер, жас ересектер және афроамерикалықтар арасында тіркелді 2 .

Гонореяның белгілері мен белгілері қандай?

Гонореямен ауыратын көптеген ер адамдар симптомсыз 3, 4. Ерлердегі уретриялық инфекцияның белгілері мен симптомдары болған кезде дизурия немесе ақ, ​​сары немесе жасыл уретрадан бөліну, әдетте инфекциядан кейін бір-он төрт күннен кейін пайда болады 5 . Уретральды инфекция эпидидимитпен асқынған жағдайларда, гонореямен ауыратын ерлер тестикулярлық немесе скротальды ауырсынуға шағымдана алады.

Гонореямен ауыратын әйелдердің көпшілігі симптомсыз 6, 7 . Әйелде симптомдар болған кезде де, олар жиі жеңіл және спецификалық емес, олар қуық немесе қынап инфекциясы деп қателеседі 8, 9 . Әйелдердегі бастапқы белгілер мен белгілерге дизурия, вагинальды разрядтың жоғарылауы немесе етеккір арасындағы қынаптан қан кету жатады. Гонореямен ауыратын әйелдерде симптомдардың болуына немесе ауырлығына қарамастан инфекциядан ауыр асқынулардың даму қаупі бар.

Ерлерде де, әйелдерде де тік ішек инфекциясының белгілері ағуды, анальды қышуды, ауырсынуды, қан кетуді немесе іштің ауырсынуын қамтуы мүмкін 10 . Ректальды инфекция да симптомсыз болуы мүмкін. Фарингальды инфекция тамақ ауруы тудыруы мүмкін, бірақ әдетте симптомсыз 11, 12 .

Гонореяның асқынулары қандай?

Емделмеген гонорея әйелдерде де, ерлерде де ауыр және тұрақты денсаулық проблемаларын тудыруы мүмкін.

Әйелдерде гонорея жатырға немесе фаллопиялық түтіктерге таралып, жамбас мүшелерінің қабыну ауруын (PID) тудыруы мүмкін. Симптомдар өте жеңіл немесе өте ауыр болуы мүмкін және іштің ауыруы мен қызбаны қамтуы мүмкін 13 . PID ішкі абсцесстерге және созылмалы жамбас ауырсынуына әкелуі мүмкін. PID сонымен қатар бедеулікті тудыратын немесе жатырдан тыс жүктілік қаупін арттыратын фаллопиялық түтіктерді зақымдауы мүмкін.

Ерлерде гонорея эпидидимитпен асқынуы мүмкін. Сирек жағдайларда бұл бедеулікке әкелуі мүмкін 14 .

Егер емделмеген болса, гонорея да қанға өтіп, таралған гонококк инфекциясын (DGI) тудыруы мүмкін. DGI әдетте артритпен, теносиновитпен және/немесе дерматитпен сипатталады 15 . Бұл жағдай өмірге қауіп төндіруі мүмкін.

Гонорея және АҚТҚ туралы не деуге болады?

Емделмеген гонорея адамның СПИД-ті тудыратын АИВ вирусын жұқтыру немесе беру қаупін арттыруы мүмкін 16 .

Гонорея жүкті әйел мен оның баласына қалай әсер етеді?

Егер жүкті әйелде гонорея болса, ол инфекцияны нәрестеге беруі мүмкін, себебі нәресте босану кезінде туу арнасынан өтеді. Бұл нәрестеде соқырлық, буын инфекциясы немесе өмірге қауіп төндіретін қан инфекциясын тудыруы мүмкін 17 . Жүкті әйелдерде гонорея анықталған бойда оны емдеу бұл асқынулардың қаупін азайтады. Жүкті әйелдер қажет болған жағдайда тиісті тексеру, тестілеу және емдеу үшін дәрігермен кеңесу керек.

Гонореяға кім тексерілуі керек?

Кез келген жыныстық белсенді адам гонореяны жұқтыруы мүмкін. Жыныс мүшелерінің ағуы, зәр шығару кезінде жану, ерекше жаралар немесе бөртпе сияқты белгілері бар кез келген адам жыныстық қатынасты тоқтатып, дереу медициналық көмек көрсетушіге көрінуі керек.

Сондай-ақ, жақында ЖЖБИ диагнозы қойылған ауызша, анальды немесе қынаптық жыныстық серіктесі бар кез келген адам бағалау үшін медициналық қызмет көрсетушіге баруы керек.

Кейбір адамдарда гонорея белгілері болмаса немесе жыныстық серіктесі туралы білсе де, гонореяға тексерілу (скрининг) қажет 18 . Жыныстық қатынаспен айналысатын кез келген адам өзінің қауіп факторларын денсаулық сақтау провайдерімен талқылап, гонорея немесе басқа ЖЖБИ бар-жоғын тексеру керек пе, соны сұрауы керек.

CDC 25 жастан кіші барлық жыныстық белсенді әйелдерге, сондай-ақ жаңа немесе бірнеше жыныстық серіктестер немесе жыныстық жолмен берілетін инфекциясы бар жыныстық серіктес сияқты қауіп факторлары бар егде жастағы әйелдерге жыл сайынғы гонорея скринингін ұсынады.

Гонореямен ауыратын адамдар басқа ЖЖБИ-ге де тексерілуі керек.

Гонорея қалай диагноз қойылады?

Несеп-жыныс жолдарының гонореясын нуклеин қышқылын күшейту сынағы (NAAT) арқылы зәрді, уретральды (ерлер үшін) немесе эндоцервикалды немесе вагинальды (әйелдер үшін) үлгілерді сынау арқылы диагностикалауға болады 19 . Оны эндоцервикальды немесе уретральды жағынды үлгілерін қажет ететін гонорея культурасы арқылы да анықтауға болады.

Егер адам ауызша және/немесе анальды жыныстық қатынаста болса, жұтқыншақ және/немесе тік ішек жағынды үлгілерін культура немесе NAAT үшін жинау керек (егер жергілікті зертхана экстрагенитальді үлгілер үшін NAAT пайдалануды растаған болса) 20 .

Гонореяның емі қандай?

Гонореяны дұрыс емдеу арқылы емдеуге болады. Қазіргі уақытта CDC гонореяны емдеу үшін цефтриаксонның бұлшықет ішіне бір реттік 500 мг дозасын ұсынады. Цефтриаксонды урогенитальды немесе тік ішекті гонореяны емдеу үшін қолдану мүмкін болмаған кезде балама режимдер бар. Дәрі-дәрмек инфекцияны тоқтатса да, ол аурудан туындаған тұрақты зақымдарды қалпына келтірмейді. Гонореядағы микробқа қарсы тұрақтылық алаңдаушылық тудырады, ал гонореяны сәтті емдеу қиындай түсуде 21 . Инфекцияның сәтті емделгеніне сенімді болу үшін емделу сынағы &ndash кейінгі сынақ &ndash жыныс және тік ішек инфекциялары үшін қажет емес, дегенмен, егер адамда симптомдар ем алғаннан кейін бірнеше күннен артық сақталса, ол қайта оралуы керек. қайта бағалау үшін денсаулық сақтау провайдеріне. Жұтқыншақтық (тамақ инфекциясы) гонореямен емделетін адамдар емделгеннен кейін 7-14 күн өткен соң емдеуге арналған сынақ қажет.

Қайта жұқтыру жиі кездесетіндіктен, гонореямен ауыратын ерлер мен әйелдер жыныстық серіктестерінің сәтті емделуіне сенетініне қарамастан, бастапқы инфекцияны емдегеннен кейін үш айдан кейін қайта тексеруден өтуі керек.

Серіктестер ше?

Егер адамға гонорея диагнозы қойылса және емделсе, ол барлық жақында анальды, қынаптық немесе ауызша жыныстық серіктестерге хабарлауы керек, сонда олар дәрігерге көрініп, емделуі мүмкін 20 . Бұл жыныстық серіктестерде гонореядан ауыр асқынулардың пайда болу қаупін азайтады, сонымен қатар адамның қайта жұқтыру қаупін азайтады. Гонореямен ауыратын адам және оның барлық жыныстық серіктестері гонореяны емдеуді аяқтамайынша және симптомдары жойылмайынша жыныстық қатынастан аулақ болу керек. Серіктестермен жыныстық қатынас және ЖЖБИ тестілері туралы сөйлесу бойынша кеңестер алу үшін http://www.gytnow.org/talking-to-your-partner сыртқы белгішесіне кіріңіз.

Гонореяны қалай болдырмауға болады?

Латекс презервативтері дәйекті және дұрыс пайдаланылған кезде гонореяның берілу қаупін азайтады 22 . Гонореяның немесе басқа ЖЖБИ-нің берілуін болдырмаудың ең сенімді жолы - қынаптық, анальды және ауызша жыныстық қатынастан бас тарту немесе тексерілген және жұқтырмағаны белгілі серіктеспен ұзақ мерзімді өзара моногамдық қарым-қатынаста болу.


Гликандар мен гликозаминогликандар клиникалық биомаркерлер және терапия ретінде - А бөлігі

3.2.4 Neisseria gonorrhoeae

N. gonorrhoeae жыныстық жолмен берілетін маңызды патоген және АИТВ-1 инфекциясының негізгі кофакторы болып табылады. Бір қызығы, N. gonorrhoeae әйелдер мен еркектерді жұқтыру үшін әртүрлі жасушалық рецепторлар мен сигнал беру жолдарын пайдаланады. N. gonorrhoeae терминалды сиалилдейді Н- ацетиллактозамин инфекция кезінде адам жасушаларына енген кезде CMP-Neu5Ac алу арқылы оның липолигосахаридінде (LOS) болады. Бұл адамның қалыпты сарысуындағы комплемент арқылы организмді өлтіруге төзімді етеді. 106 Еркектердегі инфекция гонококктың LOS-да терминалдық галактоза қалдығының болуына байланысты. 107 Керісінше, бастапқы жатыр мойны эпителий жасушаларының гонококк инвазиясына LOS құрылымының сиалилизациясы әсер етпейді. 108 Осылайша, Н-ЛОС-тағы ацетиллактозамин қалдықтары Neu5Ac болмауы керек N. gonorrhoeae ерлердегі инфекция кезінде уретральды эпителий жасушаларымен байланысу және ену. Гонококк инфекциясы бар әйелдерде цервиковагинальды секрецияда сиалидаза деңгейі бар, бұл (сиалилденген) гонококк LOS дезиалиденуі мүмкін, бұл ерлерге сәтті берілуді күшейтеді. 109


Дүниежүзілік денсаулық сақтау ұйымы. Таңдалған емделетін жыныстық жолмен берілетін инфекциялардың жаһандық жиілігі мен таралуы. Женева. ДДҰ (2012): 20 б.

Дүниежүзілік денсаулық сақтау ұйымы. Жыныстық жолмен берілетін инфекциялардың алдын алу және бақылаудың жаһандық стратегиясы: 2006-2015 жж. Трансмиссия тізбегін бұзу. Қолжетімді:

Дүниежүзілік денсаулық сақтау ұйымы. Жыныстық жолмен берілетін инфекциялар бойынша денсаулық сақтау секторының жаһандық стратегиясы 2016–2021: ЖЖБИ тоқтатуға қарай. Женева. ДДҰ (2016): 60 б.

Жыныстық жолмен берілетін инфекцияларға қарсы емдік-профилактикалық шаралар жүйесін қолдану арқылы АИТВ таралуының алдын алу. 14.01.20 «Тері және венерологиялық аурулар» мамандығы бойынша кандидаттық диссертация. Харьков. «Украина NAMS дерматология және венерология институты» ММ (2016).

Андрейчин, М.А. «Украинадағы жұқпалы аурулардың қауіпті динамикасы». Жұқпалы аурулар 2.88 (2017): 4–8.

Кубанова, А.А., Мелехина, Л.Е., Кубанов, А.А., Богданова, Е.В. «Ресей Федерациясында 2004-2013 жылдардағы мерез ауруы». Vestnik Dermatologii i Venerologii 5 (2014): 24–31.

Кубанова, А.А., Кубанов, А.А., Мелехина, Л.Е., Богданова, Е.В. «Ресей Федерациясындағы дерматология және венерология. 2014 жылдың қорытындысы. Негізгі табыстар, жетістіктер. Даму жолдары». Vestnik Dermatologii i Venerologii 4 (2015): 13–26.

Кубанова, А.А., Кубанов, А.А., Мелехина, Л.Е., Богданова, Е.В. «Ресей Федерациясында 2010-2014 жылдардағы мерезбен ауыру деңгейі». Vestnik Dermatologii i Venerologii 5 (2015): 15–23.

Дүниежүзілік денсаулық сақтау ұйымы. Neisseria gonorrhoeae емдеуге арналған ДДҰ нұсқаулары. Женева. ДДҰ (2016). Мына жерден қол жетімді: [http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/246114/1/9789241549691-kaz.pdf].

Мавров, Х.И., Щербакова, Ю.В., Осинска, Т.В. «Жыныстық жолмен берілетін инфекцияларды ұстаудың жаңа әдістері». Жұқпалы аурулар 1.95 (2019): 4–10.

Ленкин, С.Г., Люцко, В.В. «2009-2013 жылдардағы жыныстық жолмен берілетін инфекциялардың құрылымы». Современные проблемалары науки и образования 2.1 (2015): 123–6.

Бондаренко, Г.М., Мавров, Г.И., Осинска, Т.В., т.б. «Trichomonas vaginalis пренатальды инвазия репродуктивті медицина мәселесі ретінде». Украинаның NAMS журналы 22.3–4 (2016): 368–76.

Ресей Федерациясының Мемлекеттік статистика комитеті. Жыныстық жолмен берілетін инфекциялардың ауруларының жиілігі. Российский статистикалық еженеделник (2015). 8-тарау (Денсаулық): 230.

«2015 жылғы қаңтар-желтоқсанға арналған жұқпалы және паразиттік аурулар туралы ақпарат (№ 1 нысан)». Эпидемиология және жұқпалы аурулар. Өзекті мәселелер 1 (2016 ж.): 73–7.

Ленкин, С.Г. «Әртүрлі жастағы жыныстық жолмен берілетін инфекциялардың жиілігі». Современные проблемасы науки и образования 3 (2015): 119–23.

Украина Денсаулық сақтау министрлігі. Украинада тері және жыныстық жолмен берілетін аурулармен ауыратын науқастарды емдеу және алдын алу көрсеткіштері. Киев. Украина ДСМ Медициналық статистика орталығы (2018 ж.): 112 б.

Макаренко, М.В., Говсеев, Д.А., Поповский, А.С. «Фербильді жастағы әйелдерді прегравидке дайындаудағы урогенитальды инфекцияның рөлі». Әйелдер денсаулығы 1.97 (2015): 118–21.

Медицина институты. Жасырын індет: жыныстық жолмен берілетін ауруларға қарсы тұру. Вашингтон, Колумбия округі. Ұлттық академия баспасөзі (1996).

Юлдашева, З.З., Журумбаева, С.К., Иванова, Ю.С., Мезенцева, Н.М. «ЖЖБИ және репродуктивті денсаулық (әдебиеттік шолу).» ҚазҰМУ Хабаршысы 2 (2015 ж.): 17–20.

Манапова, Е.Р., Фазылов, В.Х., Бешимов, А.Т. «АИТВ жұқтырған науқастардағы жыныстық жолмен берілетін инфекциялар». АИТВ-инфекциясы және иммуносупрессиялық бұзылулар 11.1 (2019): 71–4.

Тимошилов, В.И., Сидоров, Г.А., Агаркова, Т.А., т.б. «Дәрігерлердің сараптамалық бағалауында жастар арасындағы әлеуметтік-шартты аурулардың алдын алу сапасы». Қазіргі жағдайдағы медицинаның өзекті мәселелері: Халықаралық ғылыми-тәжірибелік конференцияның нәтижелері бойынша ғылыми еңбектер жинағы. Санкт-Петербург. ICTRON (2015): 108–11.

Еуропалық (IUSTI/WHO) Қынаптан ағуды басқару жөніндегі нұсқаулық 2018. Мына жерден қол жетімді: [http://www.iusti.org/regions/europe/pdf/2018/IUSTIvaginal].

Орыс акушер-гинекологтар қоғамы. Әйелдердің жыныс жолдарынан патологиялық бөлінумен жүретін ауруларды диагностикалау және емдеу. Клиникалық нұсқаулар. Мәскеу (2014): 50 б.

Канда, Ю. «Медициналық статистикаға арналған еркін қол жетімді «EZR» бағдарламалық құралын зерттеу». Сүйек кемігін ауыстыру 48 (2013): 452–8.


Әйелдер мен нәрестелердегі ЖЖБИ

Жыныстық жолмен берілетін инфекциялардың асқынулары барлық жастағы әйелдерге пропорционалды емес әсер етеді, бұл репродуктивті жастағы әйелдерге маңызды әсер етеді. Анықталмаған және емделмеген ЖЖБИ жамбас мүшелерінің қабыну ауруларына (PID), жатырдан тыс жүктілікке, сондай-ақ ұрықтың және неонатальды жағымсыз нәтижелерге әкелуі мүмкін. ЖЖБИ-мен байланысты сырқаттанушылық бірқатар себептерге байланысты әйелдерде пропорционалды түрде кездеседі. Әйелдер ерлерге қарағанда кейбір ЖЖБИ-ге биологиялық тұрғыдан көбірек бейім және асқынулардан зардап шегеді. Сондай-ақ, әйелдерде ЖЖБИ жиі асимптоматикалық болатынын, диагнозды және емдеуді симптоматикалық асқыну пайда болғанға дейін кешіктіретінін ескеру қажет. Әйелдің жыныстық және репродуктивті денсаулығы оның нақты әлеуметтік, мәдени және экономикалық ортасымен өзара байланысты болуы мүмкін, бұл қауіпті жыныстық мінез-құлық үшін жағдай жасайды. Бірнеше факторлар, соның ішінде қауіпсіз сексуалдық тәжірибелер туралы келіссөздер жүргізу мүмкіндігін тежейтін алкогольді немесе көңіл көтеруге арналған есірткілерді пайдалану, гендерлік биліктің төмендеуі, параллельділіктің жоғары деңгейі, кедейлік, баспанасыздық немесе тұрақсыз баспана және серіктестік зорлық-зомбылық әйелдерді қорғауда кездесетін қиындықтарға ықпал етуі мүмкін. жыныстық әл-ауқат. 1-5 Кейбір жағдайларда серіктеспен қарым-қатынасты сақтау оның репродуктивті денсаулығына, сондай-ақ туылмаған нәрестенің денсаулығына әсер ететін ЖЖБИ қаупін азайтуға қарағанда жоғары басымдылыққа ие болуы мүмкін. 6 Әйел жұқтырған серіктесімен жұқтырған серіктесінің жыныстық қатынасы арқылы да ЖЖБИ қаупіне ұшырауы мүмкін. Демек, тіпті бір ғана серіктесі бар әйел де презервативтерді пайдалану сияқты қауіпсіз жыныстық қатынасқа түсуге міндетті болуы мүмкін. 7

Әйелдерге және ұрпақтылыққа әсері

Адам папилломавирусы

Адам папилломавирусы (HPV) - Америка Құрама Штаттарында жиі кездесетін жыныстық жолмен берілетін инфекция.8,9 Әйелдердегі HPV инфекцияларының көпшілігі өтпелі болып көрінгенімен және клиникалық маңызды салдарға әкелмеуі мүмкін, 10 жоғары қауіпті HPV типті инфекциялар жатыр мойны эпителийінде қалыптан тыс өзгерістерді тудыруы мүмкін, 10,11 олар цитологиялық зерттеу арқылы анықталады. Папаниколау (Пап) жағындылары. 12 Тұрақты жоғары қауіпті HPV типті инфекциялар жатыр мойны обырының прекурсорларына әкелуі мүмкін, егер анықталмаса, қатерлі ісікке әкелуі мүмкін, 11 және жатыр мойнының зақымдалуын кесіп емдеу болашақта мерзімінен бұрын босану қаупін арттыруы мүмкін. 13 Қауіпті төмен HPV типті басқа инфекциялар жыныстық сүйелдерді, 11,14 төмен дәрежелі пап-жағынды аномалияларын, 11,15 көмей папилломаларын, 16 және сирек қайталанатын респираторлық папилломатозды жұқтырған аналардан туылған балаларда тудыруы мүмкін. 17,18

2006 жылдан бастап, HPV вакциналары Америка Құрама Штаттарында 11 және ndash12 жастағы әйелдерде, 26 жасқа дейін қайталама вакцинациямен бірге күнделікті қолдану үшін ұсынылды. 19,20 HPV вакцинасы 2011 жылдан бастап ерлерге де жоспарлы қолдану үшін ұсынылады. 20-23 жылы. 2018 жылдың қазан айында Азық-түлік және дәрі-дәрмек басқармасы (FDA) 27 және 45 жастағы әйелдер мен ерлер үшін вакцинаны лицензиялауды ұзартты және 2019 жылдың маусымында CDC-тің Иммундау тәжірибесі бойынша консультативтік комитеті (ACIP) вакцинацияланбаған 27 жастағы және 245 жастағы ересектерге вакцинаны қайта қарауды ұсынды. HPV вакцинасы денсаулық сақтау провайдерлерімен. 23 HPV вакцинациясы туралы қосымша ақпаратты Басқа ЖЖБИ бөлімінен қараңыз.

Табысы жоғары 14 елден, соның ішінде Америка Құрама Штаттарынан келген 60 миллионнан астам адамның деректерін қамтитын жақында жүргізілген мета-талдау HPV вакцинациясының жасөспірім қыздар мен жас әйелдер арасындағы жыныстық HPV инфекцияларына және аногенитальды сүйелдерге айтарлықтай әсерін көрсетті. жас әйелдердің жатыр мойнының зақымдануы. 25 Кез келген төрт валентті HPV вакцина түрінің жатыр мойнына вагинальды таралуы Ұлттық денсаулық және тамақтану сараптамасының (NHANES) деректерін пайдалана отырып, азаматтық, мекемеленбеген, 14 және 34 жастағы әйелдер үшін бағаланған. 26 Таралу 2003&ndash2006 жылдан (вакцинаға дейінгі дәуір) 2011&ndash2014 жылға дейін 14&ndash19 және 20&ndash24 жастағы әйелдерден алынған үлгілерде айтарлықтай төмендеді, бұл HPV вакцинациясынан ең көп пайда көретін жас топтары. HPV инфекциялары туралы қосымша ақпаратты Басқа ЖЖБИ бөлімінен қараңыз.

Хламидиоз

Әйелдердегі хламидиозды инфекциялар әдетте асимптоматикалық болып табылады және инфекциялардың көпшілігін анықтау үшін скрининг қажет. 1993 жылдан бері жыныстық белсенді жас әйелдердің хламидиозын жүйелі скринингтен өткізуді CDC ұсынады. 27 Әйелдер арасында хламидиоздың хабарланған жағдайларының көрсеткіші 1990 жылдардың басынан бастап тұрақты түрде өсті, бұл скринингтік қамтудың кеңеюін және неғұрлым сезімтал диагностикалық сынақтарды қолдануды көрсетуі мүмкін (1-кесте). . 2011&ndash2013 жылы хламидиозбен ауыру көрсеткіші 100 000 әйелге шаққанда 643,4-тен 619,0 жағдайға дейін төмендеді, содан кейін келесі бес жылда 11,9%-ға өсті, нәтижесінде 2018 жылы 100 000 әйелге шаққанда 692,7 жағдайға жетті (ТМ мүмкін).

Хламидиоздың деңгейі скринингке бағытталған жас әйелдер арасында ең жоғары (5 және 6-суреттер, 10-кесте). 2017&ndash2018 жылдары 15&ndash19 және 20&ndash24 жастағы әйелдер арасында хламидиозбен ауырғандар саны сәйкесінше 1,3% және 0,8% өсті (6-сурет). Аймақтық тұрғыдан алғанда, барлық әйелдер арасында хламидиозбен ауыратындар Оңтүстіктегі әйелдер арасында ең жоғары болды, 2018 жылы 100 000 әйелге шаққанда 744,2 жағдайды құрады (4-кесте). Хабарланған хламидиоз жағдайларының көрсеткіштері барлық аймақтардағы әйелдер арасында гонореямен ауыру көрсеткіштерінен асып түсті (А және С суреттері, 4 және 15-кестелер).

Таңдалған популяциялардағы хламидиоздың оң болуы

STD қадағалау желісі (SSuN) – бұл отбасын жоспарлау және репродуктивті денсаулық қызметтерін ұсынатын мекемелерге баратын 15 және ndash44 жастағы әйелдерден демографиялық, клиникалық және зертханалық деректер жиналатын 10 қатысушы юрисдикциядағы штат, округ және қалалық денсаулық сақтау департаменттерінің тұрақты ынтымақтастығы. Қосымшаның A2.2 бөлімін қараңыз). Дегенмен, 2018 жылдың жазында осы клиникаларда деректерді жинау аяқталды және мұнда ұсынылған нәтижелер тек 2018 жылдың қаңтарынан маусымға дейін алынған деректерді қамтиды. В суретте хламидиозды тексеру және 100-ден астам әйелді және одан да көп әйелдерді тексерген мекемелер арасында ғана хабарланған хламидиоздың позитивтілігі көрсетілген. 14&ndash24 жастағы жас әйелдердің 60%. 2018 жылы 14 және 24 жастағы әйелдер арасында хламидиоздың жалпы оң көрсеткіші 9,8% құрады, бірақ 14 және ndash19 жастағы әйелдерде хламидиоздың оң болуы 10,5% құрады. 14&ndash24 жас аралығындағы әйелдер үшін испандық емес қара нәсілділер арасында хламидиоздың позитивтілігі испандық емес ақ нәсілділерге немесе испандықтарға қарағанда шамамен 1,5 есе болды.

Гонорея

Хламидиоз сияқты, әйелдерде гонорея жиі асимптоматикалық болып табылады. Сондықтан гонорея скринингі әйелдер арасында гонореяны анықтаудың маңызды стратегиясы болып табылады. Әйелдердегі гонореяға арналған кең ауқымды скринингтік бағдарламалар 1970 жылдары басталды. Скрининг арқылы анықталған жағдайлардың бастапқы өсуінен кейін әйелдер де, ерлер үшін де хабарланған гонорея жағдайлары 1980 және 1990 жылдардың басында тұрақты түрде төмендеді, содан кейін 1990-шы жылдардың аяғы мен 2000-шы жылдары біртіндеп төмендеді. Дегенмен, соңғы уақытта жалпы жағдайлардың өсуі байқалды (14-сурет, 1-кесте).

2009 жылы 40 жылдағы ең төменгі деңгейге жеткеннен кейін (100 000 әйелге шаққанда 104,5 жағдай), әйелдерге арналған гонорея жағдайларының көрсеткіші 2009 & ndash 2011 жылдары жыл сайын аздап өсті, содан кейін 2012 & ndash 2014 жылы төмендеді (18-сурет). 2015&ndash2018 жыл ішінде әйелдер арасындағы гонорея көрсеткіші 37,2%-ға өсіп, 100 000 әйелге шаққанда 145,8 жағдайды құрады (18-сурет, 15-кесте).

Әйелдер арасындағы гонореямен ауыру көрсеткіші 2009&ndash2012 жылдардағы еркектерге қарағанда біршама жоғары болды, алайда ерлер арасындағы көрсеткіш 2013&ndash2018 жылғы әйелдер арасындағы көрсеткіштен жоғары болды (18-сурет, 15 және 16-кестелер). 2014&ndash2018 жылы әйелдер арасында гонорея деңгейі 15&ndash24 жастағылар арасында ең жоғары болды (20-сурет, 21-кесте). Осы жас тобындағы әйелдер үшін көрсеткіш 2018 жылы 19 жастағылар арасында ең жоғары болды (100 000 әйелге шаққанда 877,3 жағдай) (23А-кесте).

Жамбас мүшелерінің қабыну ауруы

Зерттеулер деректері емделмеген хламидиозды инфекциялардың 10%-ға жуығы клиникалық диагноз қойылған PID-ге ауысатынын және емделмеген гонококк инфекциясының қаупі одан да жоғары болуы мүмкін екенін көрсетеді. 28-30 PID маңызды мәселе болып табылады, себебі ол қабыну және фаллопиялық түтіктердің зақымдалуына әкелуі мүмкін, бедеулік және жатырдан тыс жүктілік қаупін арттырады. Түтік факторының бедеулігі бедеуліктің ең көп тараған себептерінің бірі болып табылады, Америка Құрама Штаттарындағы әйелдер бедеулігінің 30% құрайды, 31 және бұл зақымданудың көп бөлігі бұрынғы PID эпизодтарынан туындайды. 32 Қоғамдық денсаулықты сақтаудың маңызды шарасы ЖИА және түпкілікті түтік факторы бедеулігінің алдын алу және бақылау болып табылады. Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae. Рандомизирленген бақыланатын зерттеулерде көрсетілгендей хламидиозды ерте анықтау және емдеуді жақсарту стратегиялары 29,33 әйелдердің PID қаупін азайтады және ақыр соңында әйелдердің құнарлылығын қорғайды.

Хламидиозды және гонококкты инфекциялардан туындайтын PID және түтік факторы бедеулігін дәл бағалау қиын, өйткені ішінара бұл жағдайлардың түпкілікті диагнозы күрделі болуы мүмкін. Ұлттық аурулар және терапиялық индекс (NDTI Қосымшадағы A2.5 бөлімін қараңыз) PID үшін кеңседегі жеке дәрігерлерге алғашқы барулардың бағалауын қамтамасыз етеді. NDTI 2007&ndash2016 жылы 15 және ndash44 жастағы әйелдер арасында мұндай дәрігерлерге ЖИА бойынша алғашқы барулардың саны 146 000-нан 90 000 келуге дейін 38,3%-ға төмендегенін бағалады (Сурет D). Осыған ұқсас төмендеулер Америка Құрама Штаттарындағы барлық төлеушілер деңгейіндегі стационарлық пациенттер, ED және амбулаториялық қызметтер деректерінің ең үлкен жинағы Денсаулық сақтау құны және пайдалану жобасының (HCUP) төтенше жағдайлар бөліміне (ED) баруының ұлттық өкілетті деректерінде байқалды. HCUP&rsquos Ұлттық Төтенше жағдайлар департаментінің үлгісін (NEDS) пайдаланатын талдауға сәйкес, 2006&ndash2013 жылы 15&ndash44 жастағы әйелдер арасында PID диагнозы бар ЭЖ-ге бару пайызы төмендеді, 15&ndash19 жастағы әйелдер арасында ең көп төмендеді (Сурет E). 34 Бірнеше факторлар, соның ішінде хламидиозды және гонорея инфекциясын ерте анықтау және емдеуді және емдеуді ұстануды арттыратын бір дозалық терапияның қолжетімділігін қоса алғанда, бұл төмендеулерге не себеп болуы мүмкін екені толық анық емес. 35-37 PID ұлттық деңгейде төмендеп келе жатқанымен, ол әлі де әйелдер арасындағы сырқаттанушылықтың негізгі себебі болып табылады.

Бұрынғы зерттеулерде репродуктивті жастағы әйелдерде нәсіл/испандық этникалық тегі бойынша PID-ның өмір бойы диагнозы бойынша айырмашылықтар байқалған. 38 NHANES 2013&ndash2014 циклінің деректері алдыңғы ЖЖБИ диагнозы туралы хабарлаған испандық емес қара және испандық емес ақ әйелдердің өмір бойы PID таралу деңгейінің тең дерлік (10,3% қарсы 10,0%) болғанын көрсетеді (F-сурет). 39 Алайда, бұрын ЖЖБИ диагнозы қойылмаған болса, испандық емес қара әйелдердің өмір бойы PID таралуы испандық емес ақ әйелдерге қарағанда 2,2 есе болды (6,0% қарсы 2,7%). Бұл нәтижелер ПИД бұрынғы ЖЖБИ диагноздарымен байланысты екенін көрсетеді, сондықтан дәрігерлер әйелдер пациенттерін хламидиоз мен гонореяға скринингтен өткізуі ПИД жиілігін азайту үшін маңызды. PID диагноздарында байқалған нәсілдік теңсіздіктер хламидиоз және гонорея үшін байқалған нәсілдік теңсіздіктерге сәйкес келеді. Дегенмен, PID диагностикасының субъективті әдістеріне байланысты нәсілдік алшақтық туралы мәліметтерді сақтықпен түсіндіру керек.

Жүктілік пен ұрықтың нәтижелеріне әсері

Жүктіліктің қолайсыз нәтижелеріне әсер ететін жыныстық жолмен берілетін инфекциялар кең және вирустық, бактериялық және протозойлық инфекцияларды қамтиды. ЖЖБИ-ден кейінгі репродуктивті нәтижелердің спектрі әйелдердің денсаулығына және олардың ұрпақты болу қабілетіне қауіп төндірумен қатар, жұқтырған адамдардың ұрығы мен жаңа туған нәрестелеріне зиянды әсер етуі мүмкін. Күтімге қол жеткізу және провайдердің тәуекелді бағалау, скрининг және ЖЖБИ емдеу мүмкіндігі акушерлік нәтижелерді жақсартудың маңызды факторлары болып табылады.

Жатырдан тыс жүктілік

Жатырдың шырышты қабатынан басқа кез келген тінге ұрықтанған аналық жұмыртқаны имплантациялау ретінде анықталатын жатырдан тыс жүктілік - шұғыл бағалау мен емдеуді қажет ететін өмірге қауіп төндіретін жағдай. Америка Құрама Штаттарында орын алған жатырдан тыс жүктіліктің санын анықтау мүмкіндігіне клиникалық басқарудың стационарлық жағдайдан амбулаториялық жағдайға ауысуы әсер етті, бұл стационарлық стационарды қадағалау деректер көздерін сенімсіз етті. Нәтижесінде, тенденцияларды бағалау және осы жағдайдың қоғамдық денсаулыққа ауыртпалығын бағалау үшін үлкен әкімшілік шағымдардың деректерін қоса алғанда, баламалы қадағалау әдістері, 39,40 немесе төтенше жағдайлар департаменттері пайдаланылды. Америка Құрама Штаттарының коммерциялық денсаулық жоспарларының үлкен әкімшілік шағымдар дерекқоры MarketScan Commercial Claims and Encounters Database деректері 2006 және ndash2017 жылдар аралығында 15 және ndash44 жастағы тірі туылған әйелдер арасында жатырдан тыс жүктілік диагноздарының барлық тірі туылғандарға қатынасы шамалы өскенін көрсетеді. барлық жас топтары (G суреті). Өткен жылдардағыдай, 2017 жылы жатырдан тыс жүктілік көрсеткіші 35&ndash44 жас топтарындағы әйелдер арасында ең жоғары болды.

Неонатальды конъюнктивит

Ананың инфекциясы C. trachomatis немесе N. gonorrhoeae нәрестеге де әсер етуі мүмкін, бұл конъюнктивит инфекцияларына әкеледі (өмірдің алғашқы төрт аптасында офтальмиялық неонаторум деп аталады) және C. trachomatis , пневмония. Босану кезіндегі нәрестелердің жергілікті профилактикасы неонаторлық гонококк офтальмияның алдын алу үшін тиімді болуы мүмкін болса да, неонатальды пневмонияның алдын алу үшін пренатальды анықтау және емдеу қажет. Конъюнктивиттің клиникалық көрінісі өзгермелі болуы мүмкін және бұл инфекцияларды дереу емдеу өте маңызды, өйткені олар көру қабілетінің бұзылуына әкелуі мүмкін. 41

2014&ndash2018 жыл ішінде CDC-ке &lsquoeye&rsquo немесе &lsquoconjunctiva&rsquo (конъюнктивит инфекциялары) үлгі көзі бар <1 жастағы сәбилер арасындағы 438 хламидиоз немесе гонорея жағдайы туралы хабарланды. Нәрестелердегі хламидиозды конъюнктивиттің жалпы көрсеткіші 2014&ndash2018 жылдары салыстырмалы түрде тұрақты болды, ол 100 000 тірі туылғанға шаққанда 1,4-тен 2,3 жағдайға дейін ауытқиды (Н сурет). Сол сияқты, нәрестелердегі гонококк конъюнктивитінің көрсеткіші 2014&ndash2018 жылы салыстырмалы түрде тұрақты және төмен болып қалды, ол 100 000 тірі туылғанға шаққанда 0,2&ndash0,4 жағдайды құрады. Хабарланған жағдайлардың жылдамдығына үлгі көзіндегі хабарланған деректердің толықтығы қатты әсер етеді. 2014&ndash2018 жылы &ndash2018 жылы <1 жастағы нәрестелердегі хламидиоз немесе гонорея CDC-ке хабарланған барлық жағдайлардың 81,3%-ында не &lsquoeye&rsquo, не &lsquoconjunctiva&rsquo үлгі көзі болған жоқ, олардың 626% белгілі көзі болды ), &lsquother-көрсетілмеген&rsquo (10,6%) немесе жоқ (5,1%). Көрсеткіштерді бағалау кезінде осы жағдайларды қоса алғанда, хламидиоз және гонорея инфекцияларының деңгейі ұқсас тенденцияларды ұстанады, бірақ барлық жылдар бойына жоғарырақ болады, бұл бақылауға жіберілген ықтимал жағдайларды көрсетеді (Н сурет).

Туа біткен мерез

Сифилис жүктіліктің жағымсыз салдары үшін маңызды қауіп факторы болып табылады. Емделмеген ана инфекциясының салдары ұрық пен нәресте өлімін, мерзімінен бұрын босануды және тірі қалған нәрестелер үлесінде туа біткен инфекцияны қамтуы мүмкін, бұл физикалық және психикалық дамудың кемістігіне әкеледі. Туа біткен мерездің көптеген жағдайларының алдын алуға болады, егер әйелдер мерезге тексерілсе және босанғанға дейінгі күтім кезінде ерте емделсе.

Туа біткен мерездің тенденциялары әдетте репродуктивті жастағы әйелдердегі бастапқы және қайталама (P&S) мерездің тенденцияларын көрсетеді. 2011&ndash2013 ж. ішінде салыстырмалы түрде төмен қарқынмен (100 000 әйелге шаққанда 0,9 жағдай) үстірт өткеннен кейін барлық әйелдер арасында P&S мерезінің тіркелген жағдайларының көрсеткіші содан бері жыл сайын өсті (49-сурет). 2014&ndash2018 жылы әйелдер арасындағы көрсеткіш 100 000 әйелге шаққанда 1,1-ден 3,0 жағдайға дейін 172,7%-ға өсті (28-кесте). Осы кезеңде репродуктивті жастағы әйелдер (15&ndash44 жастағы әйелдер) арасындағы көрсеткіш 15&ndash44 жастағы 100 000 әйелге шаққанда 2,6-дан 6,9 жағдайға дейін 165,4%-ға өсті (49-сурет).

Сол сияқты 2012 жылдан бастап туа біткен мерезбен ауыратындардың саны жыл сайын артып келеді (1-кесте). 2018 жылы туа біткен мерездің 1306 жағдайы тіркелді, бұл көрсеткіш 100 000 тірі туғанға шаққанда 33,1 жағдайды құрады, бұл 1995 жылдан бергі ең жоғары көрсеткіш. 2018 жылы бұл өсу 2017 жылмен салыстырғанда 39,7%-ға және 291,02%-ға өсті12 (41-кесте).

2018 жылы әйелдер арасында тіркелген P&S мерезімен ауырғандардың ең жоғары көрсеткіштері және туа біткен мерезбен ауырғандардың ең жоғары көрсеткіштері Батыс пен Оңтүстікте байқалды (I және J суреттері, 28 және 41-кестелер). 2017&ndash2018 жылы әйелдер арасында P&S мерезінің көрсеткіші әр өңірде өсті. 2017&ndash2018 жыл ішінде әйелдер арасындағы ең үлкен өсім Батыста (41,2%), одан кейін Солтүстік-Шығыста (40,0%), Оңтүстікте (30,8%) және Орта Батыста (30,8%) болды (28-кесте). 2017&ndash2018 жылы туа біткен мерездің деңгейі Оңтүстікте 49,5%-ға, Солтүстік-Шығыста 44,1%-ға, Орта Батыста 30,5%-ға, Батыста 29,3%-ға өсті (41-кесте).

Туа біткен мерездің көпшілігі аналары босанғанға дейінгі күтімді көрген нәрестелер арасында болғанымен, кеш немесе шектеулі пренатальды күтім туа біткен мерезбен байланысты болды. Медициналық қызметкерлердің мерезге дейінгі скрининг бойынша ұсыныстарды сақтамауы, сондай-ақ бастапқы скринингтік тексеруден кейін жүктілік кезінде инфекцияны жұқтыру да туа біткен мерездің пайда болуына ықпал етеді.

Жаңа туылған нәрестелердің қарапайым герпес вирусы

Қарапайым герпес вирусы (HSV) жыныстық жолмен берілетін инфекциялардың ең көп тараған түрі болып табылады, 8 және жүкті әйелдер мен олардың нәрестелері үшін ауыр зардаптарға әкелуі мүмкін. 42 Құрама Штаттардағы жыныстық HSV инфекцияларының көпшілігі HSV 2 типті (HSV-2) арқылы туындаса, HSV 1 типті (HSV-1) инфекциялары әдетте оролабиальды және балалық шақта пайда болады. 43,44 NHANES деректері жасөспірімдер арасында HSV-1 серопреваленттігінің айтарлықтай төмендегенін көрсетеді, бұл оролабиальды инфекцияның төмендеуін көрсетеді. 44 Жыныстық дебют кезінде HSV-1 антиденелері жетіспейтіндер жыныстық HSV-1 инфекциясына көбірек бейім, 44,45 және жаңадан алынған (яғни, бастапқы) жыныстық HSV-2 инфекциясынан симптоматикалық аурудың даму қаупі жоғары. 46 Сондықтан жас әйелдер HSV-1 инфекциясын алғаш рет жыныстық жолмен алуы мүмкін немесе бала туатын жылдары HSV-2 біріншілік жыныстық инфекциясын алу ықтималдығы жоғары болуы мүмкін 45,47 Жүктілік кезіндегі бірінші эпизодтық жыныстық HSV инфекциясы жаңа туған нәрестенің даму қаупін арттырады. HSV берілуі, 45,48, әсіресе егер анасы жүктіліктің соңына қарай инфекцияны жұқтырса. 45,49 NHANES деректерінің тағы бір талдауы өмір бойы үш немесе одан аз жыныстық серіктесі бар жүкті әйелдердің арасында HSV-1 және HSV-2 үшін серонегативтіліктің 1999&ndash2006 жылдан 2007&ndash2014 жылға дейін артқанын көрсетті, 50 жыныстық серіктестері аз жүкті әйелдерде болуы мүмкін. жүктілік кезінде жыныстық HSV алу қаупінің жоғарылауы және олардың жаңа туған нәрестелеріне HSV тігінен берілу. Жыныс мүшелерінің HSV инфекциялары туралы қосымша ақпаратты Басқа ЖЖБИ бөлімінен қараңыз.

Неонатальды HSV жұқпалары салыстырмалы түрде сирек болса да, айтарлықтай сырқаттанушылық пен өлімді тудырады. 42 Неонатальды герпес босану кезінде жұқтырған жатыр мойны немесе қынап секрецияларымен байланыста болғаннан кейін теріде, көзде немесе ауызда везикулярлық зақымданулармен, құрысулармен, тыныс алудың бұзылуымен және/немесе бауыр жеткіліксіздігімен сипатталатын ауыр ауру болуы мүмкін. 42,49 Неонатальды HSV инфекцияларының көпшілігі анадан жаңа туған нәрестеге перинаталды берілуден туындайды, 49, бірақ постнатальды инфекция болуы мүмкін. 51 Неонатальды HSV инфекциясы туралы хабарлау бірнеше юрисдикцияларда талап етілсе де, 52,53 бұл ұлттық деңгейде хабарланатын ауру емес.

HCUP Kid&rsquos стационарлық деректер базасын (KID) пайдалана отырып, қабылдау кезінде 60 күндік немесе одан кіші жастағы нәрестелердің стационарлық жазбаларын зерттеу 2006 жылы 100 000 тірі туылғандарға 9,6 жағдайдың жалпы аурушаңдығын көрсетті. 54 Көрсеткіштер аймаққа немесе нәсілге байланысты айтарлықтай өзгермеген. этникалық, дегенмен, күтілетін негізгі төлеуші ​​Medicaid (100 000 тірі туғанға 15,1 жағдай) жеке сақтандырумен немесе басқарылатын денсаулық сақтау қызметімен салыстырғанда (100 000 тірі туылғанға 5,4 жағдай) таралуы айтарлықтай жоғары болды. HCUP ұлттық стационарлық үлгісін (NIS) қолданатын жақында жүргізілген зерттеу 100 000 тірі туылған нәрестеге шаққанда неонаталдық HSV инфекциясының жиілігі 2003 және 2014 жылдардағы 7,9-дан 2012 және ndash2014 жылы 10,0-ге дейін айтарлықтай өскенін көрсетті. 55

Нью-Йорк қаласында 4,5 жыл ішінде (2006 жылдың сәуірі және 2010 жылдың қыркүйегі) неонаталдық HSV инфекциясының 76 жаңа туған нәресте инфекциясының жағдайы анықталды, бұл 100 000 тірі туылғандарға 13,3 жағдайды құрады. 47 Расталған жағдайлардың 41 пайызы HSV-1 жұқтырған.1981&ndash2013 жылы Нью-Йорк қаласында берілген өлім немесе өлі туу туралы куәліктерді шолу неонатальды HSV инфекциясынан 34 өлімді немесе 100 000 тірі туылғанға шаққанда 0,82 өлімді анықтады. 53

Түйіндеме

ЖЖБИ денсаулық сақтаудың маңызды басымдығы болып табылады және олардың салдарға байланысты елеулі сырқаттанушылық пен өлім-жітім жиі әйелдерде назардан тыс қалуы мүмкін. Бұл әсіресе репродуктивті жастағы әйелдер мен олардың сәбилеріне қатысты. Соңғы төрт жылда әйелдерде хламидиозбен ауыратын жағдайлардың жалпы көрсеткіші 11,4%-ға өсті, мұның көп бөлігі скринингтің жоғарылауымен және толық ұлттық есеп берумен байланысты. Әйелдер арасындағы гонорея инфекциясы да соңғы жылдары 100 000 әйелге шаққанда 45,2%-ға өсіп, 145,8 жағдайға жетті. Бақылау деректері хламидиоз және гонорея жағдайларының саны мен көрсеткіштері 15 пен 24 жас аралығындағы әйелдерде ең жоғары екенін және белгілі бір нәсілдер/этникалық топтар пропорционалды емес әсер ететінін көрсетуді жалғастыруда. Хабарланған хламидиоз және гонорея жағдайларының көбеюіне қарамастан, қолда бар деректер негізінен жасөспірімдер мен жас әйелдерде хламидиозды және гонококк инфекцияларын тиімді скрининг пен емдеудің ұлғаюымен байланысты ЖИА жиілігінің жалпы төмендеуін көрсетеді. PID көрсеткіштерінің төмендеуінен айырмашылығы, деректер эктопиялық жүктіліктің уақыт өте келе біршама өскенін көрсетеді.

ЖЖБИ-нің анадан балаға берілуі ауыр жағымсыз салдарға әкелуі мүмкін. Неонатальды ықтимал жағымсыз нәтижелерге неонатальды офтальмия, неонатальды пневмония және шала туылу жатады. Америка Құрама Штаттарында 2013 жылдан бастап туа біткен мерездің көрсеткіші жыл сайын өсті. 2018 жылы туа біткен мерездің 935 жағдайы тіркелді және ұлттық туа біткен мерездің көрсеткіші 100 000 тірі туылғанға шаққанда 23,7 жағдайды құрады, бұл соңғы екі онжылдықтағы ең жоғары көрсеткіш. Жүктілік кезінде ұсынылатын ЖЖБИ скринингіне қарамастан, кейбір әйелдер босанғанға дейінгі күтімнің болмауына немесе шектеулі болуына байланысты жүктілік кезінде инфекцияларын емдемеуі мүмкін.


Нәтижелер

Тазарту Н. гонорея OMV

рөлін зерттеу Н. гонорея Жасырынған OMVs, біз алдымен бактериялық автолизді және мембраналық және цитозолды материалдармен ластануды азайту үшін OMV-терді оңтайлы өсу жағдайында тазарту әдістерін белгіледік, олардың барлығына мәдениет жағдайлары әсер етеді [30]. Трансмиссиялық электронды микроскопия (TEM) және сканерлеуші ​​электрондық микроскопия (SEM). Н. гонорея Орташа бөрене фазасы дақылдарынан жиналған бактериялық мембрана негізінен бұзылмағанын көрсетті (1А-сурет). TEM және SEM сонымен қатар сыртқы мембранамен тығыз байланысты пайда болған везикулаларды анықтады Н. гонорея және бактерия бетінен шығу (1А-сурет). OMV жиналады Н. гонорея центрифугалау арқылы өсу орталарында екі түрлі штаммдардан алынған өлшемдері (диаметрі 20–200 нм), пішіні (сфералықтан құбырлыға дейін) және мембраналар саны (моно немесе екі қабатты) өзгермеген мембраналар бар (1В-сурет). Түйіршіктелген OMV-де ақуыз агрегаттарын көрсетуі мүмкін электронды тығыз бөлшектер де бар (1В-сурет). Белгіленген құрамы және біркелкі өлшемі бар OMV-терді культура үстіңгі заттан тазарту үшін біз 25-50% OptiPrep градиенттерін қолдандық. Центрифугалаудан кейін 4, 5 және 6 фракцияларында молекулалық салмаққа және анти-PorB сарысуымен иммундық анықтауға негізделген сыртқы мембраналық порин, PorB басым белок болуы мүмкін бірнеше ақуыздар болды (1С-сурет). 4, 5 және 6 фракцияларының TEM талдауында диаметрі 50-100 нм біркелкі өлшемі бар OMV және жасушалық қоқыс болмаған кезде бір қос қабатты бар (1D-сурет). Керісінше, 1-3 және 7-10 фракцияларында электронды тығыз құрылымдар, сондай-ақ пішіні мен өлшемдері әртүрлі мембраналық көпіршіктер бар (1D-сурет). Кейінгі талдау үшін лог-фазадан алынған 4, 5 және 6 фракциялары Н. гонорея OptiPrep ультрацентрифугасынан кейінгі культуралар бұзылмаған OMV жоғары байытылған популяциялары ретінде пайдаланылды, ал культура үстемелерінен алынған жалпы везикулалар шикі OMV препараттары ретінде белгіленді.

(A) Н. гонорея MS11-A трансмиссия (жоғарғы панельдер) және сканерлеу (төменгі панельдер) электронды микроскопия (ЭМ) арқылы талданды. Көрсеткілер OMVs көрсетеді. Масштаб жолағы = 0,5, 0,2 және 0,1 мкм. (B) FA1090 және MS11-A дақылдарынан алынған шикі OMV препараттары трансмиссиялық электрондық микроскопия (TEM) арқылы талданды (оң жақ панельдер жоғарырақ үлкейтілген кескіндерді көрсетеді) (C) Н. гонорея MS11-A туынды OMVs OptiPrep тығыздық градиентінің ультрацентрифугалауы арқылы фракцияларға бөлінді және 11 фракция мен белоктар коллоидты кумассиа бояуымен талданды. PorB-ге сәйкес келетін көрнекті жолақтың денситометриясы (жоғарғы жағында көрсетілген). Anti-PorB көмегімен зерттелген фракциялардың әрқайсысының иммуноблоттық талдауы (төменгі). Молекулярлық салмақ маркерлері (кДа) сол жақта көрсетілген. (D) Төменгі жағында көрсетілгендей OptiPrep тығыздық градиентінен теріс боялған біріктірілген фракциялардың TEM кескіндері. Масштаб жолағы = 0,2 мкм.

Белоктар іріктеп байытылған немесе қабылданбайды Н. гонорея секрецияланған OMV

OMV бактериялардың сыртқы мембраналарынан пайда болады [23]. Тазартылған OMVs ақуыз мазмұны осылайша сыртқы мембраналармен бөлісетінін анықтау үшін Н. гонорея, ішкі және сыртқы мембраналар үзіліссіз сахароза градиентті ультрацентрифугалау арқылы бөлінді. 10 және 5 фракциялары сәйкесінше сыртқы және ішкі мембраналар үшін байытылған, өйткені олардың құрамында сыртқы мембрана ақуыздары PorB және BamA (фракция 10) және ішкі мембрана ақуызы F болды.1β (5-бөлшек) (2А-сурет). Иммуноблот талдауы сыртқы мембрана ақуыздары, BamA және PorB, тазартылған OMV және сыртқы мембрана фракцияларында бар екенін растады, ал F1β ішкі мембрана фракцияларында анықталды, бірақ екі түрлі сыртқы мембрана фракцияларында жоқ. Н. гонорея штаммдар (2В-сурет). Бұл сыртқы мембрана ақуыздары OMV негізгі құрамдас бөлігі екенін растайды. Дегенмен, коллоидты кумассие бояуымен анықталған ақуыздардың салыстырмалы пропорциялары сыртқы мембрана мен OMV-тердің арнайы ақуыз құрамындағы айырмашылықтарды көрсетті (2C-сурет). Бұл әртүрлі ақуыздардың шамадан тыс көрсетілуін және таңдамалы болмауын қамтиды. Тұтастай алғанда, бұл OMV шығарғанын көрсетеді Н. гонорея ақуыздарды сыртқы мембранамен бөліседі, бірақ OMV-тердің салыстырмалы ақуыздық құрамы сыртқы мембранадан ерекшеленеді.

(A) Жалпы мембраналар Н. гонорея сахароза градиентті ультрацентрифугалау арқылы бөлінді және фракциялар сыртқы мембраналары және анти-F фракцияларын анықтау үшін анти-PorB және анти-БамА көмегімен зерттелді.1-β ішкі мембраналары бар. Әрі қарай талдау кезінде 10 және 5 фракциялары сәйкесінше сыртқы және ішкі мембраналық фракциялар ретінде пайдаланылды. (B) OMVs, сыртқы мембрана (OM), ішкі мембрана (IM), жалпы мембрана (TM) және тұтас бактериялық лизат (WBL) екі сыртқы мембраналық ақуыздар (BamA және PorB) және ішкі мембраналық ақуыз, F үшін зерттелді.1-β. (C) Белоктардың коллоидты кумассие бояуы Н. гонорея секрецияланған сыртқы мембраналық көпіршіктер (OMV), сыртқы мембрана (OM) және ішкі мембрана (IM). Молекулярлық өлшем маркерлерінің орны (kDa) сол жақта көрсетілген. PorB (36 кДа) OMV-де белоктардың оң жағында және үстінде жұлдызшалармен көрсетілген.

Тазартылған протеом Н. гонорея жасырын OMV

функциясы туралы түсінік алу Н. гонорея OMVs, біз масс-спектрометрия арқылы ақуыздың мазмұнын толығырақ анықтадық. Бұл тазартылған OMV-ге сенімділігі жоғары 110 ақуызды анықтады, бұл культура үстіңгі қабаттарынан алынған шикі OMV фракцияларындағы 291-мен салыстырғанда (S1 кестесі). Анықталған пептидтердің массалық спектрлерінің пайыздық үлесіне сүйене отырып, тазартылған OMV препаратында анықталған ең көп таралған 25 ақуыз (пептидтерге сәйкес келетін жалпы спектрлердің 75% құрайды) тізімделген және 3A-суретте көрсетілген. PorB пептидіне сәйкес келетін MS/MS спектрлері тазартылған OMV препаратында анықталған барлық ақуыздардың пептидті сәйкес спектрлерінің 35%-ға дейінін қосты және PorB спектрлік санауға негізделген ең басым ақуыз болды, одан кейін P.III және Opa (мөлдірлік) ақуыздары. Бұл танымал топ Н. гонорея сыртқы мембрана ақуыздарының көпшілігін құрады (

Барлық OMV алынған пептидті сәйкес спектрлердің 60%-ы (3А-сурет). OMVs құрамында адгезия ақуызы MafA, β-баррельді құрастыру аппараты BamA, жасуша бөліну белоктары FtsN және AmiC, сонымен қатар бірнеше периплазмалық ақуыздар (мысалы, SurA, NlpD, NlpA және металлопептидаза) қосымша сыртқы мембраналық ақуыздар бар. GroEL, 30S рибосомалық ақуыз S2 және ұзарту факторы Tu сияқты өте мол цитоплазмалық ақуыздар болды (3A-сурет, S1 кесте). Сонымен қатар, біз тазартылған OMV-де 10 сипатталмаған ақуызды анықтадық (S1 кестесі). Керісінше, шикі OMV фракциясында пили мен фимбриялардың түзілуіне, трансляция және транскрипция механизміне, тасымалдауға, сондай-ақ темірді байланыстыратын ақуыздарға және цитозолдық каталазаға байланысты қосымша ақуыздар бар (S1 кестесі).

(A) тазартылған протеом Н. гонорея Пептидтерге сәйкес келетін спектрлерге негізделген LC-MS/MS салыстырмалы көптігімен анықталған MS11-A OMVs. (B) Тазартылған және шикі OMV-де анықталған ақуыздар санының болжамды субклеткалық локализациясы. (C) Анықталған пептидтердің салыстырмалы көптігіне негізделген тазартылған және шикі OMV-де анықталған ақуыздардың болжамды субклеткалық локализациясы. (D) SignalP v.4.1 талдауына негізделген тазартылған және шикі OMVs құрамында сигналдық пептидтер бар ақуыздардың салыстырмалы пайызы. (E) Тазартылған OMV құрылғыларындағы барлық анықталған ақуыздар WebMGA серверін пайдаланып COG дерекқоры негізінде функционалды түрде жіктелді.

Протеиннің субклеткалық локализациясының салыстырмалы талдауы OMV тазартудан кейін 100-ге жуық цитоплазмалық ақуыздар алынып тасталатынын көрсетті (3B және S2-кесте суреті). Сондай-ақ, тазартылған OMV-де шикі фракциялардағы 24 ішкі мембраналық ақуыздармен салыстырғанда тек бір болжамды ішкі мембраналық ақуыз («сульфатаза» ретінде түсіндірілетін D1DJS8) анықталды (3B және S1-кесте суреті). Сол сияқты, тазартылған және шикі OMV препаратында сәйкесінше белгісіз субклеткалық локализацияның 6 және 16 ақуыздары анықталды (3B-сурет). Сонымен қатар, анықталған пептидтердің салыстырмалы көптігіне негізделген тазартылған және шикі OMV-де анықталған ақуызды субклеткалық локализациялауға арналған аннотация тазартылған OMV препараттарындағы ақуыздардың көпшілігі жалпы OMV протеомының 55% құрайтын сыртқы мембраналардан алынатынын көрсетті. Атап айтқанда, сыртқы мембраналық ақуыздар шикі OMV препаратында анықталған жалпы ақуыздардың тек 33% құрады (3C-сурет). OMV тазарту сонымен қатар канондық секреция сигналдары бар ақуыздың салыстырмалы көптігін арттырды (шикі OMV препараттарындағы 28% салыстырғанда 38%) (3D-сурет). Ақырында, тазартылған OMV-де анықталған ақуыздардың көпшілігі жасуша қабырғасының, мембрананың және конверттің биогенезіне қатысады деп болжанған (3E-сурет). Бірге алғанда, біздің деректеріміз жоғары тазартылған OMV құрылғыларын көрсетеді Н. гонорея құрамында PorB қоса, сыртқы мембрана ақуыздарының көп мөлшері бар және әдетте шикі культураның үстіңгі қабаттарынан алынған OMV-мен байланысты цитоплазмалық және ішкі мембрана ақуыздарының төмендеген деңгейлерін көрсетеді.

PorB мембранамен байланысты Н. гонорея OMV

PorB тазартылған OMV-де табылған негізгі ақуыз екенін анықтағаннан кейін, біз оның бүктелгенін және OMV мембранасымен байланыстырылғанын немесе көпіршіктердің ішінде ашылмаған аминқышқылдар тізбегі ретінде оралғанын зерттедік. Бұл үшін бүкіл бактериялық жасушаларда және тазартылған OMV-лердегі PorB локализациясы жоғары ажыратымдылықтағы микроскопия (тікелей-стохастикалық оптикалық қайта құру микроскопиясы — dSTORM) арқылы анықталды. Күтілгендей, PorB бір молекулалық сигналдары сыртқы мембрананың локализациясына сәйкес келетін тұтас бактериялық жасушалардың шетіне шоғырланған (4А-сурет). Сол сияқты, PorB OMV құрылғыларында анықталды, оның көмегімен үлкенірек везикулалар (шамамен 100 нм диаметрі) сақина тәрізді құрылымдарды көрсетті (4А-сурет). PorB таңбаланған OMVs бойынша флуоресцентті сигнал қарқындылығын талдау мембрана локализациясына сәйкес келді (4А-сурет). Дегенмен, OMV-лердің көпшілігі шағын өлшемге және шектеулі ажыратымдылыққа байланысты нақты мембраналық бояуды көрсетпеді (4А-сурет). Осылайша, PorB локализациясы анти-PorB сарысуымен иммуногольдты таңбалаудан кейін TEM арқылы анықталды. Ультра жұқа кесінділердің электронды микроскопиясы PorB ішіндегі сыртқы мембрана локализациясына сәйкес болды Н. гонорея (Cурет 4B). Сол сияқты, алтын бөлшектері, ең алдымен, OMV-нің люминальды мазмұнымен емес, мембраналармен байланысты (4В-сурет).

(A) Ажыратымдылығы жоғары микроскопия (dSTORM). Н. гонорея (сол жақта) және сыртқы жарғақша көпіршіктері (ортаңғы және оң жақ ұлғайтылған) PorB қарсы сарысумен зерттелген. Оң жақтағы панель везикулалар арасындағы сызық бойымен флуоресценция қарқындылығын көрсетеді. Масштаб жолағы = 500 нм. B) Трансмиссиялық электронды микроскоп Н. гонорея (сол жақ панель) және OMV (оң жақ панель) 10 нм-алтын конъюгацияланған антиденелерді пайдаланып PorB үшін зерттелді. Алтын бөлшектерінің бактериялар мен везикулалар бетінің айналасындағы таралуы көрсеткі арқылы көрсетілген. Масштаб жолағы = 0,2 мкм. (C) Қайнатылған және қайнатылмаған тазартылған OMV көрсетілгендей жуғыш заттың концентрациясының жоғарылауымен (натрий додецил сульфаты, SDS) ерітілді және жартылай жергілікті гельдік электрофорезден кейін коллоидты кумасси бояуымен талданды. Мономерлі және жоғары ретті молекулалық салмақты PorB ақуыз кешені көрсеткілермен көрсетілген. (D) OMV және оқшауланған бактериялық жалпы мембраналардың иммуноблоттық талдауы Н. гонорея жартылай табиғи гель электрофорезінен кейін PorB үшін көрсетілгендей жуғыш заттың (SDS) жоғарылау концентрациясымен. Мономерлі (ѳ) және жоғары ретті молекулалық салмақты PorB ақуыз кешені (*) көрсетілген.

Содан кейін біз PorB OMV-де ақуыз кешені ретінде бар-жоғын анықтадық, бұл жақында сыртқы мембранада көрсетілгендей. Н. гонорея [15]. PorB ақуыз кешені (

75 кДа) OMV және жалпы мембраналық фракцияларда коомассиялық бояудан немесе иммуноблот талдауынан кейін жартылай жергілікті полиакриламидті гель электрофорезі арқылы оңай анықталды (4C және 4D-сурет). Күтілгендей, SDS концентрациясының жоғарылауы немесе талдау алдында қайнау OMV және жалпы мембраналық фракциялардан бөлінген PorB кешенін оның мономерлік түріне (36 кДа) диссоциациялады (4C және 4D-сурет). Бұл PorB сыртқы мембранада байқалғандай OMV-де ұқсас табиғи конформацияны қабылдайтынын көрсетеді. Н. гонорея.

Жасырын OMVs макрофагтардағы митохондрияларды PorB бағыттауға мүмкіндік береді

PorB OMV-де мол ақуыз болғанын және сүтқоректілердің жасушаларында PorB-тің эктопиялық экспрессиясы митохондриялардың локализациясына әкелетінін ескере отырып, біз Н. гонорея везикулалар митохондриялар поринді тасымалдауға мүмкіндік берді. Ол үшін біз сүйек кемігінен алынған макрофагтарды (BMDM) аштық Н. гонорея тазартылған OMV және конфокальды микроскопия арқылы PorB сыртқы митохондриялық мембрана ақуызы Tom20-мен бірге локализациясы анықталды. Ерте уақыт нүктелерінде (2, 4 және 8 сағат) PorB негізінен перинуклеарлы аймақтарға локализацияланған, Tom20-мен бірге локализацияның аз дәлелдері бар (5А-сурет). Өңдеуден кейінгі 12 және 24 сағат ішінде PorB нүктелі түрде қалғанымен, ол бүкіл ұяшыққа тарады (5А-сурет). Осы уақыт нүктелерінде PorB сигналы митохондрияларға жақын жерде пайда болды, бірақ конфокальды микроскопия арқылы Tom20-мен ішінара локализацияға әкелді (5А-сурет). Ұқсас нәтижелер адамның THP-1 макрофагтарымен де алынды, соның арқасында PorB OMV әсерінен кейін митохондрияларға жақын жерде нүктелі үлгіде анықталды (S1 сурет). Мақсатты митохондрия болуы мүмкін PorB төмен деңгейлерін анықтауды арттыру үшін митохондриялық желі dSTORM көмегімен жоғары ажыратымдылықтағы микроскопия арқылы одан әрі визуалды. OMV өңделген BMDM-де PorB өңдеуден кейінгі 12 сағатта Tom20 боялған митохондриялық желіге дискретті патчтар ретінде локализацияланған (5В-сурет). Жылдам 3D бейне жылдамдығын пайдаланып, өте жоғары ажыратымдылықтағы бір молекулалы локализация Tom20 бояуына негізделген сыртқы митохондриялық мембраналарды шешті (5C-сурет). Сонымен қатар, PorB молекулалары Tom20 боялған мембрана ішіне ендірілді (Cурет 5C). Тағы да PorB сигналы митохондриялық мембранада шашырағанша емес, әртүрлі кластерлерде қалды. Бұл OMVs PorB-ді тікелей митохондрияға бағыттай алады деп болжайды. Осымен келісе отырып, біз макрофагтардың цитозолында OMV-лерді өңдеуден кейін 24 сағатта электронды микроскопия арқылы байқадық, өйткені OMV-де қоршаған негізгі мембраналар жоқ (6А-сурет). Сонымен қатар, OMV митохондрияларға жақын жерде анықталды (6В-сурет), ал OMV және митохондриялардың мембраналары PorB үшін оң боялған (6C-сурет). Қалған цитоплазмадан митохондриялардың шикі фракциясы одан әрі PorB митохондриялармен байланысты екенін көрсетті (6D-сурет). Электрондық микроскоп арқылы байқалғандай, PorB үлесі қалған цитоплазмалық фракциямен байланысты болды (6D-сурет). Бір қызығы, PorB бағытталған митохондрия тек мономерлі болды, оны жартылай жергілікті полиакриламидті гель электрофорезі дәлелдейді (6D-сурет). Қалған цитоплазмалық фракциядағы PorB термиялық өңдеуге сезімтал олигомерлі кешен ретінде анықталды (6D-сурет). Осылайша, біз OMVs PorB-ті митохондрияға және ықтимал басқа OMV жүк ақуыздарына тікелей тасымалдауы мүмкін деп болжадық. Шынында да, біз OMV-мен өңделген BMDM-тердің митохондриямен байытылған фракциясында BamA-ны анықтадық (6D-сурет). Митохондриялардың OMV мақсаттылығын имитациялау үшін біз өңделмеген BMDM-ден митохондрияларды бөліп алдық және оларды тазартылған OMV-мен инкубацияладық. in vitro. OMV-мен өңделген жасушаларда байқалғандай, оқшауланған митохондриялармен бөлінген PorB және BamA анықталатын үлесі in vitro, бірақ митохондриялар болмаған кезде түйіршіктеу мүмкін болмады (6E-сурет). Бұл соны болжайды Н. гонорея OMV макрофагтардың цитозолына бағытталған және PorB және басқа OMV ақуыздарын жеткізу үшін митохондриялармен тығыз байланысады.

(A) Сүйек кемігінен алынған макрофагтар (BMDM) тазартылған заттармен өңделген Н. гонорея OMV және көрсетілген уақытта PorB (қызыл) және Tom20 (жасыл) локализациясы үшін конфокальды лазерлік сканерлеу микроскопиясы арқылы талданған. Ядроларды көру үшін жасушалар DAPI (көк) бояуымен боялған. Масштаб жолағы = 10 мкм. Үш биологиялық үлгідегі 200-ден астам жасушаның репрезентативті суреттері. (B) 12 сағат бойы тазартылған OMV-мен өңделген BMDM-лер PorB (қызыл) және Tom20 (жасыл) локализациясы үшін RapidSTORM қайта қалпына келтірілген қос түсті жоғары ажыратымдылықты бейнелеу арқылы талданды. (C) OMV өңделген BMDMs (12 сағат) анти-PorB (жасыл) және Tom20 (қызыл) антиденелерімен зерттелді және 3D бір молекулалы локализацияның аса ажыратымдылықтағы микроскопиясы арқылы талданды.

(A, B және C) Сүйек кемігінен алынған макрофагтар (BMDM) тазартылған препараттармен өңделген. Н. гонорея 24 сағат бойы OMV және теріс бояу арқылы трансмиссиялық электронды микроскопиямен және PorB-ға қарсы (C) 10 нм-алтын конъюгацияланған антиденелер арқылы кескінделген. (D) Шикі митохондриялар (P) және цитоплазмалық фракциялар (S) OMV өңделген BMDM-ден алынды және PorB және BamA және митохондрияларға (Tim23, Tom40 және F) талдау жасалды.1β) және цитозолик (GAPDH) маркерлері жартылай табиғи гель электрофорезінен кейін иммуноблоттық талдау арқылы.(E) Митохондриямен байытылған фракциялар тазартылған OMV немесе PBS көмегімен инкубацияланды және кейінгі супернатант (S) және түйіршіктер (P) фракциялары SDS гель электрофорездерінен кейін анти-PorB, BamA және Tim23 антиденелерімен иммуноблоттау арқылы талданды.

Макрофагтарға бағытталған PorB OMV биогенезіне байланысты

OMV биогенезі нашар сипатталған, бірақ қазір бірнеше зерттеулер везикулярлық секреция жылдамдығына әсер ететін бактериялық факторларды анықтады [23]. Ішінара OMV биогенезі сыртқы мембрананың астындағы пептидогликанмен әрекеттесуіне байланысты. Осылайша, біз гендік өнім деп пайымдадық Н. гонорея NGFG_01788 OMV биогенезіне әсер етуі мүмкін, өйткені оның құрамында көмірсутекті байланыстыратын лизин мотиві (LysM) бар және тазартылған OMV-де оңай анықталуы мүмкін (3A-сурет). NGFG_01788 генетикалық жойылуы әсер еткен жоқ Н. гонорея бай қоректік орталарда өсуі немесе диплококктардың түзілуі (7А және 7В-сурет). NGFG_01788 мутанттары да OMV түзді, бірақ OMV-делдалдық PorB секрециясы ата-аналық жабайы типті штамммен салыстырғанда 40%-ға төмендеді, бұл OMV-дан алынған кумассиге боялған PorB және тұтас жасуша лизатының фракциялары арқылы анықталған (7C және S2A суреті). OMV биогенезінің төмендеген жылдамдығы (S2B сурет). Содан кейін біз жабайы типті және мутантты бактерияларды BMDM-ден физикалық бөлуге мүмкіндік беретін, бірақ кішкентай везикулалардың еркін қозғалуына мүмкіндік беретін трансвеллдерде инкубацияладық. 24 сағаттан кейін біз макрофагтарды жинадық және конфокальды микроскопия арқылы PorB локализациясын анықтадық. Тазартылған OMV-де байқалғандай, біз PorB-ті BMDM-дегі митохондрияларға жақын жерде нүктелі түрде анықтай алдық (7D-сурет). Жабайы түрімен салыстырғанда Н. гонорея, PorB NGFG_01788 мутантымен инкубациялаудан кейін BMDM-де төмендетілген жылдамдықпен анықталды (7F-сурет). Бұл соны көрсетеді Н. гонорея бактериялық тіркеме болмаған кезде PorB-ті жасушаларға жеткізе алады және бұл OMV биогенезіне байланысты екенін көрсетеді.

(A) Жабайы типті (WT) және ΔNGFG_01788 жою мутанты GC медиасында өсірілді және өсу 600 нм оптикалық тығыздықпен бақыланды. Үштік тәжірибеден орташа және стандартты ауытқу. (B) Диплококктар мен OMV секрециясын көрсететін ΔNGFG_01788 мутантының трансмиссиялық электронды микроскопиясы. (C) Тазартылған OMV және тұтас бактерия лизаттары SDS гель электрофорезінен кейін кумасси бояуымен және денситометрия арқылы анықталған тұтас бактерия жасушаларына қатысты OMV ішіндегі PorB мөлшері талданды. Мутантта PorB салыстырмалы OMV-делдалдық секрециясы жабайы типтегі деңгейлерге негізделген (100%). Үш тәуелсіз эксперименттен орташа және стандартты ауытқу көрсетілген. (D) BMDM жабайы түрімен инкубацияланды Н. гонорея немесе (E) трансвеллалардағы ΔNGFG_01788 мутант және 24 сағаттан кейін иммунофлуоресценттік талдау арқылы PorB (қызыл) және Tom20 (жасыл) локализациясы үшін талданған. DAPI (көк) жасуша ядросын көрсетеді. (F) PorB сигналдарының саны (puncta) >100 ұяшықтарынан және екі тәуелсіз эксперименттен сандық түрде анықталды.

Н. гонорея OMV макрофагтардың апоптозын тудырады

OMV-ден алынған PorB митохондрияға бағытталғанын ескере отырып, біз келесіде OMV ұшыраған BMDM-лердің митохондриялық денсаулығын анықтадық. Бұл үшін BMDMs әртүрлі OMV концентрацияларымен өңделді және митохондриялық белсенділік T (3[4, 5 диметилтиазол-2-ил]-2, 5-дифенилтетразолий бромиді (MTT) азаюы арқылы өлшенді. Көлікті бақылаумен (PBS) салыстырғанда. өңделген BMDMs, 20 және 40 мкг/мл тазартылған OMV әсеріне ұшыраған жасушалар метаболикалық белсенділіктің айтарлықтай төмендегенін көрсетті (66,62% +/- 5,34 және 57,29% +/-3,04, тиісінше p<0,05) (8А-сурет). TMRM бояуымен анықталғандай, OMV өңделген BMDM-де 50%-ға төмендеді (8В-сурет).PorB-ның митохондрияға ауысуы және ΔΨm диссипациясы OMV экспозициясының цитохромға әкеліп соқтырмағанын әрі қарай зерттеуге әкеледі. в ішкі апоптозды босату және белсендіру. Күтілгендей, цитохром в өңделмеген BMDM-де цитозол емес, фракциялары бар митохондрияларда табылды (8C-сурет). Керісінше, апоптозды индукциялайтын стауроспоринмен (СТС) емдеу цитохромды тудырды. в цитозольге шығарылады (8С-сурет). Сол сияқты цитохром в OMV-мен өңделген BMDM-де цитозолдық фракциямен айтарлықтай байланысты болды, ал ішкі митохондриялық мембрана ақуызы, TIM23, митохондриялық фракциялармен байланысты болып қалды (8C-сурет).

(A) өңделген BMDMs Н. гонорея OMV (20 және 40 мкг/мл) 48 сағат бойы PBS өңделген жасушаларға қатысты жасуша өміршеңдігін және митохондриялық белсенділікті анықтау үшін MTT талдауымен талданды. 3 тәуелсіз эксперименттің орташа және SD мәні көрсетілген (жұлдызшалар p<0,01 көрсетеді). (B) BMDMs TMRM белгісімен белгіленді және PBS өңделген жасушалармен салыстырғанда митохондриялық мембрана потенциалын (ΔΨm) анықтау үшін 48 сағат бойы тазартылған OMV (40 мкг/мл) өңделген. 500-ден астам жасушалары бар үш еселенген биологиялық үлгілерді қамтитын үш тәуелсіз эксперименттен алынған орташа және SD (жұлдызшалар p<0,001 көрсетеді). (C) BMDM 24 сағат бойы ставроспоринмен (STS), OMVs және PBS-пен өңделген және митохондриялар мен цитозолдық фракция цитохромға иммуноблоттау арқылы талданған. в және Тим23. Антицитохромнан алынған бейспецификалық (NS) жолақ в антидене жүктеу үшін бақылау ретінде пайдаланылды. (D) BMDMs PBS, OMVs, STS, ABT-737 және циклогексимидпен (CHX) 24 сағат бойы өңделген және бөлінген каспаза-3 (p17 кДа) үшін иммуноблоттау арқылы талданған. Anti-PorB және антитубулин сәйкесінше OMV өңделген жасушалар мен жүктеу үшін бақылау ретінде пайдаланылды. Үш тәуелсіз эксперименттің деректерінің өкілі. (E) Денситометрия арқылы D панелінен бөлінген каспас-3 (р17 кДа) мөлшерін анықтау. Көрсетілген үш тәуелсіз эксперименттен алынған орташа және SD. (F) OMV өңделген BMDM өлі жасушалардың ядроларын бояу үшін Draq7 (көк) көмегімен инкубацияланды және уақыт аралығымен бейнелеу арқылы талданды. Уақыт шеңберлері көрсетілген. Көрсеткілер ұяшықтарды көрсетеді. Масштаб жолағы = 100 мкм.

Цитозолдық цитохром в протеолитикалық ыдырауды және жасуша өлімін орындаушы каспастардың, каспаз-3 және 7-нің белсендірілуін тудырады. Жіктелген каспаза-3 тек STS және циклогексимидпен (CHX) өңдеуден кейін BMDM-де анықталды, апоптоздың белгілі индукторлары, бірақ PBS бақылауымен өңделген жасушаларда емес ( 8D-сурет). Сол сияқты, OMV экспозициясы PorB бар BMDM-де каспаза-3-тің бөлінуіне себеп болды (8D-сурет). Каспаза-3 белсендірілуіне сәйкес, апоптоздық өлімге тән мембраналық қан кету BMDM-терді OMV-мен инкубациялаудан кейін шамамен 15 сағаттан кейін анықталды (8F-сурет). BMDM-терді OMV және STS-пен бірге өңдеу апоптозды индукциялау үшін синергетикалық әсер ететінін көрсететін ыдыраған каспаза-3 деңгейлерін одан әрі арттырды (8D және 8E-сурет). Сол сияқты, OMVs CHX қатысуымен бөлінген каспаза-3 деңгейінің жоғарылауын тудырды, бұл кем дегенде бір хост ақуызының синтезі осы жағдайларда апоптоз сигналын шектей алатынын көрсетеді (8D және 8E-сурет). Бұл митохондрия арқылы жүретін апоптозды болдырмайтын BCL-2 отбасы мүшелеріне тәуелді екенін тексеру үшін BMDM BCL-2, BCL-XL және BCL-W ақуыздарын тежеу ​​үшін ABT-737-мен өңделген. Жақында көрсетілгендей [31], ABT-737 өзі қосылысқа төзімді өмір сүруді қамтамасыз ететін BCL-2 протеиндерінің болуына байланысты каспаза-3 бөлінуіне әкелмеді. Дегенмен, ABT-737 OMV өңделген макрофагтарда (8D және 8E суреті) каспаза-3 бөлінуінің жоғарылауына әкелді, бұл Н. гонорея OMV макрофагтармен қабылданады және митохондриялық зақымдануды және BCL-2 делдалымен апоптозды тудырады.

Құрамында OMV бар PorB уақыт өте келе митохондриялық зақымдануды және апоптозды тудырады

Уақыт өте келе бір жасуша деңгейінде макрофагтар мен митохондриялық денсаулықты қадағалау үшін біз флуоресцентті пропорцияларды пайдалана отырып, TMRM флуоресценциясы арқылы жасушалық морфологияны, митохондриялық мембрана әлеуетін (ΔΨm) визуализациялауға мүмкіндік беретін OMV өңделген BMDM-нің уақыт аралығымен бейнелеуін орнаттық. және макрофагтардың өміршеңдігі нақты уақытта мембрана өткізбейтін ДНҚ бояуымен, Draq7 арқылы бояу арқылы. PBS өңделген BMDMs әр 30 минут сайын 48 сағат бойы бейнелеу кезінде өміршең болып қалды (> 90% Draq7 теріс және TMRM оң) (9А және 9В-сурет). Керісінше, OMV-мен өңделген BMDM-тердің 40%-ы 10 сағат ішінде TMRM сигналын жоғалтты (9B және S1 және S2 бейнелері суреті). OMV экспозициясы сонымен қатар емдеуден кейін 15 сағаттан кейін плазмалық мембрананың жарылуына және макрофагтардың өліміне себеп болды (9А-сурет). Апоптотикалық өлімге сәйкес өлі макрофагтардың көпшілігі каспаза-3/7 белсенділігін көрсетті (9C және S1 бейне суреті). Айта кету керек, каспас-3/7 белсенділігі Draq7 бояуынан айырмашылығы (48 сағат бойы тұрақты) өтпелі (1-2 сағат) және осылайша ұзақ уақыт аралығында емес, әр уақыт шеңберіндегі белсенді каспастары бар жасушалардың санын көрсетеді. уақыт. Бір жасушалық талдау макрофагтардың өлімінен бұрын TMRM сигналының және каспаза-3/7 белсенділігінің жоғалуынан болатынын растады (S3 сурет). Сонымен қатар, апоптотикалық каспазаның белсенділігін тежейтін Q-VD-PH (QVD) пан-каспаза ингибиторы BMDM-де OMV индукцияланған жасуша өлімінің және каспаза-3/7 белсенділігінің алдын алды, бірақ ΔΨm жоғалтпады (9A, 9B және сурет). 9C).

PBS-пен өңделген BMDMs, Н. гонорея тазартылған OMV және пан-каспаза тежегіші Q-VD-PH (QVD) (A) жасуша өлімін (Draq7 оң жасушалар), (B) митохондриялық мембрана потенциалын ( ΔΨm, TMRM оң жасушалар) және (C) каспаза-3/7 белсенділігі (каспаза фторогенді субстрат оң жасушалар). Орташа мәннің орташа және стандартты қателігі (SEM) үш еселенген биологиялық үлгілерді қамтитын үш тәуелсіз эксперимент үшін көрсетілген.

PorB макрофагтарда апоптозды қоздыру үшін жеткілікті

OMV құрамында 100-ден астам ақуыз бар екенін ескере отырып, біз PorB апоптозды тудыратын негізгі бактериялық фактор екенін растағымыз келді. Біз PorB-ді индукциялық түрде азайта алмадық немесе азайта алмадық Н. гонорея, геннің маңызды екендігі туралы түсінікке сәйкес келеді [16]. Балама ретінде, біз доксициклиннің индукцияланатын промоторы астында HeLa жасушаларында табиғи PorB-ны эктопиялық түрде экспрессияладық (себебі ұқсас тәсілдер макрофагтарда сәтсіз болып қалды). PorB доксициклин индукциясынан кейін 2 сағат ішінде Tom20 митохондриялық маркерімен бірге локализацияланған және анықталатын PorB бар жасушаларда 8 сағатқа митохондриялық фрагментацияны тудырды (S4A сурет). PorB экспрессиясы OMV өңдеуден кейін байқалғандай каспаза-3 бөлінуін тудырды (S4B сурет). Каспаза-3 ыдырауы доксициклин немесе құрамында плазмидтер бар PorB болмаған кезде анықталмады (S4B сурет). Біз сондай-ақ PorB мономерлік ақуыз ретінде анықталатынын немесе олигомерлі кешен түзетінін анықтадық. Біз тек OMV емінен кейін митохондриямен байланысты PorB-ге ұқсас мономерлі ақуыз ретінде эктопиялық экспрессиялық табиғи PorB-ны анықтадық (S4C сурет). Бұл PorB апоптозды индукциялау үшін жеткілікті екенін көрсетеді және PorB митохондрияларда олигомерлік емес, мономерлі конформацияны қабылдайтынын көрсетеді.

OMV жеткізілген PorB апоптозды тудыруы мүмкін екенін қосымша тексеру үшін біз білдірдік Н. гонорея PorB патогенді емес ішек таяқшасы. Электрондық микроскопия PorB-дан алынған OMV экспрессиясын көрсетті Е. coli (т.б PorB OMV) құрамында байқалғандай мембранамен байланысты пориндер бар Н. гонорея тазартылған OMV (сурет 10A және 10B). BMDM-мен емдеу т.б PorB OMV макрофагтардың 15 сағаттық кешігуден кейін өлуіне себеп болды Н. гонорея OMV (Cурет 10C). т.б PorB OMV сонымен қатар имитациялайтын апоптотикалық каспазаларды белсендіруді тудырды Н. гонорея OMV (сурет 10D). Қайта, Е. coli OMV (т.б PorB жетіспейтін OMVs) макрофагтардың өлімінің төмен жылдамдығын және уақыт өте келе каспаза-3/7 белсендіруін тудырды (сурет 10C және 10D). Бірге бұл соны көрсетеді Н. гонорея OMV-ді жасушаларға PorB трафигі және макрофагтарда митохондрия арқылы апоптозды индукциялау үшін пайдаланады.

(А және В) Н. гонорея PorB түрінде көрсетілген Е. coli және OMVs Е. coli (Ec OMV) және PorB өрнектері Е. coli (Ec PorB OMV) трансмиссиялық электронды микроскопия және анти-PorB иммуноголды таңбалау арқылы талданған. (C және D) BMDMs PBS және OMVs көмегімен өңделген Н. гонорея (Ng OMV), PorB өрнектеу Е. coli (Ec PorB OMV) немесе басқару Е. coli (Ec OMV) және (C) жасуша өлімі (Draq7) және (D) каспаза-3/7 белсенділігі (фторогенді субстрат) тірі жасушаларды бейнелеу арқылы 48 сағат бойы әрбір 30 минут сайын анықталды. Үш биологиялық қайталанатын екі тәуелсіз тәжірибенің орташа және стандартты ауытқуы көрсетілген.


МАТЕРИАЛДАР МЕН ТӘСІЛДЕР

Оқу дизайны.

Бұл кірістірілген зерттеу үшін біз HC-АИВ зерттеуіне 18-35 жас аралығындағы АИТВ жұқтырмаған қатысушылардың үлгілері мен деректерін пайдаландық (n = 823) Уганда мен Зимбабведегі отбасын жоспарлау клиникаларынан (7) тіркелген. Кірістірілген зерттеуге АИВ-инфекциясын жұқтырған 199 әйел (51 Уганда және 148 Зимбабве) кірді, олар АИВ-инфекциясының сероконверсиясы құжатталғанға дейін зерттеу сапары кезінде іріктелді (орташа 3 ай). Бұл үлгілер 6 айлық бақылау кезінде АИТВ жұқпаған 633 бақылау өкілдерінің (160 Уганда және 473 Зимбабве) үлгілерімен сәйкестендірілді. Мұнда зерттелген когорттың популяциялық сипаттамалары басқа жерде егжей-тегжейлі берілген (66). Қысқаша айтқанда, контрацепция тобын белгілеу әйелдердің алдыңғы зерттеу сапары мен таңдалған сапары арасындағы уақыт ішінде пайдаланған контрацепцияның негізгі әдісіне негізделген. Гормоналды емес контрацептивтер (HC жоқ) тобындағы әйелдер тек презервативтерді қолданған немесе контрацепция қолданбаған. зерттеу клиникалық DMPA (150 & # x000a0mg сайын 3 & # x000a0months айдалады) немесе COC (30 & # x000a0 & # x000b5g этинилэстрадиола [EE] және 150 & # x000a0 & # x000b5g левоноргестрел) немесе алынған гормоналдық контрацептив пайдалануға таңдады Әйелдер. Барлық әйелдерден жатыр мойны жағынды үлгісін алудан 48 сағат бұрын жыныстық қатынастан бас тарту сұралды. Менструальды қан кету кезінде үлгілер алынбады және жағынды алу кезінде борпылдақ жатыр мойны/көрінетін қан сирек тіркелді.

Жағдайлар мен бақылаулар зерттеу орны, жасы, құрама жыныстық жолмен берілетін инфекция (ЖЖБИ) айнымалысы (төменде қараңыз) және зерттеу уақыты бойынша сәйкестендірілді, әр жағдай үшін 4 сәйкес бақылауға дейін. Егер қатысушыға диагноз қойылған болса, композиттік STI айнымалысы 1-ге орнатылды C. trachomatis, N. гонорея (екеуі де ПТР арқылы расталған) немесе АИВ-инфекциясы анықталған сапарда немесе алдыңғы бару кезінде (соңғы АИТВ-теріс келу) бактериялық вагиноз (BV) болған. Екі бару кезінде де осы 3 жағдайдың барлығына теріс сыналған әйелдер үшін ЖЖБИ құрама айнымалысы 0-ге орнатылды. Құрама ЖЖБИ айнымалысы арнайы патогендердің өзара әрекеттесуін анықтау үшін емес, экспозицияны бақылау үшін таңдалды.

Этикалық мәлімдеме.

Зерттеу Дүниежүзілік Медициналық Ассоциацияның Этика кодексіне (Хельсинки декларациясы) сәйкес жүргізілді. Ата-аналық HC-АИТВ зерттеуі субъектілердің ақпараттандырылған келісімімен және Құрама Штаттардағы және Африкадағы қатысушы мекемелердегі адам зерттеуі үшін Институционалдық шолу кеңесінің мақұлдауымен жүргізілді. Биомаркерді зерттеу хаттамасы FHI 360 халықаралық зерттеу этикасының кеңсесі мен Бригам мен әйелдер ауруханасының институционалдық шолу кеңесінен адамдық емес тақырыпты анықтауды (идентификацияланған деректерді пайдалану) алды.

Инфекцияның клиникалық және зертханалық диагностикасы.

CVI-сіз мәртебе зертханалық диагностикаланған инфекцияның жоқтығы ретінде анықталды. CVI зертханалық диагностикасы үшін ПТР (Roche Amplicor) енгізілген C. trachomatis және N. гонорея, қарапайым герпес вирусы 2 (HSV-2) үшін антидене ферментімен байланысты иммуносорбенттік талдау (ELISA), дымқыл қондырғы T. vaginalis және Candida, және BV үшін Nugent ұпайы. АИТВ-теріс статус ПТР әдісімен анықталды.

Клиниканың клиникалық белгілері физикалық тексеру кезінде дәрігер келесі белгілердің кез келгенін тіркеген кезде оң (+) деп анықталды: вульваның қабынуы немесе жаралары сары/жасыл, ақ/кілегейлі/сұр немесе аралас қынаптан бөліну оң иіс сынағы. қынап эпителийінің анормальды жасушаларының болуы жатыр мойны эпителийінің немесе сары/жасыл жатыр мойны шырышының болуы.

CVI белгілері туралы ақпарат құрылымдық сұхбат арқылы алынды, оның барысында субъектілерден жыныстық қатынас кезінде қалыптан тыс қынаптық бөліністер, жыныс мүшелерінің қышуы, іштің төменгі бөлігінің ауыруы немесе ауыруы сұралды және оларға жауап беру нұсқалары берілді. #x0201cno,” немесе 𠇍on’’’’.” Қынаптан қалыптан тыс бөліну, жыныс мүшелерінің қышуы, іштің төменгі бөлігіндегі ауырсыну немесе жыныстық қатынас кезінде ауырсыну хабарланғанда, белгілер оң (+) ретінде анықталды. Менструация арасындағы қан кету CVI симптомы ретінде қарастырылмады. Бұл талдау үшін жоғарыда аталғандардың барлығына "жоқ" деп жауап бергендер ғана симптомсыз деп саналды ("білмеймін" деп жауап бергендер алынып тасталды).

Жатыр мойны иммунитетінің биомаркерлері.

Жатыр мойны иммунитетінің биомаркерлері үшін біз Amplicor лизис буферінде (Roche Diagnostics) жиналған және бұрын сипатталғандай өңделген жатыр мойны Dacron жағындыларын қолдандық (67).

Сегіз биомаркер (IL-1β, IL-1RA, IL-6, IL-8, RANTES, MIP-3α, VEGF және sICAM-1) бір уақытта Meso Scale Discovery (MSD) мультиплекс платформасы арқылы өлшенді және Sector Imager 2400 (MSD, Gaithersburg, MD). Бұл MSD анықтау платформасы дәстүрлі ELISA (68) салыстыру арқылы халықаралық стандарттарды пайдалана отырып, цитокиндерді қалпына келтірудің дәлдігі мен дәлдігі үшін расталған және үлкен клиникалық когорттардағы барлық сегіз биомаркер үшін жоғары клиникалық мазмұнның жарамдылығын көрсетті (69,�). MSD 8-plex шығарылған жатыр мойны жағынды үлгілерінің сызықтық концентрациясы диапазонында әрбір биомаркерді анықтауға мүмкіндік беру үшін арнайы әзірленген және оңтайландырылған. SLPI және BD2 ELISA әдісімен өлшенді (Rɭ Systems, Minneapolis, MN компаниясының Quantikine human SLPI талдауы және Phoenix Pharmaceuticals, Inc., Burlingame, CA компаниясының адам 'x003b2-дефензин 2 талдауы).

Әрбір үлгі екі данада сыналған және орташа мән Пирс бицинхонин қышқылы (BCA) ақуыз талдауын (Fisher Scientific, Pittsburgh, PA) пайдаланып қайталанатын өлшеу нәтижесінде алынған орташа миллиграмм жалпы ақуыз концентрациясына қалыпқа келтірілді. ELISA және BCA талдаулары Victor2 оқу құралының көмегімен оқылды (PerkinElmer, Boston, MA). Осы әдіспен алынған қайталанатын мәндердің өзгеру коэффициентінің (CV) пайыздары 㰐% болды. Сызықтық диапазондағы мәндерді көрсететін сапаны бақылау үлгісі пулы аликвоттарға бөлінді және бір аликвот барлық иммундық талдаулар мен ақуыздар үшін пластина аралық вариациясын көрсететін әрбір талдау тақтасында сыналды. Amplicor лизис буферінің және сыналатын ақуыздардың белгілі концентрациялары бар еріткіштің шағылысуы таңдалған ең төменгі үлгі сұйылтуларында талдау кедергілерінің жоқтығын растады (MSD 8-плекс үшін 2 есе, SLPI үшін 80 есе және BD2 үшін 25 есе). Барлық үлгілер төмендегідей әрбір талдау үшін анықтаудың төменгі шегінен (LLD) жоғары мәндерді көрсетті: IL-1β, 1,2 pg/ml IL-1RA, 0,16 ng/ml IL-6, 1,7 pg/ мл IL-8, 0,8 pg/ml RANTES, 1,8 pg/ml MIP-3α, 16,4 pg/ml VEGF, 0,12 pg/ml және sICAM-1 pg/ml және sICAM-1, pg/ml, .SLPI үшін LLD 0,46 ng/ml болды, ал BD2 үшін LLD 12,2 pg/ml болды.

Статистикалық талдау.

Биомакер концентрациясын статистикалық модельдеу талдаулары үшін қалыпты үлестірімдерге түрлендіру үшін Box-Cox қуатты түрлендіру тәсілі қолданылды. Сипаттамалық статистика, соның ішінде медианалар мен диапазондар биомаркер деңгейлерін қорытындылау үшін пайдаланылды. Медиаторлар мен CVI деңгейлері, CVI клиникалық белгілері мен симптомдары және HC қолдану арасындағы байланыс Вилкоксон және Крускал-Уоллис сынақтары арқылы бағаланды. CVI, HC пайдалану және әйелдер сипаттамалары арасындағы байланысты бағалау үшін Фишердің нақты сынағы пайдаланылды. Жалпыланған сызықтық модельдер арқылы басқа CVI-ларды бақылайтын екі және көп айнымалы талдаулар жеке CVI және HC пайдаланудың медиаторлар деңгейлеріне әсерін зерттеу үшін пайдаланылды. Бұл зерттеу HC қолдану мен жатыр мойны қауіпсіздігі/иммунитет биомаркерлері арасындағы қарым-қатынасқа CVI әсерін зерттеу үшін қосымша деректерді талдауға негізделген. салдарынан пост hoc талдау қуатын есептеу сипаты қолданылмайды (79). Статистикалық талдаулар SAS 9.3 нұсқасын қолдану арқылы орындалды (SAS институты, Cary, NC).


НӘТИЖЕЛЕР

Бір имитацияланған деректер жиынына қолданба

Байездік әдістемемізді пайдалануды көрсету үшін біз алдымен 2000 және 2010 жылдар аралығында жүйелі аралықта іріктелетін 100 адамнан тұратын бір деректер жинағын модельдедік. Шежіре гетерохронды коалесценттік модельден (2-теңдеу) біріктірілген уақыт бірлігімен алынды. α = дейін Нeg = 5 жыл (1А-сурет). Тамырсыз филогенетикалық кіріс ағашын алу үшін жылына μ = 5 ауыстырудың орташа жылдамдығы осы генеалогияға қатаң молекулалық сағат моделі (3-теңдеу) қолданылды (1В-сурет). Біз сондай-ақ іріктеу күндерін енгізудің бір бөлігі ретінде қарастырамыз, тек әрбір жеке тұлғада белгісіз іріктеу күні болуының 10% ықтималдығы болғанын қоспағанда. Біз алдымен уақытша сигналды оңтайландыру үшін түбір позициясын таңдап, іріктеу күндеріне (белгілі болған кезде) қарсы түбірден ұшына дейінгі қашықтықтың сызықтық регрессиялық талдауын жасадық. Бұл жылына μ = 4,38 ауыстырылатын тактілік жиілігінің шамалы бағаланбауына және 1А-суреттегідей дұрыс тармақта орналасқан түбірдің, бірақ 1996 жылғы 21 ақпандағы болжамды күнімен 1996 жылғы 28 желтоқсандағы дұрыс түбір күнімен салыстырғанда төмен бағаланғанына әкелді. Бұл сызықтық регрессия модельмен түсіндірілетін дисперсияның жоғары үлесіне ие болды, Р 2 = 0,86, барлық нүктелер 95% сенімділік интервалдарының шегінде немесе оларға өте жақын (1С-сурет) және өте маңызды p-мәні П < 10 −4 ауыстыру сынағына негізделген ( 48).

Бір имитацияланған деректер жиынына қолданба. (А) дұрыс белгіленген шежіре. (Б) кіріс ретінде пайдаланылатын тамырсыз филогенез. (C) Түбірден ұшына (y осі) іріктеу күндеріне (x осі) қатысты сызықтық регрессия. (D) Ата-баба даталары үшін 95% CI көрсететін көк жолақтар және белгісіз іріктеу күндері үшін 95% CI көрсететін қызыл жолақтары бар болжалды генеалогия.

Бір имитацияланған деректер жиынына қолданба. (А) дұрыс берілген шежіре. (Б) кіріс ретінде пайдаланылатын тамырсыз филогенез. (C) Түбірден ұшына (y осі) іріктеу күндеріне (x осі) қатысты сызықтық регрессия. (D) Ата-баба даталары үшін 95% CI көрсететін көк жолақтар және белгісіз іріктеу күндері үшін 95% CI көрсететін қызыл жолақтары бар болжалды генеалогия.

Сызықтық регрессия арқылы бағаланған сағат жиілігі мен ағаш түбірінің екеуі де біздің MCMC процедурасының бастапқы нүктесі ретінде пайдаланылды. Әдепкі 10 5 итерацияның орындалу уақыты стандартты жұмыс үстелі компьютерінде ~10 минут болды. Төмендегі төртбұрышты жақшадағы мәндер болжалды параметрлердің 95% сенімді аралықтарын (95%CI) білдіреді. Біріктірілген уақыт бірлігінің α кейінгі таралуы 4,69 жылды құрады [3,66-5,98], ол модельдеуде пайдаланылған 5 жылдың дұрыс мәнін қамтиды. Ауыстыру жылдамдығы μ жылына орташа 4,96 болды [4,46–5,47], ол сонымен қатар жылына 5 дұрыс мәнін қамтиды. Түбірдің орналасуының артқы ықтималдығы дұрыс тармақ үшін ең жоғары болды, бірақ тек 0,56-ға тең, ал қалған ықтималдық нақты түбірден шыққан қысқа тармақтың астындағы екі тармақ арасында бөлінеді (1А-сурет). Бұл тармақтың қысқа болуына байланысты тамырдың нақты орналасуына қатысты белгісіздік болуы ғажап емес. Артқы орташа мән және 95% CI сынама алу күндері белгісіз болған барлық тектік түйіндер мен жапырақтардың күндері үшін де бағаланды (1D-сурет). Атап айтқанда, ағаштың тамырының орташа күні 1996 жылдың 24 қыркүйегінде [1995 жылдың 30 қазаны – 1997 жылдың 4 тамызы] болды, бұл дұрыс күн 1996 жылдың 28 желтоқсанын қамтиды.

Бірнеше симуляцияланған деректер жиынына қолданба

Біз жоғарыда сипатталған процедураны 100 имитацияланған деректер жиыны үшін қайталадық, олардың әрқайсысы бірдей коалесценттік уақыт бірлігімен α = 5 жыл, бірақ ауыстыру жылдамдығы μ жылына 0,1 және 10 арасында өзгереді. Әрбір деректер жинағы үшін α және μ екі параметрінің орташа мәнін және 95% CI мәнін бағаладық (2A сурет). Біз α үшін болжанған мәндер 5-тің дұрыс мәнінің айналасында қалғанын анықтадық, оның көпшілігі 95% CI 5-ті қамтиды, ал μ бағалаулары μ дұрыс мәнімен өсті, тағы да ең көбі 95% CI дұрыс мәндерді қамтиды. Содан кейін біз тағы 100 модельденген деректер жиыны үшін процедураны қайтадан қайталадық, бірақ бұл жолы μ = 5 тұрақты және α мәні 0,1 және 10 жыл аралығында өзгереді. Күтілгендей, біз бұл жағдайларда μ бағаланған мәндері тұрақты болып қалатынын және α-ның болжанған мәндері модельдеуде пайдаланылған дұрыс мәндерге сәйкес келетінін анықтадық (2В-сурет).

Қатаң сағатпен симуляцияланған бірнеше деректер жиынына қолданба. (А) Жүз модельденген деректер жиыны талданды, олардың әрқайсысында α = 5 және 0,1 < μ < 10 (x-осі) параметрлері және екі параметр үшін де болжамды орташа (y-осі, нүкте) және 95%CI интервалдары (y-) пайдаланылды. ось, сызық) көрсетілген. (Б) А панелімен бірдей, бірақ шынайы параметрлері 0,1 < α < 10 (x осі) және бекітілген μ = 5 болатын 100 модельдеуден тұратын басқа жиынды пайдалану.

Қатаң сағатпен симуляцияланған бірнеше деректер жиынына қолданба. (А) Жүз модельденген деректер жиыны талданды, олардың әрқайсысында α = 5 және 0,1 < μ < 10 (x-осі) параметрлері және екі параметр үшін де болжамды орташа (y-осі, нүкте) және 95%CI интервалдары (y-) пайдаланылды. ось, сызық) көрсетілген. (Б) А панелімен бірдей, бірақ шынайы параметрлері 0,1 < α < 10 (x осі) және тіркелген μ = 5 болатын 100 модельдеуден тұратын басқа жиынды пайдалану.

Осы уақытқа дейін қарастырылған модельдеу қатаң молекулалық сағаттың (3-теңдеу) көмегімен жасалды және қатаң және жеңіл сағат үлгілерінің 50-50 қоспасын пайдалану арқылы жасалды (Әдістерді қараңыз). Қорытындылайтын Байес факторлары 2А-суреттегі тек алғашқы екі модельдеуді қоспағанда, әрқашан дұрыс қатаң үлгінің пайдасына басым болды, олар үшін жылына сәйкесінше μ = 0,1 және μ = 0,2 ауыстырулар. Бұл модельдеуде пайдаланылған қатаң сағат жиілігі жеңіл сағат үлгісін жоққа шығару үшін тым төмен болды және бұл үшін 10 жылдан астам іріктеу аралығы қажет болады. Енді біз босаңсытылған сағат моделі (6-теңдеу) бойынша орындалған 100 модельдеудің жаңа жинағын қарастырамыз, онда коалесценттік уақыт бірлігі α = 5, орташа жылдамдығы жылына μ = 5 және тактілік жиіліктің стандартты ауытқуы σ. 0,1 мен 10 аралығында өзгереді. Қорытындылау аралас үлгі бойынша тағы бір рет орындалды, дәл сол шарттар бұрын. Біріктіру бірлігінің α және орташа тактілік жиілігінің μ бағалаулары дұрыс 5 мәнінің айналасында қалды, бұл мәннің көпшілігі 95% CI жабады, бірақ біз стандартты ауытқу σ өскен сайын μ бойынша белгісіздіктің де өскенін ескереміз (3-сурет). ). σ болжамды мәндері дұрыс мәндерден кейін болды, тек σ <2 болған жағдайдан басқа, бұл жағдайда σ жиі нөлге тең деп есептелді (3-сурет). Бұл модель бос сағат үлгісінің (σ > 0) орнына қатаң сағат үлгісі (σ = 0) деп қате тұжырымдалған деректер жиынына сәйкес келеді. Бұл әрекет күтілуде, өйткені бір салалық тактілік жиіліктердің стандартты ауытқуы σ шағын болған кезде (оның орташа μ-ге қатысты) сағаттың релаксациясы аз әсер етеді, сондықтан деректерді қатаң сағатта жасалған деректерден ажырату қиын. үлгі. Сондықтан бұл дұрыс емес үлгі таңдау мәселе емес және біріктірілген уақыт бірлігі α және эволюция жылдамдығы μ сияқты басқа параметрлік бағалауларға әсер етпейді (3-сурет). Дегенмен, бұл мінез-құлық модельді таңдауға тікелей әсер ететін бос сағат үлгісіндегі σ алдында жоғары ақпаратсызды таңдау нәтижесінде біздің алгоритм сағатты босаңсытып шақыруда салыстырмалы түрде консервативті екенін көрсетеді (53).

Босаңсытылған сағатпен симуляцияланған бірнеше деректер жиынына қолданба. Жүз модельденген деректер жиыны талданды, олардың әрқайсысында α = 5, μ = 5 және 0,1 < σ < 10 (x осі) параметрлері және осы параметрлер үшін болжанған орташа (y осі, нүкте) және 95% CI интервалдары пайдаланылды. (y осі, сызық) көрсетіледі.

Босаңсытылған сағатпен симуляцияланған бірнеше деректер жиынына қолданба. Жүз модельденген деректер жиыны талданды, олардың әрқайсысында α = 5, μ = 5 және 0,1 < σ < 10 (x осі) параметрлері және осы параметрлер үшін болжамды орташа (y осі, нүкте) және 95% CI интервалдары пайдаланылды. (y осі, сызық) көрсетіледі.

Жалпы алғанда, модельденген деректердегі бұл нәтижелер біздің MCMC процедурасының дұрыс екенін және модельдердің негізгі параметрлерін бағалау үшін айтарлықтай статистикалық күш бар екенін көрсетеді, демек, филогенияның ата-баба даталары туралы Байес тұжырымын дәл орындау үшін, кем дегенде, осы деректер жиынын имитациялау үшін қолданылатын шарттар. Жоғарыда келтірілген модельдеулерде пайдаланылатын параметрлер диапазоны бактерия популяцияларының геномдық эпидемиологиясында туындайтын типтік жағдайлардың өкілі болу үшін таңдалды. Атап айтқанда, геномдық алмастыру жылдамдығы түрлер арасында жоғарыда қарастырылған шама ретімен жылына 0,1 және 10 алмастыру арасында өзгереді (2, 24, 54). 100 геномның үлгісін секвенирлеуге қазіргі уақытта да бүкіл бактериялық геномдарды ретке келтіруге қажет шығындар мен уақыттың жақында қысқаруының арқасында жиі қол жеткізуге болады (55). 10 жыл ішінде біркелкі бейтарап іріктеу шеңбері туралы болжам әрқашан қол жеткізу мүмкін емес жақсы жағдай сценарийін білдіреді. Олай болмаған жағдайда, филогенетикалық ағаштың нақты мерзімін анықтаудың статистикалық күші азаюы мүмкін, сондықтан реконструкциялардағы белгісіздік артады, бұл біздің Байес әдісі түсіруге өте қолайлы.

Эталондық деректер бойынша басқа әдістермен салыстыру

Жоғарыда сипатталған модельденген деректер жиыны нақты бактериялық геномдық деректер жиынын эмуляциялауға арналған және сол модель модельдеу үшін де, қорытынды жасау үшін де пайдаланылды. Негізгі үлгідегі ауытқуларға біздің әдісіміздің сенімділігін тексеру және оны басқа әдістермен салыстыру үшін біз BactDating-ті бұрын сипатталған модельденген деректер жиынына да қолдандық (12). Бұл модельдеу кезеңді іріктеу уақыттары, орташа тактілік жиілігі бір учаскеде жылына 0,006 алмастыру және 1000 бит (12) ұзындықтағы реттілікпен туу-өлу процесіне негізделген хосттар арасындағы АИТВ эволюциясын еліктеуге арналған (12). Екі іріктеу схемасы қарастырылды: 10 жылға бөлінген 3 рет іріктелген 25 жеке тұлға және 2 жылға бөлінген 11 рет іріктелген 10 адам. Деректер жиынын генерациялау үшін екі молекулалық сағат моделі пайдаланылды: қатаң сағат моделі және корреляцияланбаған логнормальді босаңсытылған сағат. Таңдау схемалары мен сағат үлгілерінің төрт нәтижелі комбинациясының әрқайсысы үшін 100 деректер жиыны имитацияланды және нәтижелер S1 Қосымша суретте (бірінші іріктеу схемасы, қатаң сағат), Қосымша S2 суретте (бірінші іріктеу схемасы, бос сағат), Қосымшада көрсетілген. S3 суреті (екінші іріктеу схемасы, қатаң сағат) және қосымша S4 суреті (екінші іріктеу схемасы, бос сағат). Біз PhyML (19) көмегімен есептелген бұрын жарияланған тамырсыз филогениялар негізінде түбірдің сағат жиілігін және күнін бағалау үшін BactDating қолдандық. Біз өз нәтижелерімізді TempEst (13), LSD (12) және BEAST сияқты қатаң немесе еркін сағат үлгісін (6) пайдалана отырып, түбірден ұшына дейін талдаудың бұрын жарияланған нәтижелерімен салыстырдық. Бұрын жарияланған бірдей модельденген деректер treedater (16) және TreeTime (17) салыстыру үшін де қолданылған. Қатаң сағат деректер жиынында біз BactDating кем дегенде барлық басқа әдістер сияқты орындағанын анықтадық (Қосымша суреттер S1 және S3 ). Босаңсытылған сағат деректер жинақтарында BactDating басқа әдістерге ұқсас жұмыс істеді, дегенмен орташа сағат жиілігін төмендетпеу тенденциясы болды (қосымша S2 және S4 суреттері). Бұл, бәлкім, жоғары мутация жылдамдығы бар бұтақтардың қанығуымен байланысты болуы мүмкін, бұл LSD-нің неге ұқсас бейімділігін түсіндіреді. Алайда, мұндай қанығу бактериялық геномикада болмайды, өйткені әр сайттағы эволюциялық жылдамдықтар әлдеқайда төмен (2). Тұтастай алғанда, бұл нәтижелер BactDating тіпті филогенетикалық қайта құру қадамындағы жуықтаудың ең аз теріс әсерімен және ағаштың және эволюциялық модельдердің қате спецификациясына жоғары беріктігімен жобаланбаған жағдайларда да жақсы жұмыс істейтінін көрсетеді.

ADNA көмегімен ежелгі бактериялық патогенге қолдану

Лепра микобактериясы Орта ғасырларда бүкіл Еуропада эндемиялық болған алапес ауруының қоздырғышы болып табылады және әлі де дамушы әлемнің кейбір бөліктерінде денсаулыққа маңызды қауіп болып қала береді (56). Мұнда біз (31) бұрын жарияланған деректерді қайта талдаймыз, оның ішінде соңғы он геном (1982 және 2012 жылдар аралығында үлгіленген) және бес ежелгі геномдар (990 және 1369 аралығындағы үлгілер). Түбірі жоқ филогенетикалық ағаш PhyML (19) көмегімен қайта құрылды (қосымша S5 сурет). Детерминация коэффициентін барынша арттыратын түбірді таңдағаннан кейін Р 2 = 0,9, біз сынама алу күндері мен тамырдың ұшына дейінгі қашықтықтардың арасындағы күшті корреляцияны табамыз (4А-сурет), жылына бір геномға 0,0353 алмастыру жылдамдығы және болжалды түбір күні б.з.б. 928 жыл. Түбірден ұшына дейінгі барлық қашықтық қатаң молекулалық сағат бойынша күтілетін интервалға түседі (4А-сурет) және ағаш жапырақтарының аз санына қарамастан, күнді рандомизациялау сынағы (48) уақытша сигналдың маңызды екенін анықтады (48).П < 10 −4 ).

талдау Лепра микобактериясы деректер жинағы. (А) Түбірден ұшына (y осі) іріктеу күндеріне (x осі) қатысты сызықтық регрессия. (Б) Ата-баба даталары үшін 95% CI көрсететін көк жолақтары бар болжалды шежіре.



Пікірлер:

  1. Wynono

    You were not mistaken, truly

  2. Ferisar

    Жақсы жазылған. Әрине, позитив аз, бірақ мен оны бір деммен оқып шықтым

  3. Finian

    Сіз қателескеніңізге сенемін. Маған PM арқылы жіберіңіз, біз сөйлесеміз.

  4. Amall

    Not the hardship!

  5. Faris

    Wacker, it seems to me, it is a magnificent phrase



Хабарлама жазыңыз